土壤和沉积物 挥发酚的测定 流动注射4-氨基安替比林分光光度法

1T/HNNMIA.001—2023土壤和沉积物挥发酚的测定流动注射4-氨基安替比林分光光度法本文件描述了流动注射4-氨基安替比林分光光度法测定土壤和沉积物中挥发酚含量的方法。本文件适用于土壤和沉积物中挥发酚的测定。本方法测定下限为0.44mg/kg。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6379.2测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法GB/T6379.4测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第4部分：确定标准测量方法正确度的基本方法GB/T8170数值修约规则与极限数值的表示和判定海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输海洋监测规范第5部分：沉积物分析HJ/T166土壤环境监测技术规范HJ613土壤干物质和水分的测定重量法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。挥发酚volatilephenols指在本文件规定的条件下可以从土壤和沉积物中提取出、能随水蒸气蒸馏出并与4-氨基安替比林反应生成有色化合物的挥发性酚类化合物，结果以苯酚计。术语和定义来源于HJ998-2018中3.1条款。4方法原理用碱性溶液提取土壤和沉积物中的酚类化合物，提取液通过流动注射仪在线酸化，于165℃±2℃蒸馏，蒸馏出的挥发酚在铁氰化钾催化剂存在的碱性溶液中与4-氨基安替比林反应，生成橙红色的吲哚酚安替比林染料，在波长510nm处测量吸光度，获得挥发酚浓度。2T/HNNMIA.001—20235试剂和材料除标准溶液外，其他溶液和实验用水均需除气。5.1氢氧化钠（NaOH优级纯。5.2硼酸（H3BO3优级纯。5.3铁氰化钾[K3Fe(CN)6]，优级纯。5.44-氨基安替比林（C11H13N3O），优级纯。5.5氯化钾(KCl)，优级纯。5.6五水硫酸铜（CuSO4·5H2O）。5.7精制苯酚。5.8磷酸(1.69g/mL)。5.9石英砂：在400℃灼烧4h，冷却至室温后转移至磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。5.104-氨基安替比林溶液（0.60g/L）：称取0.30g4-氨基安替比林（5.4）溶于适量水中，用水稀释至500mL，摇匀。5.11氢氧化钠溶液（0.025mol/L）：称取1.00g氢氧化钠（5.1）溶于水，定容至1000mL，摇匀，贮于聚乙烯容器中。5.12氢氧化钠溶液（10g/L）：称取10.00g氢氧化钠（5.1）溶于水，定容至1000mL，摇匀，贮于聚乙烯容器中。5.13铁氰化钾缓冲溶液（pH=10.3称取2.00g铁氰化钾（5.33.10g硼酸（5.2）和3.75g氯化钾（5.5）溶于适量水中，再称1.88g氢氧化钠（5.1溶解后调节溶液的pH值为10.3，容量瓶中定容，混匀。置于冰箱内冷藏，可保存一周。5.14五水硫酸铜（5g/L）：称取5.00g五水硫酸铜（5.6）溶于1L水中，玻璃试剂瓶中保存。5.15磷酸溶液[30%（V:V）]：量取150mL磷酸（5.8）加入约300mL水，冷却后定容至500mL，摇匀。5.16无酚水可按照下列三种方式制备。方式二：每升水中加入0.2g经200℃活化30min的活性炭粉末，充分振摇后，放置过夜，用双层中速滤纸过滤。3T/HNNMIA.001—2023氢氧化钠溶液（5.11）稀释至100mL。5.19广口聚乙烯瓶：500mL，具有螺旋盖。6仪器设备6.1流动注射仪。6.3超声波仪：频率为40kHz。7样品7.2采集后的样品应置于4℃以下冷藏保存，保存期为7.3干扰和消除7.3.2硫化物会干扰挥发酚的测定，在样品中加入过量五水硫酸铜可消除含量低于3.0×104mg/kg硫化物的干扰。7.4称取10.00g试样（7.1精确至0.01g。8试验步骤8.1水分的测定土壤样品干物质含量按照HJ613规定的方法测定，沉积物样品含水率按照GB17378.5规定的方法测定。8.2空白试验以石英砂（5.9）为空白，随同试样进行两份空白试验。8.3验证试验随同试样分析与被测试样性质相同或相近的标准物质。8.4试液提取将试料（7.4）放入500mL聚乙烯瓶中（5.19），向聚乙烯瓶中加入10mL5g/L硫酸铜溶液(5.14）和190mL10g/L氢氧化钠溶液（5.12加盖，于150r/min水平振荡（6.4）10min，或用超声波仪（6.3）超声10min后，静置5min，用定量滤纸过滤，收集滤液。注：样品提取液应若不能及时分析，4℃下密封保存，保存期为14d。8.5测定按照流动注射仪操作说明书安装分析系统，采用附录A表（A.1）设定仪器工作条件，以实验用水4T/HNNMIA.001—2023代替所有试剂，检查整个分析流路的密闭性及液体流动的顺畅性，15min后，将各个进试剂的毛细管插入相应的试剂瓶中，待基线稳定后分别测定空白试验溶液（8.2）、验证试验溶液（8.3）和试液（8.4）溶8.6校准曲线绘制稀释至标线并摇匀，配制的挥发酚质量浓度分别为：0.000mg/L、0.020mg/L、0.040mg/L、0.100mg/L，0.200mg/L、0.400mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L。将标准系列溶液分别置于样品管中，由自动进样器依次从低质量浓度到高质量浓度取样分析，得到不同质量浓度的信号值（峰面积或吸光度以信号值（峰面积或吸光度）为纵坐标，对应的挥发酚质量浓度为横坐标，绘制校准曲线。9试验数据处理9.1结果计算土壤中挥发酚的含量ω以苯酚质量分数计[数值单位为毫克每千克（mg/kg）]，按照公式（1）进行计算：式中：ρi——从校准曲线上查得试样溶液中挥发酚的质量浓度，单位为毫克每升（mg/Lρ0——从校准曲线上查得空白试验溶液中挥发酚的质量浓度，单位为毫克每升（mg/LV——提取液体积，单位为毫升（mL）；ωdm——土壤样品干物质含量，%；m——土壤样品称样量，单位为克（g）；f——试样稀释倍数。式中：ρi——从校准曲线上查得试样溶液中挥发酚的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；ρ0——从校准曲线上查得空白试验溶液中挥发酚的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V——提取液体积，单位为毫升（mL）；H20——沉积物样品含水率，%；m——沉积物样品称样量，单位为克（g）；f——试样稀释倍数。9.2结果表示数值修约按GB/T8170的规定执行，计算结果表示为：0.××、×.××、××10精密度5T/HNNMIA.001—202310.1按照GB/T6379.2规定的方法，确定流动注射4-氨基安替比林分光光度法测定土壤和沉积物中挥发酚含量的重复性和再现性，方法精密度数据统计结果见表1和附录B相关部分。10.2在重复性条件下获得的两次独立的测试结果，在表1给出的水平范围内，其绝对差值超过重复性限（r）的情况不超过5%，重复性限（r）按表1所列方程式计算。10.3在再现性条件下获得的两次独立的测试结果，在表1给出的水平范围内，其绝对差值超过再现性限（R）的情况不超过5%，再现性限（R）按表1所列方程式计算。表1方法精密度单位毫克每千克11正确度按照GB/T6379.4规定的方法，确定流动注射4-氨基安替比林分光光度法测定土壤和沉积物中挥发酚含量的方法正确度的数据统计见附录B。12试验报告试验报告应包括下列内容：a)本部分编号、名称及所使用的方法；b)关于识别样品、实验室、分析日期、报告日期等所有的必要的信息；c)以适当的形式表达试验结果；d)试验过程中出现的异常现象；e)试验、审核等相关责任人的签名。6T/HNNMIA.001—2023（资料性）仪器参考工作条件流动注射仪参考工作条件见表A.1。表A.1流动注射仪参考工作条件设置对象参数设置对象参数洗针时间注射时间进样时间出峰时间进载流时间60s峰宽40s到达阀时间280s样品周期时间200s蠕动泵转速35r/min设定温度7T/HNNMIA.001—2023（资料性）实验室间协作试验数据统计结果根据GB/T6379.2和GB/T6379.4规定的方法,通过实验室间协作试验,确定测量方法的重复性限与再现性限及测量的方法偏倚,数据统计结果见表B.1。表B.1重现性限与再现性限及