基因多态性与环磷酰胺

基因多态性与环磷酰胺第1页/共26页CPA

是一种无活性的前药,须在体内代谢活化发挥细胞毒性作用。约70%～80%的CPA经由CYP2B6、CYP3A4、CYP3A5[6]、CYP2C9、CYP2C19[7]代谢生成4-羟基环磷酰胺(4-OHCPA),后者开环生成醛磷酰胺,两者为同分异构体,处于相互转化的动态平衡中,其混合物可通过被动扩散穿过细胞膜且本身无细胞毒性作用。4-OHCPA

极不稳定,易通过非酶催化的β-消除反应生成磷酰胺氮芥和丙烯醛[8],前者为DNA烷化剂,发挥抗肿瘤和免疫抑制作用,而丙烯醛则可产生膀胱炎、血尿等一系列尿毒性症状[9]。4-OHCPA

及磷酰胺氮芥在谷胱甘肽硫转移酶(GST)化下形成水溶性复合物从尿液中排出[10];醛磷酰胺由醛脱氢酶(ALDH1A1

和ALDH3A1)氧化生成羧基磷酰胺[11]。少于5%的CPA可通过侧链氧化生成2-去氯乙基环磷酰胺发挥直接解毒作用,该反应主要由CYP3A4、CYP3A5

介导[12]环磷酰胺的代谢第2页/共26页环磷酰胺被转化为不饱和丙烯醛，一种诱导广泛蛋白修饰和心肌损伤的有毒的反应性代谢物。因此，对谷胱甘肽S-转移酶P的作用（GSTP）--丙烯醛代谢酶进行了研究，结果表明，接下来的环磷酰胺治疗，心脏上蛋白丙烯醛加合物的积累增加与GSTP功能不全相关，这表明，环磷酰胺的CTX是可以被调节的，至少是可以通过GSTP部分调节的，通过代谢和丙烯醛解毒来阻止药物毒性。GSTP（-）心脏上蛋白丙烯醛加合物累积第3页/共26页心脏脂肪酸结合蛋白：心脏中富含的一种新型小胞质蛋白，具有高度心脏特异性，心肌缺血损伤出现后，可以在胸痛发作后1-3h在血液中被发现肉毒碱脂酰转移酶的减少：存在于线粒体内膜的酰基转移酶，可逆的催化从酰基辅酶A将酰基转移至L-肉毒碱的反应环磷酰胺的心脏毒性毒性：严重的心肌心包炎心脏填塞心律失常心力衰竭机制：直接损伤内皮氧化应激损伤线粒体缺乏GSTP心型脂肪酸结合蛋白和肉毒碱脂酰转移酶的减少第4页/共26页

CTX的治疗窗较窄，不良反应包括心脏毒性、肝毒性、神经毒性、性腺抑制、膀胱毒性、骨髓抑制等,且其疗效和不良反应的个体差异大。

药物基因组学的研究进展提示,与CTX体内过程有关的代谢酶和转运体等的基因多态性,可能与CTX疗效及不良反应的个体差异密切相关。

相关基因：

CYP2B6、CYP2C19ABCB1、CBR1GSTA1、CYBA、ABCC2、NCF4NCF4第5页/共26页环磷酰胺在B细胞型非霍奇金淋巴瘤患儿中的药代动力学和药理学B-cell

NHLCYP2B6CYP2C19为证实Yule

et

al.CTX及其代谢产物的清除下降可导致儿童B-cell

NHL复发风险升高第6页/共26页METHODS方案：COPADM具体：环磷酰胺250mg/m2bid，d2,3,4d1氢化泼尼松60mg/m2/day，d1-7多柔比星60mg/m2，d2样本收集：B-cell

NHL患者49例收集血浆样本644个第7页/共26页环磷酰胺：250mg/m2

bid，d2,3,4共6个dose长春新碱2.0mg/m2，Dose

1：d2使用环磷酰胺前，后1h、2h、4h、6h、12hDose

5：d4使用环磷酰胺前，后1h、2h、4h、6h、12h环磷酰胺Dose

1

dose

5

药代动力学情况RESULTSDose

5

vs

dose

1

CP

CL

(3.68±1.43

vs

1.83±1.07

L/h/m2）Dose

5

vs

dose

1

CP

AUC

(4.7±1.7

vs

10.3±5.3

mg/ml.min）Dose

1

Cmax

9.8-114.6ug/ml（15-120min）Dose

5

Cmax

8.53-53.7ug/ml（15-60min）第8页/共26页RESULTSDose

5

vs

Dose

1所有代谢产物的AUC0-6h显著增加Dose

1

DCCP

AUC0-6h对无进展生存期具有负相关影响

（再度恶化患者vs无病生存患者）

Doses

1

and

5

DCCP

AUC0-6h分别高74%and

38%第9页/共26页*1/*1

(21),

*1/*6

(22)

and

*6/*6(6)

for

CYP2B6*6RESULTS与CYP2B6纯合子野生型相比dose

1

(1.54±0.11

vs

2.20±0.31

L/h/m2)dose

5

(3.12±0.17

vs

4.35±0.37

L/h/m2)2.CYP2B6*6对CTX

CL有显著影响，至少1个变异的等位基因与

CL下降有关第10页/共26页*1/*1

(21),

*1/*6

(22)

and

*6/*6(6)

for

CYP2B6*6RESULTSCYP2C19*17对CTX

CL无显著影响，略有下降趋势与CYP2C19野生型纯合子相比dose

1

(1.49±0.19

L/h/m2

vs

1.94±0.19

L/h/m2)dose

5

(3.12±0.36

L/h/m2

vs

3.86±0.25

L/h/m2)第11页/共26页*1/*1

(34),

*1/*2

(12)

and

*2/*2

(3)

for

CYP2C19*2

and

*1/*1

(37),

*1/*17

(10)

and

*17/*17

(2)

for

CYP2C19*17RESULTSDose

1环磷酰胺CL与生存率的关系Dose

5环磷酰胺CL与生存率的关系环磷酰胺的清除与无病生存率无明显相关性第12页/共26页*1/*1

(34),

*1/*2

(12)

and

*2/*2

(3)

for

CYP2C19*2

and

*1/*1

(37),

*1/*17

(10)

and

*17/*17

(2)

for

CYP2C19*17RESULTSDose

1

DCCP

AUC0-6h与生存率的关系Dose

5

DCCP

AUC0-6h与生存率的关系相关基因多态性对CP代谢产物CXCP、DCCP、KetoCP、AUC未发现有影响第13页/共26页结论第14页/共26页1.本研究结果不支持CXT代谢与儿童B-cellNHL复发之间的联系。

证实了CYP2B6基因型对CTX药代动力学有影响。

CTX的药理学变化对临床结果没有明确的影响。ABCB1和CBR1的单核苷酸多态性可以预测接受R-CHOP化疗的弥漫性非霍奇金淋巴瘤患者的毒性第15页/共26页R-CHOP

vs

(R)-ACVBP毒性比较第16页/共26页认为ABCB1

and

可用于识别R-chop化疗后骨髓和消化系统毒性高风险的患者Both

of分别研究R-ACVBP、R-CHOP与SNP的相关性第17页/共26页SNPR-ACVBPR-CHOPABCB1rs2229109NE减少性发热呕吐腹泻呕吐

黏膜炎CBR1rs20572NE减少性发热治疗延期rs9024NE减少性发热GSTP1rs1695NE减少性发热SLC22A16rs714368治疗延期CT基因型患者：ABCB1（rs2229109）→腹泻(P=0.007)呕吐(P=0.003)未发现TT基因型患者（突变纯合子）hh基因型：CBR1→贫血(P=0.018

and

0.026),血小板减少(P=0.015

and

0.017),腹泻(P=0.019).第18页/共26页结论第19页/共26页

Yao

et

al.的研究未发现ABCB1

SNP与≥3血液毒性和胃肠毒性的关系（CTX和多柔比星治疗的乳腺癌患者），可能由于未覆盖本文研究的rs2229109，因此rs2229109被认为是特异的多态性。

CBR1的变异型可预测相关化疗毒性.CBR1的两个SNP位于21号染色体，位置靠近，处于高锁链状态，可能是两个变异型产生相同的结果的原因。

ABCB1

and

CBR1多态性与CHOP相关方案产生的骨髓及消化道毒性相关。通过分析宿主药物遗传学背景来预测采用R-CHOP21方案治疗的弥漫大B细胞淋巴瘤患者的临床结局和毒性106例新诊断DLBCL方案：R-CHOP21SNPs：15个基因

19个多态型平均剂量：R-CHOP21利妥昔单抗121.1

mg/m2环磷酰胺232.0

mg/m2阿霉素15.0

mg/m2长春新碱0.42

mg/m2强的松161.0

mg/m2第20页/共26页DLBCL

patients

who

carried

the

GSTA1

rs3957357

CT/TTgenotypes

displayed

a

better

EFS(3-year

EFS:

69.4%;

s.e.:

5.7%)

compared

to

patients

who

carried

the

GSTA1

rs3957357

CC

genotype

(3-year

EFS:

40.9%;s.e.:

9.1%)

(P

¼

0.024;

q

¼

0.192)

(Supplementary

Table

4S

andFigure

1a).基因多态性与EFS的关系第21页/共26页Figure

1aGSTA1

rs3957357

CT/TT

(3-year

EFS:

69.4%）GSTA1

rs3957357

CC

(3-year

EFS:

40.9%)Figure

1bCYBA

rs4673

TT

(3-year

EFS:42.9%）CYBA

rs4673

CT/CC

(3-year

EFS:

62.9%)多药耐药蛋白基因多态性与EFS的关系Figure

1cABCC2

rs17222723

AT/AA(3-year

EFS:

37.5%)ABCC2

rs17222723

TT(3-year

EFS:

65.3%)第22页/共26页肾小球滤过率小于50胆红素大于1.2mg/100mg相关基因多态性与2-4度心脏毒性的关系123/658(18.6%)NCF4

rs1883112

AG/GG基因型（P

=0.023）为2-4级心脏毒性的独立风险因子第23页/共26页结论第24页/共26页1.许多基因多态性影响烷化剂的解毒（GSTA1

rs3957357）和阿霉素药效学（CYBA

rs4673），可预测接受R-CHOP21治疗的DLBCL患者的EFS2.NCF4

rs1883112(NADPH氧化酶和调节ROS产生相关)，可作为R-CHOP21毒性的潜在保护基因参考文献第25页/共26页

D

Rossi,

S

Rasi,

S

Franceschetti,et

al.Analysis

of

the

host

pharmacogeneticbackground

for

prediction

of

outcome

and

toxicity

in

diffuse

large

B-celllymphoma

treated

with

R-CHOP21.

Leukemia

(2009)

23,

1118–1126.

Clelia

Madeddua,

Martino

Deiddab,

Alessandra

Pirasb,et

al.Pathophysiology

ofcardiotoxicity

induced

by