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文档简介
紫花地丁水浸出物抗乙型肝炎病毒的实验研究的任务书一、研究背景与意义乙型肝炎病毒(HBV)是一种致病性病毒,全球范围内约有2亿人携带该病毒。HBV感染可引发急性或慢性乙型肝炎,甚至导致肝硬化和肝癌。目前,虽然有乙肝疫苗可以预防感染,但治疗乙型肝炎仍然是一项难题,目前临床上使用的治疗方法效果不尽如人意,且存在一定副作用。因此,寻找一种安全有效的治疗方法,具有重要的临床意义。紫花地丁水浸出物(PE)是传统中药,被广泛运用于临床上,具有清热解毒、利尿退黄、消肿止痛等功效。在过去的一些研究中,证明PE具有抗氧化、抗炎、抗病毒等作用。因此,本研究将探讨PE对HBV的抗病毒活性,并为开发具有抗HBV活性的中药提供科学依据。二、研究内容/目标本研究的主要内容是探讨PE对HBV的抗病毒活性。具体研究内容如下:1.确定PE的浓度-反应时间杀毒曲线;2.探究PE对HBVRNA复制的影响;3.探究PE对HBV核心蛋白(HBcAg)合成的影响;4.探究PE对HBV表面抗原(HBsAg)的影响;5.探究PE对HBV包膜蛋白(HBVS)合成的影响。三、研究方法1.实验物质:PE、HBV;2.灭毒处理:HBV用过氧化氢(H2O2)灭毒;3.病毒感染:用HBV灭毒液感染培养的肝细胞;4.细胞毒性实验:MTT方法;5.浓度-反应时间杀毒曲线实验;6.qRT-PCR实验:冲式PCR(ABIPrism7300);7.免疫印迹实验:Westernblot;8.统计分析:SPSS21.0。四、预期结果通过本研究,预计可以获得以下结果:1.获得PE的浓度-反应时间杀毒曲线;2.证明PE能够显著抑制HBVRNA复制;3.发现PE能够抑制HBcAg合成,降低HBVDNA含量;4.发现PE能够抑制HBsAg表达,显示PE对HBV外壳蛋白的影响;5.发现PE能够抑制HBVS合成,标志性地证实了PE具有对HBV包膜蛋白的影响。五、实验安全与伦理本研究实验将在符合生物安全法规定的条件下进行,病毒感染前将进行灭菌处理以及符合实验安全标准的防护措施。六、参考文献1.ZhangY,etal.ProtectiveeffectofpolyphenolsextractofPolygonumcapitatumagainstoxidativedamageinliverofmiceinducedbydiquat[J].InternationalJournalofClinicalandExperimentalMedicine,2016,9(1):1849-1858.2.HsuTH,etal.SweetpotatoleafextractinhibitshepatitisBvirusreplicationinhumanHepG2cells[J].JournalofMedicinalFood,2013,6(4):364-369.3.ZhengYF,etal.Antiviralactivityofpolygonumcapitatumonhepatitis
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