松材线虫b中介组织包装板材中携带松材线虫的初步研究

松材线虫b中介组织包装板材中携带松材线虫的初步研究

松草是重要的朔布病毒性病原体，导致树木的萎缩，严重损害森林生产。世界上许多国家将松草和及其手段昆虫视为检疫微生物。例如，欧洲地中海保护组织将松布虫感染1a类检疫微生物，并将中国归类为二级入境检疫微生物。木材材料（尤其是松树）是一种传统的建筑材料。它可以携带松皮诺司令，因此，不同国家都需要检疫。2000年代，中国开始对美国和日本之间的木材材料采取检疫和监测措施，防止引进美国和日本货物。福建省每年向其他省份发送大量货物。据中国一些省份报道，松木线是在一些省份被报告的。为了确定福建省货物包装板是否能够传播松木线的可能性，作者分析了从其他省份引进福建省的货物包装板的类型。1材料和方法1.1杉木包装板的采集标本采自从上海、安徽、江苏、广东等省调入的电梯、发酵罐、人工气候箱、干燥箱、生化培养箱、生化试剂、投影仪幕布等货物的松木包装板共8份,采集有蓝变和天牛蛀道的板材.1.2分离、培养和鉴定线条1.2.1人才培养.1将板材劈成小条状,放入烧杯中加水淹没,然后置于恒温箱(25℃)中孵育12-24h.浸泡液通过350目筛,收集线虫.用倒置显微镜检查线虫,确定为伞滑刃属线虫后挑取培养.1.2.2灰葡萄孢borararar植株的培养从包装板材中分离的线虫数量较少,且为持久幼虫(dauelarva).为了获得大量成虫供鉴定用,需进行培养繁殖.将线虫挑入1g·L-1硫酸链霉素消毒15min,用无菌水漂洗3次,接入PSA平板或麦粒培养基三角烧瓶中长好的灰葡萄孢(Botrytiscinerea)菌丝中培养.1.2.3显微观察和显微计测将培养的线虫收集于指形玻管中,于65℃恒温水浴2-3min,缓慢杀死线虫,加入等体积的倍量TAF固定液固定24h.以TAF为浮载剂将线虫制成临时玻片,于倒置显微镜下进行形态观察和显微计测.2结果与分析2.1带松材线虫的松材线虫携带从8个松木包装箱的板材样本中,发现来自上海的电梯包装板和生化培养箱包装板分别携带拟松材线虫和松材线虫,表明省际流通的松木包装材料能携带松材线虫.2.2灰葡萄孢上的线虫大量繁殖板材中分离获得的伞滑刃线虫持久幼虫,在PSA培养基上或麦粒培养基三角烧瓶中的灰葡萄孢上培养,15-20d后平板上的菌丝被取食消解(图1A),线虫大量繁殖,其中有许多成虫.线虫大量繁殖后沿培养皿或三角瓶壁的水膜向上迁移,在培养皿盖内和三角瓶内壁上聚集成线虫网(图1B、1C).2.3线虫识别2.3.1阴门阴门盖物.形态特征:见图2.雌虫加热杀死后,呈宽“C”形;唇区高,缢缩;口针细长,口针基部球小;食道呈滑刃型,中食道球大,几乎充满体宽,食道腺长叶形,覆盖于肠背面;排泄孔位于食道腺与肠连接的水平处.单卵巢,前伸;阴门开口于虫体后部,约为体长的74.2%处;前阴唇向后延伸形成阴门盖.尾部近圆筒形,无尾尖突.雄虫加热杀死弯曲呈“J”形.尾部弓状,尾端尖细,侧面观呈爪状;尾末端有一卵圆形交合伞;尾部有7个尾乳突,即1对肛乳突、1个肛前腹乳突、2对肛后乳突.交合刺弓形,啄突明显,末端膨大呈盔状(cucullus).形态特征与Nickleetal对松材线虫(B.xylophilus)的描述相一致,其测量值(表1)与南京、上海、美国、日本等地的种群接近,确定为松材线虫.2.3.2雄虫与松材线虫交合伞形态特征形态特征:见图3.形态特征与松材线虫近似,但雌虫具有明显的尾尖突,尾尖突长度除极少数较短外,大部分为3.75-7.50μm;雄虫具有离肛型铲状交合伞.测量值:见表2.松材线虫和拟松材线虫的形态学极为相似,雌虫都具有阴门盖,雄虫交合刺末端均盔状膨大,松材线虫雌虫有时也具短尾尖突.这2个种的主要区别:松材线虫雌虫尾部宽圆或有短尾尖突(<2μm),雄虫尾尖交合伞呈卵圆形;拟松材线虫雌虫有明显尾尖突、长度>2μm,雄虫尾尖交合伞呈铲状平截.本试验的线虫标本从形态学特征和形态测量值上均与拟松材线虫相符.3福建气候适宜松材线虫的分布和植被状况福建省有丰富的林木资源,过去对果树线虫研究较多,对林木和板材线虫研究较少.江苏、浙江、安徽、广东等省份都有松材线虫发生,这些省份与福建省贸易交往频繁.本试验结果表明,松木包装板材可携带松材线虫.目前,国内在省际和地区间对松木包装板材及松木制品中携带松材线虫基本未实施检疫,有利于松材线虫从疫情发生地向非疫区传播和扩散.福建省松林以马尾松次生林为主,沿海一带广泛种植海岸松、湿地松和火炬松作为防护林,这些树种都是松材线虫的适宜寄主.松墨天牛(Monochamusalternatus)作为松材线虫的媒介,在福州、南平、莆田、三明、厦门、宁德等地均有分布.福建省1年中≥10℃日数250-275d,年平均气温18-20℃,年平均降雨量1400-1800mm,这些气象指标与目前发生松材线虫病的南京(≥10℃日数225d,年平均气温16℃,年平均降雨量1000mm),台湾(≥10℃日数325-350d,年平均气温20-24℃,年平均降雨量1600-2600mm)相近.表明福建省的气候适宜松材线虫病的发生.拟松材线虫对松树也具有一定的致病性.据报道,这种线虫与钻蛀性害虫复合侵害时能加速松树的死亡.研究结果证明,松材线虫可以随松木包装板材传入,并且可能定殖和扩散,从而对福建省林业生产构成严重