南方医科大学高级病理生理学中期考核历年试题

实用文档1。试述内毒素休克过程中MAPK通路和NF—κB通路的激活在内毒素休克过程中的作用（1）丝裂原活化蛋白激酶信号通路（MAPK通路)：MAPKs是一个参与细胞内信号转导的蛋白激酶家族。该信号通路的活化可以激活多种转录因子，也可以在胞质内活化某些转录因子，进而调控TNF—α、IL-1β、IL—8、IL-10、IL-12、iNOS、MCP—1、ICAM-1等炎症介质的表达。脂多糖(LPS)被先天性模式识别受体所识别，TLR4主要识别革兰阴性菌，TLR2主要识别革兰阳性菌,由此将LPS等信号从细胞膜转导人细胞内，激活酪氨酸激酶（TK)、蛋白阳性酶C以及P42、P44、P38等丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路，进一步使核因子（NF-KB)、NF—IL一6等转录因子激活和核易位，从而使效应细胞合成和分泌大量的炎症介质。（2)核因子-kappaB信号通路（NF-κB通路）:休克病因可以激活细胞内的抑制蛋白家族I-kB（inhibitor—kappaB）激酶，从而使I—kB的丝氨酸残基发生磷酸化并从NF—kB的复合物中解离出来而被蛋白酶降解,而NF-kB迅速从胞质向胞核移位,结合至多种促炎细胞因子基因启动子区的kappaB位点而激活这些基因的转录活性，导致炎症介质泛滥.NF—kB信号通路的激活是急性炎症反应的中枢环节。2。什么是蛋白质组学?举例说明蛋白组学对于认识疾病的研究有哪些帮助。蛋白质组学是对蛋白质特别是其结构和功能的大规模研究，包括蛋白质的表达水平,翻译后修饰，蛋白质之间的相互作用等。是以蛋白质组为研究对象，分析细胞内动态变化的蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态，了解蛋白质之间的相互作用与联系，在整体水平上研究蛋白质的组成与调控的活动规律。举例:(1)比较蛋白质组学揭示肿瘤发病机制、寻找肿瘤诊断和治疗的靶标:如对膀胱鳞状细胞癌和移行细胞癌的蛋白质组进行了比较研究，在膀胱癌病人的尿液中找到包含银屑素在内的四种与膀胱癌相关的蛋白质，其中银屑素只存在于膀胱鳞状细胞癌病人的组织及尿液中,在移行细胞癌中难以检测其表达,因而认为银屑素是膀胱鳞状细胞癌的早期诊断、鉴别诊断和病情监控的指标.(2）血清蛋白质组学研究寻找肿瘤相关抗原:例如突变的抑瘤蛋白P53可在20％—40％的肿瘤患者诱发自身抗体,高表达的癌蛋白L—Myc，C—Myc亦可在某些肿瘤患者诱导自身抗体的产生。(3)肿瘤药物蛋白质组学研究：可用于发现肿瘤药物作用的靶点，可用于肿瘤药物作用机制研究和新药刷选.(4）揭示心衰的发生机制：心衰是多种心脏疾病发展的结果,应用蛋白质组学有助于了解心衰时心肌细胞功能障碍及代偿发生的分子机制.已知临床上治疗心衰的主要手段——血管紧张素2受体阻断剂能够降低胞内蛋白激酶C（PKC)信号传导,因而，研究PKC在心衰中所起的作用将可能会揭示心衰的发生机制。最新有研究利用蛋白质组学技术鉴定心衰与未心衰细胞蛋白质的变化，利用该技术,首次明确了心肌细胞膜蛋白成分和心衰细胞膜蛋白的变化，有助于进一步了解他们在疾病中的作用。3。简述血管通透性变化对休克的影响及其机制（1)血管通透性变化对休克的影响:微循环淤血加重，大量血浆外渗，血液浓缩,血细胞比容升高，红细胞聚集，白细胞嵌塞，血小板粘附,导致血流阻力增加,血流缓慢，甚至瘀滞，使心血量减少，血压下降。（2）机制：休克所导致的组织缺氧、内毒素激活补体系统所形成的C3a和C5a以及引起过敏性休克的变应原等可以使肥大细胞释放组胺,组胺使得微循环前阻力血管强烈舒张和毛细血管通透升高；细菌内毒素可以激活补体系统的激肽释放酶等也具有扩张小血管和使血管通透升高的作用；缺氧组织内的代谢产物对微血管有扩张作用;缺氧时内啡肽可以使心肌收缩力下降，血管扩张.感染性休克——LPS（脂多糖)增加血管通透性的细胞信号机制：内毒素休克的发生过程中，有效循环血量的减少和微血管通透性的增加。内毒素，或称脂多糖（LPS)作用于炎性细胞和内皮细胞，引起一系列的炎症反应,包括出血、白细胞浸润、血管扩张和血浆蛋白渗出、水肿等，导致有效循环血量的减少，是最终引起中毒性休克，组织损伤和器官功能损害的关键原因。烧伤性休克与血管通透性的变化:烧伤早期血管通透性的增加是引起烧伤病人体液外渗,血容量下降，导致烧伤性休克的主要因素.过敏性休克：机体受到变应原致敏以后，产生抗体IgE，IgE与靶细胞(肥大细胞、嗜碱粒细胞和血小板)结合，使机体处于致敏状态。当变应原再度进入机体后,与IgE结合形成抗原抗体复合物，引起细胞的脱颗粒反应并释放补体、组胺、5—羟色胺、缓激肽、慢反应物质、血小板活化因子、前列腺素类和嗜酸粒细胞趋化因子等，使微血管广泛扩张，外周阻力下降，毛细血管通透性增加，血管容量增加，血压迅速而明显地下降,回心血量减少，形成过敏性休克特殊的血流动力学特点.4.钙信号通过何种机制实现其对机体多种功能调节的？（1）Ca2＋作为细胞信使的基础,是胞浆Ca2＋与胞内钙库或胞外Ca2＋之间存在浓度梯度。当某种刺激使胞内Ca2＋浓度大幅度增加时，就起到传递信号的作用。Ca2＋本身的特性更有利于和靶蛋白结合,从而传递信息.（2）Ca2+在细胞内外保持动态平衡，依赖四个主要系统维持:1、电压依赖性钙通道；2、受体或神经递质操控的钙通道;3、钙泵；4、细胞内第二信使(1、4、5三磷酸肌酸IP3)内在机制。细胞的许多功能都依赖于细胞内外极高的Ca2+浓度差存在。（3)钙离子作为第二信使，在细胞信息传递和损伤中有着重要的作用。当刺激使胞外的钙离子进入胞内或钙库释放稍增加时,可导致胞浆内钙离子浓度大幅度增加，继而发生一系列生理、生化反应，如细胞结构损伤、凋亡、死亡和细胞的退行性变等作用，因此调节细胞内钙离子的动态平衡对维持细胞正常的生理功能和信息传递十分重要.（4）心肌细胞钙内流主要通过电压依赖性钙通道和钙库调控性钙通道；钠钙交换机制是心肌细胞维持钙离子稳态的重要机制。细胞内钙主要储存在内质网和肌浆网内,而心肌细胞收缩时钙离子浓度的增高主要来自胞外钙内流和肌浆网的钙释放。心肌缺血再灌注损伤与能量代谢障碍、氧自由基产生、钙超载有关，但钙超载在缺血再灌注损伤中起着极其重要的作用。5.请任意设计一个研究心力衰竭的实验课题，要求写出课题名称,简述研究背景，提出假设，选择动物模型和观察指标.课题名称：心力衰竭模型大鼠心脏肥厚指标与心功能的关系研究背景：心力衰竭是常见的危重症,慢性压力超负荷是导致心力衰竭的重要原因，当心脏长期面临压力负荷过重时，首先出现心肌肥厚进行代偿,如果压力负荷过重持续存在，肥厚心脏开始扩张，收缩功能下降,最终导致充血性心力衰竭。假设:大鼠在腹主动脉缩窄术后，经历一个心脏重塑、心功能从代偿到失代偿的演变过程，在此过程中，可通过超声心动图、血流动力学监测、血清学指标、病理指标以及运动耐力等多种方法对心功能以及心脏的病理演变进行评价.方法：腹主动脉缩窄法制备大鼠压力超负荷性慢性心力衰竭动物模型。常规麻醉，剑突下腹正中切口，分层打开腹腔，在左肾动脉上方钝性分离腹主动脉，将8号注射针头平行置于动脉外壁，用4号手术丝线将2者一齐扎紧后将针头移去，青霉素冲洗腹腔后缝合关腹。对照组采用相同处理,将4号丝线置于腹主动脉相同位置不做结扎。比较术后第4、8、12和16周B型脑钠肽及计算心脏质量／体质量比值、心肌细胞直径的变化.6。简单举例说明NO生理学功能及其在疾病发生中的作用一氧化氮（NO)作为生物体一种多功能分子，是L-精氨酸在一氧化氮合酶(NOS）催化下生成的。NO主要有三种生理功能:舒张血管作用;作为中枢与外周神经系统的信息传递分子；作为免疫效应分子，具有抗病原微生物感染和抗肿瘤作用。NOS包括三种同工酶：内皮型（eNOS)、神经型（nNOS)和诱生型(iNOS).前两种又称为结构型NOS（cNOS)，由它们催化生成的NO量较少，但具有广泛的生理功能。在心血管方面，NO具有调节血压、扩张血管、抑制血小板聚集和白细胞黏附、抑制血管平滑肌细胞增殖的作用。因此在防止心血管疾病的发生发展方面发挥重要的保护作用。动脉粥样硬化和冠心病病变发生过程中，血管内皮细胞受损，eNOS的表达明显降低,NO释放减少造成动脉粥样硬化及高血压。iNOS是内毒素脂多糖（LPS）和/或细胞因子等诱导下生成的，iNOS存在于心肌细胞、血管平滑肌细胞、成纤维细胞、内皮细胞及炎症细胞中，诱导产生大量NO,大量NO可与超氧阴离子反应生成过氧化亚硝基阴离子，从而导致细胞和组织损伤的病理过程，与心血管系统疾病的发生和发展有着密切关系。7。免疫应答在动脉硬化发生发展中的作用动脉粥样硬化（As）是一种有免疫机制参与的特殊的慢性炎性疾病。不稳定的As斑块存在大量的免疫细胞，单核巨噬细胞、树突状细胞等抗原提呈细胞,通过清道夫受体、模式识别受体(TLR）识别斑块氧化的低密度脂蛋白（ox—LDL)，并呈递给斑块中初始性T细胞,激活ox—LDL特异性效应性T细胞，包括Ⅰ型辅助性T细胞（Th1)及CD8+杀伤性T细胞（CTL）。在这个过程中，抗原提呈细胞与Th1都会产生大量炎症性细胞因子，如IFN—γ，TNF—α,IL—6,IL—12等。多项临床研究及转基因动物实验证实,这些炎症性细胞因子，特别是IFN-γ，可以明显促进动脉粥样硬化产生，破坏胶原蛋白,诱导斑块破裂，同时促进平滑肌细胞增殖,而杀伤性T细胞则会在Th1细胞因子作用下，对吞噬ox—LDL的APC进行杀伤，导致许多APC胞内酶类物质释放，导致局部破损。同时还会诱导可产生IgG类自身抗体的B细胞，IgG类自身抗体可促进动脉粥样硬化的发生.8。试述细胞分化的调控细胞分化是由一种相同的细胞类型经过细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异，产生不同的细胞类群的过程.也可以说，细胞分化是同一来源的http：//www。a—/w/%E5％BF％83％E8％84%8F”\o"心脏"心脏的泵血机能.心脏即心泵，它是推动HYPERLINK”/w/％E8％A1％80％E6%B6%B2％E5％BE%AA％E7％8E％AF"\o"血液循环”血液循环的动力器官，通过其有规律的收缩和舒张"舒张,可将\o”静脉”静脉回心的血液”血液射入HYPERLINK”http：//www.a—/w/％E5%8A％A8％E8％84％89”\o”动脉”动脉,维持一定的HYPERLINK”http：//www。a—/w/％E5％BF％83％E8%BE%93％E5％87％BA％E9％87％8F”\o”心输出量”心输出量和HYPERLINK”http://www.a—/w/%E5%8A％A8％E8％84%89%E8%A1%80％E5％8E％8B”\o”动脉血压"动脉血压，保证身体各组织器官的血液循环。按心脏部位的不同，心功能可分为左心功能与右心功能;按http://www.a—/w/%E5%B0％84%E8％A1%80%E5%88％86％E6％95％B0”\o"射血分数”射血分数：一侧\o”心室”心室每次收缩所输出的HYPERLINK”http：///w/%E8%A1％80%E9%87%8F”\o”血量”血量,称为每搏输出量，人体安静状态下约为60~80ml。每搏输出量与心室舒张末期容积之百分比称为射血分数，人体安静时的射血分数约为55％～65％。射血分数与HYPERLINK”http：//www.a—/w/％E5%BF％83％E8%82%8C”\o”心肌"心肌的收缩能力有关,心肌收缩能力越强，则每搏输出量越多,射血分数也越大。2.每分输出量与HYPERLINK”http：//www。a—/w/％E5％BF％83%E6％8C%87%E6％95％B0”\o”心指数"心指数：每分输出量=每搏输出量×心率，即每分钟由一侧心室输出的血量，约为5～6L.心输出量不与体重而是与体表面积成正比.心指数：以单位体表面积(m2）计算的心输出量。3.心脏作功心脏收缩将血液射入动脉时,是通过心脏作功释放的能量转化为血液的动能和压强能，以驱动血液循环流动。15、动脉硬化的危险因素，并说明与慢性炎症及自身免疫性反应的发生发展相关性。一、危险因素:动脉硬化与许多与该病相关的独立的危险因子，比如高胆固醇血症、吸烟、高血压、糖尿病、遗传、性别等；近年来的研究认为高同型半胱氨酸血症、高凝状态及某些基因的多态性也是危险因素。二、与慢性炎症：越来越多的研究支持炎症反应学说,其中感染可能是炎症反应的触发机制之一,人体内某些微生物反复慢性的炎症可能与动脉粥样硬化有关，慢性炎症可能参与疾病发生、发展。研究发现动脉粥样斑块中不仅含有脂质，而且有大量炎症细胞浸润,以血管壁积聚了大量的单核细胞和淋巴细胞。其触发机制可能包括氧化修饰的低密度脂蛋白（LDL)堆积、感染、血流动力学异常及性激素水平等因素剌教内皮细胞产生促炎因子，包括黏附分子和生长因子.比如感染可以影响血液的凝集状态及脂类代谢的改变，造成各类促炎园子和急性时相蛋白的升高，从而改变内皮细胞的功能.低水平的感染可能是引起动脉粥样硬化损伤和急性缺血综合征中炎症反应的原因之一。在动脉粥样硬化发生的过程中，有多种炎症细胞的浸润．其中单核细胞约占80%,淋巴细胞约占5％~20％，还有自然杀伤细胞的浸润.这些细胞进入内膜均需趋化因子的作用。动脉粥样硬化病变部位的炎症细胞及内皮细胞、平滑肌细胞所表达的多种趋化因子均较正常为高,可促使平滑肌细胞向内膜迁移，刺激血管平滑肌细胞分裂增殖,并可诱导多种组织日子的表达和活性增加,分泌大量的纤维物质，导致动脉粥样硬化纤维斑块逐渐增大。趋化因子对T淋巴细胞在动脉粥样硬化病交部位的募集、滞留及活化均有重要作用。此外,趋化因子还通过调节平滑肌细胞和内皮细胞的功能而参与莉脉弗样硬化的发生、发展。三、与自身免疫反应：动脉粥样硬化的形成和发展与自身免疫反应也高度相关，涉及到的抗原有氧化低密度脂蛋白、热休克蛋白、β2糖蛋白、凋亡细胞等，不但固有免疫参与了动脉粥样硬化的形成和发展，获得性免疫也参与其中，后者包括细胞免疫和体液免疫1。氧化低密度脂蛋白：动脉粥样硬化中最具特征性的自身抗原是氧化低密度脂蛋白。这些储留的氧化低密度脂蛋白的促炎症性质与氧化修饰、导致促炎症磷脂和脂质过氧化物释放的酶密切相关，它能迅速启动周围细胞的炎症反应。2.休克蛋白：与动脉粥样硬化有关的第二类自身抗原是由应激诱导的热休克蛋白HSP60／65抗体水平在心血管疾病患者增高，并且预示着疾病的进一步发展。3。β2糖蛋白：是一个磷脂结合蛋白，可在血小板、内皮细胞和人类粥样斑块中发现.4。凋亡细胞:动脉粥样硬化斑块中的细胞死亡可发生于凋亡或者坏死。凋亡细胞被巨噬细胞和树突状细胞的一些分支摄取后诱导一种抗炎症反应，并且在维持外周免疫耐受起着很重要的作用。5.固有免疫：在趋化因子的作用下,单核细胞从血管腔进入血管内膜，然后在巨噬细胞克隆样刺激因子的作用下，单核细胞分化成为巨噬细胞。巨噬细胞的分化是动脉粥样硬化形成的一个必须的步骤，并且与固有免疫中的模式识别受体的上调有关。6。获得性免疫Thl细胞:人类和动物研究显示在动脉粥样硬化形成过程中Thl细胞的作用占有明显的优势。Th2细胞:Th2细胞分泌的因子包括IL一4、IL-5、IL一13、IL4、IL．10和粒细胞单核细胞克隆刺激因子GM-CSF)，但以前三者为主。IL4和IL—13主要刺激抗体的产生，IL—5促进嗜酸性细胞炎症反应、刺激B细胞的分化和抗体分泌。7。肥大细胞：在动脉粥样硬化斑块中可发现肥大细胞，并且发现在斑块破裂部位的肥大细胞是活化的.肥大细胞对动脉粥样硬化的形成很重要，因为肥大细胞的分泌产物可修饰脂蛋白，调节血管和炎症细胞，破坏基质成分,影响血管的通透性、收缩性和血管壁的止血特征。7,体液免疫：HsP60和HSP65是动脉粥样硬化形成过程中涉及到的两种致免疫的蛋白.HSP60能诱导巨噬细胞产生促炎症因子（TNF一俚和基质金属蛋白酶）和促进内皮细胞表达黏附分子。16.血管内皮细胞的功能及调节机制血管内皮细胞尚可合成与分泌多种结缔组织成分,参与一些物质代谢及其白细胞相互等，其主要功能如下七个方面：

一、血管内皮细胞的屏障功能:血管内腔表面有一层内皮细胞衣，对于血浆大分子物质具有屏障作用。另外，由于内皮细胞具有独特的结构和代谢特性,能选择性的调节小分子至超大分子物质通过血管壁。二、抗凝与促凝作用:内皮细胞具有抗血栓形成特性,从而能保持血液流动。与此同时它还有许多促凝因素，使血管在损伤时，通过凝血和血栓形成以维护血管壁的完整性.三、在溶解纤维蛋白中的作用：当机体血管内有血栓(包括微血栓)形成时，其溶解纤维蛋白系统(纤溶系统）则被激活,溶解和去除血栓中的纤维蛋白，防止其交连聚集而致血管阻塞。四、参与血管运动的调节作用:血管内皮细胞能产生舒血管因子如前列环素（PGI2），强大的扩血管作用和抑制血小板聚集作用.随着年龄的增长和动脉硬化，血管内皮细胞合成PGI2的能量下降。也能分泌舒血管因子即内皮细胞衍生舒张因子（EDRF）是一氧化氮(NO），即一种内源性硝酸盐类血管扩张剂。EDRF能弥散到血管平滑肌细胞,通过刺激鸟苷酸环化酶增加CGMP含量而发挥松驰动脉平滑肌的作用.血管内皮细胞能产生缩血管因子即内皮素(ET），使血管平滑肌张力增加，血管收缩，导致高血压、动脉粥样硬化等疾病。五、与血小板的相互作用：血小板的粘附聚集是激发凝血和血栓形成的关键性因素，正常的血管内皮细胞具有抗血小板粘附和聚集的作用。当受到血流紊乱、机械损伤、高脂血症等因素的影响,内皮细胞结构被破坏，如暴露出内皮下层组织，便会引起血小板的活化，释放出血小板因子4(PF4)和β—血小板球蛋白(β—TG），从而促发血栓形成。六、与白细胞的相互作用：主要是指白细胞从血液中通过血管内皮迁移到组织中去。在急性炎症的情况下，中性粒细胞粘附到内皮细胞上，白细胞先迁移后渗出，然后向血管外迁移。而内皮合成的PGI2能抑制粒细胞的粘附。七、合成和分必多种结缔组织成分：大部分内皮下的多种胶原分子是由内皮细胞合成的。内皮下结缔组织的重要成分蛋白多糖、弹性蛋白等也是由内皮细胞分泌的.在组织修复过程中，主要由Ⅳ型胶原组成的内皮下基膜对内皮细胞的再生起诱导作用。由内皮细胞合成的纤维结合蛋白、凝血酶敏感蛋白等粘连蛋白则能调节细胞与细胞或基质间的粘附和结合。因此,内皮细胞在维持血管壁的完整性方面起着重要作用。内皮细胞功能：（1)血管内皮细胞在凝血中的作用EC在生理状态下通过表达各种抗凝物抑制凝血：①EC表面含有大量蛋白多糖,能结合血浆中抗凝蛋白（如抗凝血酶)，同时EC合成组织因子途径抑制物（TFPI)，使这些抗凝蛋白活性增强。②血栓调节蛋白(TM)抑制凝血酶、活化蛋白C、在蛋白S的作用下灭活凝血因子Ⅴa与Ⅷa而发挥抗凝作用。③EC释放低水平组织型纤溶酶原激活物(tPA）,使纤溶酶原激活成为纤溶酶，从而激活纤溶系统。④EC产生前列环素(PGI2)和一氧化氮（NO),并作用于EC表面上的ADP酶,从而抑制血小板的凝集。（2)调节血管平滑肌张力的功能血管紧张度取决于舒缩血管物质的平衡关系。由EC合成和分泌的NO是作用最强的舒张血管的物质,还有多种物质参与了EC的舒血管作用，如PGI2、缓激肽等。内皮素21（ET21)是最强的缩血管物质，另外EC释放的缩血管物质还有血栓素A2，上述物质的相互平衡维持着正常的血管张力。(3）减少血管通透性调节组织与血液之间的物质交换，防止血浆成分和血液细胞无序地侵入;（4）抑制血管壁细胞的游走和增值。17、如何利用凋亡相关因素防治有关疾病凋亡对维持细胞群的稳态有重要作用。在有丝分裂过程中不可避免的会出现错误的基因易位和重排，机体可启动细胞凋亡而加以剔除.所以凋亡是对有丝分裂的补充和必要修饰.在正常组织,可见到少量凋亡小体,表明细胞凋亡在调控正常细胞群中起重要作用.细胞凋亡的过度和减弱可导致疾病.过度凋亡所致的疾病，如神经退行性病变、视网膜退行性病变、移植排斥、肝炎等疾病以及脑缺血神经细胞凋亡引起的新生儿窒息、老年脑缺血、老年痴呆症均可以用caspases抑制剂预防。有些病毒感染可以阻止细胞凋亡,使用病毒或者企蛋白抑制caspases系统来防止凋亡或利用小分子多肽来防止凋亡。肿瘤细胞常程凋亡不足，放疗和化疗可诱导肿瘤细胞凋亡，通过活化caspases酶系统或活化死亡受体启动caspases系统可以促进凋亡。另外，bcl-2的高表达与肿瘤和自身免疫病的发生有关,若用反义RNA降低bcl—2表达，则加速无生长因子存在时的细胞凋亡.答案2：（