外用芒硝对大鼠外伤性血瘀模型的影响

外用芒硝对大鼠外伤性血瘀模型的影响

芒硝是用未经处理和精制的硫酸盐芒硝工艺精制而成的晶体。主要是含有硫酸钠（na2so4）的水硫酸钠（10h2o），如《医学同益记》。2005版药典记载其功能为泻热通便,润燥软坚,清火消肿;用于实热便秘、大便燥结、积滞腹痛、肠痈肿痛,外治乳痈、痔疮肿痛。现代临床报道芒硝外用可用于静脉炎、产后乳胀、骨关节肿及软组织损伤、肠梗阻等疗效确切。本文通过动物实验研究为芒硝临床外用提供依据。材料表面1.动物清洁级Wistar大鼠,体质量180-200g,雌雄各半,由河北省医学实验动物中心提供,合格证号804122。方法1.非开放性可变性模型材料的制备取体质量180-200g大鼠50只,雌雄各半,随机均匀分为大、小剂量芒硝组、田七跌打风湿膏组、模型组、空白组,每组10只。实验前1d将大鼠右后肢脱毛,并测量其周长。实验当天除空白组外,将其余各组大鼠固定,将1根直径为3cm、高25cm的空心管置于大鼠右后肢软组织上,然后把1根重1000g钝头铁杵,自空心管顶端自由落体击中大鼠右后肢软组织,造成有明显皮下出血及肿胀的非开放性软组织损伤模型。造模型后测量各组大鼠右后肢周长并进行症状积分,然后给于相应药物,大、小剂量芒硝组分别以药棉吸附40%、20%芒硝溶液后湿敷(用量约为1.5mL/cm2),田七跌打风湿膏组涂抹田七跌打风湿膏(损伤部位均匀涂2mm厚,约0.25g/cm2),模型组和空白组以药棉吸附生理盐水后湿敷(用量约为1.5mL/cm2),给药后均以保鲜膜覆盖胶布固定,每天保持药物接触皮肤6h,6h后以温生理盐水清洗用药局部。每天用药1次,连续用药5d。2.瘀血、水肿、单一分每天记录造模局部症状积分和周长变化(周长变化=用药后周长-用药前周长,小于0按0计)。损伤部位积分评定方法:皮下瘀血:多量瘀血,计2分;少量点状瘀血,计1分;无瘀血者,计0分。肌肉肿胀:明显肿胀,计2分;稍有肿胀,计1分;无肿胀者,计0分。肌肉颜色:紫暗色深,计2分;暗红色浅,计1分;色泽正常,计0分。于第6d早上大鼠眼眶取血,检测血液流变学指标,取大鼠造模肿胀局部组织用10%甲醛固定,常规病理切片,观察病理变化。3.统计方法数据分析用SPSS13.0fowindows统计软件包进行数据资料的统计学处理,计量资料用表示,计数资料采用秩和分析。大鼠右术后损伤局部症状积分1.由表1可看出,与空白组比较,模型组大鼠在第1、3、5d右后肢损伤局部症状积分均显著升高(P<0.01),说明造模成功。与模型组比,造模第1d,给药各组大鼠右后肢损伤症状积分无显著性差异,说明分组均匀;造模第3d大鼠右后肢损伤局部症状积分,小剂量芒硝组可显著降低(P<0.01),大剂量芒硝组及和田七跌打风湿膏组明显降低(P<0.05);造模第5d大鼠右后肢损伤局部症状积分,小剂量芒硝组和田七跌打风湿膏组大鼠可显著降低(P<0.01),大剂量芒硝组明显降低(P<0.05)。2.由表2可看出,与空白组比较,模型组大鼠在第1-5d右后肢周长变化均显著升高(P<0.01),说明造模成功。与相应模型组比较,在用药第2-5d,小剂量芒硝组和田七跌打风湿膏组大鼠右后肢周长变化值均显著减小(P<0.01);在用药第4d,大剂量芒硝组大鼠右后肢周长变化值明显减小(P<0.05),第5d,大剂量芒硝组大鼠右后肢周长变化值显著减小(P<0.01)。2.光度计和仪器WFZUV2000型紫外可见分光光度计,尤尼卡(上海)仪器有限公司生产;FA(N)/JA(N)系列电子天平,上海民桥精密仪器有限公司。3.各组大鼠右术后皮肤主动防御机制比较芒硝,购自河南张仲景大药房股份有限公司,经河南中医学院中药鉴定教研室鉴定为含硫酸钠的天然矿物经精制而成的结晶体NatriiSulfas,含水硫酸钠(Na2SO4·10H2O);田七跌打风湿膏,广州白云山制药股份有限公司,批号:N1001;喜疗妥,DAIICHISANKYOEUROPEGmbH,批号:456004;二甲苯,天津市化学试剂三厂,批号:20051028;伊文思兰,南京奥多福尼生物科技有限公司,批号:20050406;甘露醇,郑州永和制药有限公司,生产批号:20080306;氯化钠注射液,郑州永和制药厂有限公司,批号:080302221;甲醛,中国莱阳市双双化工有限公司,生产批号:20070519。3.从表3可看出,与空白组比,模型组全血黏度、全血还原黏度、全血低切相对黏度及红细胞聚集指数均显著性升高(P<0.01),血浆黏度可明显升高(P<0.05),说明出现血瘀症状。与模型组相比,大、小剂量芒硝组和田七跌打风湿膏组可显著降低全血黏度、全血低切还原黏度及红细胞聚集指数(P<0.01);大剂量芒硝组可明显降低红细胞压积、全血高切还原黏度、红细胞刚性指数和全血高低切相对黏度(P<0.05),小剂量芒硝组可显著降低全血高切还原黏度、红细胞刚性指数和全血高低切相对黏度(P<0.01),可明显降低血浆黏度、红细胞压积(P<0.05)。4.实验各组大鼠右后肢皮肤血瘀组织病理组织学观察结果如下:空白组大鼠皮肤表皮各层结构和真皮层结构中毛囊、汗腺、皮脂腺均正常;模型组大鼠皮肤表皮各层结构和真皮结构中的局部组织严重受损,表皮结构缺损,真皮组织可见残存毛囊、汗腺、皮脂腺组织并有大量炎症细胞浸润;大剂量芒硝组大鼠受损皮肤表皮未有恢复,而真皮层结构中的毛囊、汗腺、皮脂腺明显得到恢复只见少数的炎细胞浸润;小剂量芒硝组大鼠受损皮肤表皮有所恢复而真皮层结构中毛囊、汗腺、皮脂腺明显得到恢复,可见少数炎细胞浸润;田七跌打风湿膏组大鼠皮肤表皮的各层结构和真皮层结构中毛囊、汗腺、皮脂腺明显恢复。从表4可看出,经Ridit检验,与空白组比,模型组出现显著的病理组织损伤(P<0.01);与模型组比,大、小剂量芒硝组及田七跌打风湿膏组均可显著改善大鼠局部病理组织损伤(P<0.01)。不同剂量连续剂对大鼠右后期损伤症状积分的影响目前常用铁杵击大鼠右后肢软组织造外伤性血瘀模型,右后肢出现红肿、瘀血、青紫,此与临床软组织损伤症状一致。在组织损伤早期,出现由于血管损伤,扩张充血,微小血栓的产生致微循环不畅,中性粒细胞、单核细胞等炎性物质在局部浸润,使血管壁通透性增加,产生红肿、瘀血;及时冷敷可减轻局部组织充血和出血,使毛细血管收缩,微血管通透性降低,减轻局部充血肿胀。本实验采用具有苦咸之性的芒硝外敷治疗,中医认为芒硝苦能泻热,咸能软坚,其性善消,入血分,故善消瘀血,能通化一切瘀滞;本品物理性质比较特殊,主要成份是盐类物质,具有良好的吸潮性,与水相溶,渗透性强,冰点低,自身有吸收热量的特性,可使毛细血管收缩,减轻充血肿胀。为较好判断芒硝外用对外伤性血瘀的疗效,本实验对右后肢损伤症状积分变化、右后肢同一位置的周长变化、血液流变学指标及病理变化进行评价;损伤症状积分变化及周长变化能直观的反映损伤局部组织的肿胀程度,检测后肢周长更方便;血瘀的形成与血液流变性、血流动力学变化有关,血液流变学检测是观察血瘀情况的一个重要指标;组织病理学变化可以反应受损组织各层皮肤的炎细胞浸润程度和愈合情况。实验结果显示小剂量芒硝组大鼠右后肢损伤症状积分、周长变化及病理变化的影响比大剂量芒硝组效果好;小剂量芒硝组可显著降低全血黏度、全血低切还原黏度及红细胞聚集指数、全血高切还原黏度、红细胞刚性指数和全血高低切相对黏度,明显降低血浆黏度、红细胞压积;大剂量芒硝组可显著降低血液流变学的部分指标,提示芒硝外用可以消肿,改善血液循环,但量效关系不明显,甚至大剂量芒硝外用药效不如小剂量芒硝外敷效果好;其可能的原因是,每次吸附芒硝溶液的药棉给大鼠外敷有6h,大剂量芒硝组因浓度高,一定敷药时间后