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文档简介
13生物科学制作者:杨金标&赵訸甲&陈姗姗&黄芳&黄温馨&刘亚楠实验结果
(第
一 组)实验九 糖原的提取及鉴定的实验结果注意事项实验用小动物在实验前必须饱食,因为在空腹时肝糖原易分解而是其含量减少。肝脏离体后,肝糖原会迅速分解,所以再杀死动物后,所得肝脏必须迅速用三氯醋酸溶液处理。一、实验目的了解并掌握唾液淀粉酶活力的测定方法二、实验原理唾液淀粉酶能催化水解淀粉,生成分子较小的糊精和麦芽糖。本实验利用碘的呈色反应来测定唾液淀粉酶水解淀粉作用的速度,从而测定唾液淀粉酶活力的大小。三、实验仪器和试剂1.仪器(1)多孔白瓷板
(2)50mL三角瓶(3)恒温水浴锅(6)100mL容量瓶(4)烧杯(7)漏斗(5)500mL容量瓶(8)吸管2.试剂(1)原碘液:称取碘11g、碘化钾22g,加少量蒸馏水完全溶解后,定容至500mL,于棕色瓶中保存。(2)稀碘液:吸取原碘液2mL,加碘化钾20g,用蒸馏水溶解,定容至500mL,于棕色瓶保存。(3)标准“终点色”溶液①准确称取氯化钴40.2439g、重铬酸钾0.4878g,加蒸馏水溶解并定容至500mL。②准确称取铬黑T
40mg,加蒸馏水溶解并定容至100mL。取①液80mL与②液10mL混合,即为终点色。冰箱保存。四、操作步骤(1)将“标准色”溶液滴于白瓷板的左上角空穴内,作为比较终点色的标准。(2)在50mL的三角瓶中,加入2%可溶性淀粉溶液20mL,加缓冲液5mL在37℃水浴中平衡约10min,加入0.5mL稀释唾液,立即记录时间,充分摇匀。定时用滴管取出反应液约0.25mL,滴于预先充满此稀碘液(约0.75mL)的调色板空穴内,当空穴颜色由紫色变为棕红色,与标准色相同时,即为反应终点,记录时间T(min)。五、计算1mL
唾液淀粉酶于
37℃
、
pH 6.8的条件下,
1h
液化可溶性淀粉的克数,称为唾液淀粉酶的活力单位。酶活力单位=(60/T×20×2%×n)/0.5n——唾液淀粉酶稀释倍数
60——1h(60min)0.5——吸取待测唾液淀粉酶的量(mL)2%——淀粉浓度20—
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