第六章 药物含量测定技术

第六章

药物含量测定技术

目录§6-1  药物含量测定方法概述

§6-2  容量分析法§6-3  光谱分析法§6-4  色谱分析法§6-1药物含量测定方法概述学习目标掌握药物的含量测定方法选择，会运用计算公式解决计算问题。案例导入

安徽省滁州市77岁的吕先生，自11年前查出脑梗后便遵医嘱每天服用阿司匹林，以降低脑梗的发病风险。2018年的春天，吕先生在家附近的药房购买了3盒阿司匹林肠溶片，取出一片含在嘴里，喝水送服竟然立马化了，而且原本应该无味的药“还有点甜”。服药一个月后，吕先生开始“走路发飘、头脑糊涂”，连别人讲话都听不大懂。吕先生家人向当地食品药品稽查支队举报。经安徽省食品药品检验研究院鉴定，被查获的假“阿司匹林肠溶片”“硝苯地平控释片”有效药物含量为零，不具有任何疗效。讨论：1.阿司匹林肠溶片应该采用什么方法进行含量测定？合格标准是多少？

2.药物的含量测定方法有哪些？药物含量测定1.药物含量测定是指测定药物中的有效成分或指标成分的含量，是评价药物质量的重要指标。2.测定方法：容量分析法、光谱分析法和色谱分析法。3.剂型特点：原料——准确重现

制剂——专属灵敏§6-2容量分析法学习目标1.掌握常见的药物含量测定的容量分析法，并能选择合适的定量分析法完成含量计算。2.理解滴定度、浓度校正因子概念。3.了解容量分析法的特点。一、容量分析法的特点

也称滴定分析法：将已知浓度滴定液滴加至被测药物溶液中，至滴定终点，根据滴定液的浓度、体积和滴定度，计算含量。容量分析法一、容量分析法的特点1.容量分析法的特点（1）方法简便易行（2）方法耐用性高（3）测定结果准确（4）方法专属性差一、容量分析法的特点常用的容量分析法：非水溶液滴定法、酸碱滴定法、配位滴定法、氧化还原滴定法、沉淀滴定法等。常用的滴定方式有３种：直接滴定法、剩余滴定法（返滴定法或回滴定法）、置换滴定法。二、容量分析法的相关计算1.滴定度2.浓度校正因子3.含量的计算（1）直接滴定法（2）间接滴定法二、容量分析法的相关计算1.滴定度（T）定义：每1

mL规定浓度的滴定液所相当的被测药物的质量，mg。例如：用碘量法测定维生素Ｃ的含量时，《中国药典》规定：每1mL碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6（维生素C）。二、容量分析法的相关计算2.浓度校正因子（F）定义：滴定液的实际配制浓度与规定浓度的比值称为校正因子，常用“F”表示。3.含量的计算（1）直接滴定法

T为滴定度（mg/ml）；V为供试品消耗滴定液的体积（ml）；F为滴定液浓度校正因子；ms为供试品的取样量（g）二、容量分析法的相关计算例6-1：维生素C的含量测定

精密称取维生素C0.2238g，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.05022mol/L）滴定至溶液显蓝色并在30秒钟内不褪，消耗碘滴定液（0.05022mol/L）25.12ml。已知每1ml碘滴定液（0.05mol/L）相当于8.806mg的C6H8O6。《中国药典》规定本品含C6H8O6不得少于99.0%。请计算维生素C的含量并判断是否符合规定？

结论：本品维生素C的含量为99.3%，符合规定。二、容量分析法的相关计算3.含量的计算（2）剩余滴定法

T为滴定度（mg/ml）；V空白为空白试验消耗滴定液B的体积（ml）；V样品为样品消耗滴定液B的体积（ml）；F为滴定液浓度校正因子；ms为供试品的取样量（g）二、容量分析法的相关计算例6-2：司可巴比妥钠的含量测定

取本品约0.1g，精密称定，置250ml碘瓶中，加水10ml，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加盐酸5ml，立即密塞并振摇1分钟，在暗处静置15分钟后，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10ml，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml溴滴定液（0.05mol/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。

已知供试品的取样量为0.1022g，硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）浓度校正因子为1.038，供试品消耗硫代硫酸钠滴定液15.73ml，空白试验消耗硫代硫酸钠滴定液23.21ml。《中国药典》规定本品含C12H17N2NaO3不得少于98.5%。请计算司可巴比妥钠的含量并判断是否符合规定？

结论：本品司可巴比妥钠的含量为98.8%，符合规定。二、容量分析法的相关计算§6-3光谱分析法学习目标1.理解紫外-可见分光光度法和荧光分光光度法的特点。2.了解紫外-可见分光光度法和荧光分光光度法的药物含量测定适用范围。3.会运用紫外-可见分光光度法完成药物含量的测定。一、紫外-可见分光光度法

紫外-可见分光光度法是基于物质分子对紫外光区和可见光区的单色光辐射的吸收特性建立的光谱分析方法。定义一、紫外-可见分光光度法1.朗伯-比尔定律（原理）定义：单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度（光路长度）成正比。公式：

A为透光率，E为吸收系数，

c为溶液浓度（g/ml），l为液层厚度（cm）

一、紫外-可见分光光度法2.方法特点（1）波长范围为190～800nm；（2）灵敏度高；（3）准确度高；（4）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及；（5）应用广泛。

一、紫外-可见分光光度法3.仪器校正与检定（1）

波长（2）

吸光度的准确度（3）

杂散光的检查4.对溶剂的要求

一、紫外-可见分光光度法5.测定法（1）

对照品比较法

溶液浓度原料药制剂一、紫外-可见分光光度法5.测定法（2）

吸收系数法

一、紫外-可见分光光度法5.测定法（3）

计算分光光度法

对照品和供试品的测试条件应尽可能一致计算分光光度法一般不宜用作含量测定（4）

比色法

适用范围：紫外光区无强吸收或有干扰药物的测定为了避免干扰或提高灵敏度，可加入适当的显色剂，使反应产物的最大吸收移至可见光区二、荧光分光光度法

物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波长较长的荧光；当激发光停止照射后，荧光随之消失；激发光谱和荧光发射光谱，用于定性分析；荧光强度用于定量分析。定义二、荧光分光光度法1.方法特点（1）灵敏度高；（2）荧光自熄灭；（3）干扰因素多；（4）线性范围窄；（5）取样少，方法快速。

二、荧光分光光度法2.测定法（对照品比较法）

cX为供试品溶液的浓度；cr为对照品溶液的浓度；Rx为供试品溶液的荧光强度；Rxb为供试品溶液试剂空白的荧光强度；Rr为对照品溶液的荧光强度；Rrb为对照品溶液试剂空白的荧光强度

§6-4色谱分析法学习目标1.掌握高效液相色谱法和气相色谱法的色谱条件、系统适应性实验内容、含量测定方法。2.理解高效液相色谱法和气相色谱法含量测定的计算公式。色谱分析法根据分离原理吸附色谱法分配色谱法离子交换色谱法分子排阻色谱法根据分离方法纸色谱法薄层色谱法柱色谱法高效液相色谱法气相色谱法根据流动相气相色谱法液相色谱法超临界流体色谱法1.分类色谱分析法2.方法特点（1）高灵敏度；（2）高选择性；（3）高效能与高速度。

一、高效液相色谱法

高效液相色谱法（HPLC）系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法。定义一、高效液相色谱法1.对仪器的一般要求和色谱条件（1）色谱系统色谱柱：ODS；3.9~4.6mm；3~10

m检测器：紫外-可见分光检测器流动相：甲醇/乙腈-水

一、高效液相色谱法1.对仪器的一般要求和色谱条件（2）仪器及色谱柱维护注意事项①流动相使用前应采用0.45μm滤膜滤过并经脱气处理，流动相中应尽可能不用缓冲盐，如需用时，应尽可能使用低浓度缓冲盐，每日使用后应充分冲洗；②用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱时，流动相中有机溶剂一般不低5％，否则C18链随机卷曲将导致柱效下降、组分保留值变化、造成色谱系统不稳定；③色谱柱保存时应保持填料在湿润状态，两端密塞，如C18柱可在甲醇中保存。

一、高效液相色谱法2.系统适用性试验（1）色谱柱的理论板数（n）

一、高效液相色谱法（2）分离度（R）：用于评价待测组分与被分离组分之间的分离程度，是衡量色谱系统分离效能的关键指标。

一、高效液相色谱法（2）分离度（R）

定量分析时，为便于准确测量，一般要求待测组分色谱峰与相邻色谱峰或内标峰之间的分离度应大于1.5。一、高效液相色谱法（3）灵敏度：用于评价色谱系统检测微量物质的能力，通常以信噪比（S/N）表示。（4）拖尾因子（T）：用于评价色谱峰的对称性。T值应在0.95～1.05。

一、高效液相色谱法（5）重复性

用于评价色谱系统连续进样时响应值的重复性能。

除另有规定外，通常取各品种项下的对照品溶液连续进样5次，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0％一、高效液相色谱法3.测定法（1）内标法

AS为内标物质的峰面积或峰高；AR为为对照品的峰面积或峰高；cS为内标物质的浓度；cR为对照品的浓度；f为内标法校正因子一、高效液相色谱法

一、高效液相色谱法3.测定法（2）外标法

cX为供试品的浓度；AX为供试品的峰面积或峰高；AR为对照品的峰面积或峰高；cR为对照品的浓度。二、气相色谱法

以气体为流动相的色谱法称为气相色谱法（GC）。GC法适合于对热稳定、受热易气化的药物测定。定义二、气相色谱法1.对仪器的一般要求（1）载气源（2）进样部分（3）色谱柱（4）柱温箱（5）检测器（6）数据处理系统