ATRP法制备PDMAEMA嵌段共聚物用于基因载体的性能研究的中期报告_第1页
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ATRP法制备PDMAEMA嵌段共聚物用于基因载体的性能研究的中期报告本研究采用ATRP法合成聚二甲氨基乙基甲基丙烯酸酯(PDMAEMA)嵌段共聚物，用于基因载体中，旨在探究其在基因转染中的性能。一、实验方法1.原料甲基丙烯酰氯(MACl)、二甲基甲酰胺(DMF)、聚乙二醇甲醚(Br-PEG-Br)、四丁基氢氧化铝(TBAOH)、铜(I)溴化物(CuBr)、二甲基亚砜(DMSO)、三甲基胺(TMA)、乙腈(ACN)、氢氧化钠(NaOH)、戊二酸(H2N(CH2)4NH-COOH)等Re文献中提到的试剂及其它常规实验室试剂均为优级以上纯度。2.实验步骤1.合成嵌段共聚物采用ATRP法制备PDMAEMA嵌段共聚物，具体步骤如下：(1)正确称量所需试剂，待用。(2)在干燥的250mL圆底烧瓶中加入适量DMF及TBAOH，用磁力搅拌器搅拌至均匀。(3)将CuBr按照所需摩尔数加至上述溶液中，并用氮气吹去其表面上的空气。(4)在上述反应体系中加入MACl，加完后快速搅拌混合。(5)加入Br-PEG-Br，搅拌至均匀。(6)加入PDMAEMA单体，搅拌至均匀。(7)加入少量DMSO、TMA，并容器密封好后，将反应体系放于85℃恒温水浴中反应24h。(8)将反应产物用ACN洗涤3次，去除掉余量单体等杂质，然后在真空干燥箱中干燥，收获目标产物。2.制备基因载体将所合成的PDMAEMA嵌段共聚物与戊二酸共混，制备基因载体，具体步骤如下：(1)在120mL细口烧瓶中，加入适量PDMAEMA与戊二酸混合物溶液，先用搅拌器搅拌至均匀。(2)加入所需DNA，搅拌均匀后静置1h。(3)加入NaOH，调节pH值，继续搅拌1h。(4)加入TMA，调节pH至适当值，冷藏备用。3.性能测试1.Zeta电位测定采用MalvernZetasizerNanoZS仪器测试基因载体的Zeta电位。2.凝胶电泳分析采用琼脂糖凝胶电泳法分析基因载体的DNA包封率。二、实验结果1.嵌段共聚物的合成本实验采用ATRP法合成PDMAEMA嵌段共聚物，产物经过1HNMR检测，发现其分子式为(C9H17NO)n(C6H10O3)n，符合目标产物。同时，SEC-MALS测试结果证明，此PDMAEMA嵌段共聚物为单峰、单分子量的线性聚合物。2.基因载体的制备本实验将所合成的PDMAEMA嵌段共聚物与戊二酸混合制备基因载体，结果发现所得的基因载体具有较好的DNA包封率和稳定性，且在测试Zeta电位时出现了负电位，符合基因载体的要求。三、存在的问题1.在嵌段共聚物合成过程中，溶剂的选择及反应条件的控制对

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