盐酸莫西沙星注射液杂质含量测定

盐酸莫西沙星注射液杂质含量测定

盐酸莫沙星注射液的有效成分是莫沙星，它是一种新型的第四代八-羟色胺类药物。这是一种类似于抗炎药的药物之一，可以广泛地用作抗菌谱。在已完成的20余项临床实验中,莫西沙星体现了良好的安全性和药动力特性,具有口服吸收良好的特点,平均绝对生物利用度达到90%,血浆蛋白结合率则为50%,组织穿透性也较良好。在盐酸莫西沙星原料的合成过程中会有相关物质的引进,并且盐酸莫西沙星注射液在配制和储存的过程中可能有不同程度的降解,从而可能产生以下几种杂质:杂质A分子式为C20H21F2N3O3,分子量为389.40;杂质B分子式为C22H27N3O5,分子量为413.47;杂质C分子式为C22H26FN3O4,分子量为415.46;杂质D分子式为C21H24FN3O4,分子量为401.43;杂质E分子式为C20H22FN3O4,分子量为387.40。采用适当的分析方法,实现对以上5种杂质的分析检测并进行逐一控制,对盐酸莫西沙星注射液在用药过程中能发挥安全有效的作用具有重要意义。分析方法主要采用HPLC法,作者采用苯基硅烷键和硅胶作为填充剂HPLC方法,通过工艺调整,使得该方法易操作,以满足莫西沙星供试样测定使用。1材料和方法1.1莫西瓜星杂质的制备盐酸莫西沙星杂质A(AUSPCertificate);盐酸莫西沙星杂质B,C,D,E(MolcavCorporation);莫西沙星标准液,甲醇(色谱纯,美国HONEYWELLB&J);水(二次蒸馏);四丁基硫酸氢铵,磷酸二氢钾,磷酸,均为分析纯。莫西沙星杂质A储备液:取莫西沙星杂质A2.5mg,置于25mL容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。莫西沙星杂质A样品:量取上述杂质A储备液1mL置于100mL容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀。杂质B,C,D,E储备液及样品的配制同上。1.2紫外检测仪器所使用的仪器主要有:高效液相色谱仪(LC-10ATVP溶剂输送泵,CTO-10AVP柱温箱,SPD-M10AVP紫外检测器,CLASS-VP色谱工作站,均为日本岛津公司产品;苯基硅烷键和硅胶色谱柱(天津博纳艾杰尔科技有限公司),FA2004电子天平(上海天平仪器厂),PHS-3C=酸度计(上海佑科仪器仪表有限公司)。1.3丁基硫酸氢铵检测条件色谱柱是苯基硅烷键和硅胶色谱柱,以甲醇∶混合液(0.5g/L四丁基硫酸氢铵,1.0g/L磷酸二氢钾和3.4g/L磷酸等体积混合)=28:72(体积比)为流动相,检测流速是1.3mL/min,波长293nm,柱温是45℃。1.4关于杂质的线性试验方法1.5测定不同时间点点稳定性分别将盐酸莫西沙星杂质样品在室温下放置,经0,1,2,4,6,8h,在不同时间点分别取样10μL,注入液相色谱仪,测定其峰面积,考查其稳定性。1.6莫-沙星标准样的取样方法称取5mg莫西沙星用流动相配制成5mL溶液,摇匀。量取10μL注入液相色谱仪,记录相关数据。2结果与讨论2.1杂质的线性回归分析以表1中的浓度为横坐标,峰面积为纵坐标(见图1),再对标准曲线进行线性回归分析,零点强制通过,可以得到线性回归方程和相关系数,由图1中的曲线可以得到结论,在一定浓度范围(0.6~1.4μg/mL)内,杂质的线性关系良好,可以满足盐酸莫西沙星注射液对杂质的线性要求。2.2测定峰面积、稳定性分别将盐酸莫西沙星杂质样品在室温下放置,经0h,1h,2h,4h,6h,8h,在不同时间点分别取样10μL注入液相色谱仪,测定峰面积,考查其稳定性,结果见表2。通过表2中的数据所得峰面积的相对标准偏差s为0.29%~0.72%,而在1.3中规定的色谱条件下,峰面积s的正常波动范围是在0.2%~0.9%之内,由此可知在室温下放置8h后杂质溶液仍然稳定,能够满足盐酸莫西沙星注射液对杂质溶液稳定性的要求。2.3杂质的含量莫西沙星标准品测试条件同2.1和2.2,结果如表2所示。由表2数据可知,杂质A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,由线性试验和稳定性试验可知,标准品杂质浓度均在线性范围内,且可稳定存在,由保留时间可知,在所设置的测试条件下,峰分离度良好,可用于供试样的测试。3莫沙地星标准品溶液在所设置的实验条件下,当杂质浓度在0.6~1.4μg/mL时,杂质的线性关系良好。在室温下放置8h后杂质溶液仍然稳定。莫西沙星标准品测试结果显示,对于1mg/mL的标准样品溶液,杂质A,B,C,D,E的含量均低于莫西沙星含量的0.15%,稳定性和线性均能满足测试要求