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文档简介

《HPLC仪使用要点》PPT课件在这个课件中,我们将介绍HPLC仪器的基本知识和使用要点。从什么是HPLC仪器以及它的工作原理开始,到分析中需要注意的组成部分、分离柱的选择和使用、常见分离技术,以及操作步骤和故障排除方法。HPLC仪器是什么?HPLC(高效液相色谱)是一种常用的分离技术,通过液相作为移动相,在色谱柱中对混合样品进行分离和分析。它在药物、食品、环境等领域有广泛应用。HPLC仪器的工作原理HPLC仪器通过一个高压系统,将移动相推动通过色谱柱,样品中的化合物被不同的分离机理在柱中分离,并通过检测器进行检测和定量。HPLC仪器的组成部分高压泵提供恒定的流速和压力,将溶剂推动经过柱子。进样器将样品引入柱子,可以手动或自动进行。色谱柱选择合适的柱子进行分离,不同种类的柱子可以实现不同的分离机理。HPLC分离柱的选择和使用选择合适的柱子根据分析目标和样品性质选择合适的柱子,如反相柱、离子交换柱等。柱子的准备和保养在使用前要进行柱子的准备工作,并定期保养柱子以确保分离效果和柱寿命。常见HPLC分离技术1.反相色谱:通过非极性固定相和极性溶剂进行分离,常用于疏水性化合物的分析。2.离子交换色谱:通过固定相上的离子交换基团与溶液中离子间的相互作用进行分离,常用于离子性化合物的分析。3.手性色谱:通过手性固定相分离不对称分子,常用于药物中手性异构体的分析。4.尺寸排除色谱:通过使用具有不同孔径大小的固定相,从而排除分子尺寸较大的化合物。5.亲和色谱:通过特定的亲和基团与目标化合物的选择性相互作用进行分离,常用于生物样品的分析。HPLC仪器的操作步骤11.准备工作检查HPLC仪器的状态、准备好试剂、校准仪器。22.样品制备准备样品溶液、过滤样品、调整样品的pH值等。33.样品进样通过进样器将样品引入色谱柱。44.Elution过程设置合适的流速和梯度条件,进行样品的分离。55.结果分析通过检测器获取结果,并进行解析和定量。常见的HPLC仪器故障及排除方法11.压力异常可能是进样器堵塞、柱子压力过高等原因,可以检查和清洗相应部件。22.峰形不对称可能是流速不稳定、柱子老化等

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