芳酸类非甾体抗炎药物的分析

第六章

芳酸类非甾体抗炎药物的分析

本类药物多数具有芳酸基本结构，即芳基取代羧酸结构。根据芳基和羧酸的取代位置及芳基上的取代基的不同，可分为水杨酸类、邻氨基苯甲酸类、邻氨基苯乙酸、芳基丙酸、吲哚乙酸及苯并噻嗪甲酸等六类。

结构特点：游离羧基和苯环、酯基等。一、典型药物与结构特点第一节、典型芳酸类非甾体抗炎药物结构与性质COOHOH双氯芬酸钠NOCH3ClMeOOHO吲哚美辛水杨酸阿司匹林布洛芬对乙酰氨基酚二、主要性质

1、酸性：游离羧基pka=3～6，芳酸酸性强；脂肪酸较弱2、水解性：酯基、酰胺基3、吸收光谱特性：含共轭体系4、基团或元素特性第二节、鉴别试验（一）与三氯化铁反应1、水杨酸及其盐

反应条件：弱酸性（pH4

6）反应现象：紫堇色2、阿司匹林需加热水解后与FeCl3反应方法：取本品0.1g煮沸放冷加水10ml加FeCl31d显紫堇色3、酚羟基反应药物中若具有酚羟基结构，可与FeCl3作用显蓝紫色。如对乙酰氨基酚：取药物适量加水溶解，滴加三氯化铁试液，即显蓝紫色。二、缩合反应二苯甲酮结构，在酸性条件下与二硝基苯肼缩合生成橙色偶氮化合物。+三、重氮化-偶合反应对氨基水杨酸钠具芳伯氨基结构，在酸性溶液中，与亚硝酸钠液进行重氮化反应，生成的重氮盐与碱性β-萘酚偶合产生橙红色沉淀。五、水解反应：阿司匹林与碳酸钠试液反应反应现象：水杨酸白色沉淀析出，并产生醋酸的臭气四、氧化反应甲酚那酸遇硫酸显黄色六、特征元素的反应

1、氯元素的反应：硝酸银白色沉淀

2、硫元素的反应：分解产生硫化氢，遇醋酸铅黑色沉淀七、光谱法

1、紫外吸收光谱：

max、

min、吸光度法、吸光度比值法

2、红外吸收光谱法八、色谱法

1、薄层色谱法

2、高效液相色谱法第三节、特殊杂质及其检查方法

（一）

阿司匹林（ASA）合成工艺：（二）阿司匹林中游离水杨酸与有关物质检查

1、溶液的澄清度：（1）杂质来源：①原料②合成工艺中由副反应生成的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯等。（2）检查原理：利用药物与杂质在溶解行为上的差异进行检查（3）检查方法：取供试品0.5g，加温热至约45℃的碳酸钠试液10ml溶解后，溶液应澄清。

2、游离水杨酸（SA）----特殊杂质（1）来源：①生产过程乙酰化不完全（未反应SA）②贮存不当水解而产生的SA（2）检查原理(中国药典2005方法)：阿司匹林+硫酸铁铵不反应水杨酸+硫酸铁铵

紫堇色与一定量水杨酸对照液生成的色泽比较不得更深。

2010版方法：HPLC法

3、易炭化物

4、有关物质：HPLC法二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺及有关物质的检查方法：GC法，聚乙二醇为固定相，FID检测器三、二氟尼柳中有关物质的检查方法：有关物质A-正相TLC法；有关物质B-反相HPLC法四：萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有关物质的检查方法：HPLC法五、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查方法：HPLC法第四节、含量测定一、酸碱滴定法（一）、直接滴定法：阿司匹林、布洛芬、萘普生等（1）：原理利用游离羧基的酸性，以标准碱滴定液直接滴定。（2）：方法：滴定液：NaOH(0.1mol/L)

溶剂：中性乙醇指示液：酚酞3）注意事项：A采用中性乙醇做溶剂的目的：①易于溶解样品②防止本品水解B滴定过程中不断振摇目的：防止局部碱度过大而促使其水解。C采用酚酞作指示剂：药物是弱酸，用强碱滴定时，化学计量点偏碱性，故选用在碱性区域变色的酚酞。（二）、剩余量滴定法美洛昔康含有与羰基共轭的烯醇式羟基，具有羧酸性质，显酸性。可用氢氧化钠滴定。但由于溶解度的限制需使用定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，用盐酸滴定液回滴剩余的碱。需做空白（三）、水解后剩余滴定法1、水解后剩余量滴定法

酯结构在碱性溶液中水解，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使药物水解，过量氢氧化钠用硫酸滴定液回滴。需作空白。

2、两步滴定法（1）适用范围：阿司匹林片剂采用本法原因：①消除片剂中稳定剂干扰（枸橼酸或酒石酸）②消除水解产物干扰：阿司匹林片在贮存过程水解产生水杨酸和醋酸（2）测定：第一步：中和精密称取片粉酚酞指示剂迅速滴至粉红色加中性乙醇溶解NaOH滴定液酒石酸等稳定剂、SA、ASA均成为相应钠盐

第二步：水解中和后供试品液水浴加热加定量过量NaOH(0.1mol/l)第三步：测定用H2SO4滴定液(0.05mol/l)滴定剩余的碱。滴定结果用空白试验校正每1mlH2SO4滴定液(0.05mol/l)滴定液相当于18.02mg的C9H8O4（3）含量计算：标示量:表示制剂中各成分含量的理论值。用标示量的百分值来控制制剂含量。

公式通则为：标示量％＝=实际测得含量×100％标示量VFT

平均片重

×100％称样量

标示量例：取标示量为0.3g的阿司匹林片10片，称出总重为3.5840g，研细后称取0.3484g，按药典方法用两步滴定法测定其含量，消耗硫酸滴定液（0.05015mol/l）23.84ml，空白试验消耗该硫酸滴定液39.88ml，求阿司匹林的含量为标示量的多少？（99.41%）（四）、非水溶液滴定法吡罗昔康具有吡啶环显碱性，可在冰醋酸中用高氯酸滴定液滴定，结晶紫为指示剂。二、紫外-可见紫外分光光度法（一）直接紫外-可见紫外分光光度法部分本类药物制剂采用此法。溶解过滤后对照法测定。（二）、柱分配－紫外分光光度法适用：片剂、胶囊、栓剂特点：能分离杂质，同时测定ASA、SA（1）SA的限量测定色谱柱用硅藻土填充；固定相：三氯化铁－尿素；洗脱液：氯仿，乙醚。在λmax=306nm测定吸收度，A样（SA)＜A标（SA)

（2）ASA的测定固定相：碳酸氢钠；洗脱液：氯仿λmax=280nm测定吸收度，A样（ASA+SA)-A样（SA)三、高效液相色谱法

ChP2010收载的典型芳酸类非甾体抗炎药物制剂大多采用离子抑制-反相HPLC法测定，外标法计算含量。

第五节体内药物分析一、血浆中阿司匹林与水杨酸的HPLC法测定小剂量ASA血浆中ASA及SA的同时测定，液质联用法液质联用仪由以下几部分组成

数据及供电系统━━━━┳━━━━━╋━━━━━━┓进样系统离子源质量分析器检测器┗━━━━━╋━━━━━━┛

真空系统LC/MS系统构成++

样品与溶剂脱离及电离

EIESIAPCILC/MS接口

离子源质量分析器检测离子HPLC数据系统质谱离子识别

QuadrapoleTimeofFlightFourierTransform

…+++++++离子检测++-++++++-+++三级(重）四极杆质谱仪LC