病原细菌采样技术

病原菌采样技术广州市CDC2011.12.06主要内容标本的正确采集和处理选择合适的培养基和培养方法常见病原菌标本的采集食物中毒检材的处理一、正确采集和处理标本无菌操作血液、脑脊液及穿刺液等---严格无菌操作粪便、肛拭子和咽拭子等---避免杂菌污染盛放容器无菌，防破碎容器采集时间和部位尽量在使用抗菌药物之前选择合适的部位采集送检时间和方法标本做好标记，包括姓名，日期，标本类型，项目等信息填好送检单，立即送检不能及时送检者，置运送培养基，4℃保存运送特殊病原菌如脑膜炎球菌应35-37℃保温运送安全防护防止污染、传播和自身安全防护二、选择合适的培养基和培养方法根据：标本来源、可能存在的病原菌血液、脑脊液

1.脑脊液标本直接涂片染色镜检2.培养基：血培养瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麦康凯平板）/EMB（伊红美蓝平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培养基）3.培养方法：同时在需氧、厌氧和CO2环境培养粪便、肛拭子GN、SS、MAC/EMB、碱性胨水、TCBS、NYE痰、咽拭子1.直接涂片染色镜检2.BAP、CA、SA、BCYE（军团菌培养基）3.在需氧、厌氧和CO2环境培养中段尿1.做细菌计数2.BAP、MAC/EMB、CA脓液、分泌物1.可直接涂片染色镜检2.EB(增菌肉汤)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厌氧环境培养生殖道标本1.部分标本直接涂片染色镜检2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻标本1.部分标本直接涂片染色镜检2.EB、BAP、MAC/EMB、CA三、常见病原菌标本的采集血液、脑脊液采血时间与次数

用药前24小时内采3~4次血液标本，可使细菌检出率高达99%；一般在病人发热初期1~2天内或发热高峰时采集采血部位

一般从肘静脉采血，亚急性细菌性心内膜炎等病人则从肘动脉或股动脉采血采血量

成人5~10ml/次，婴幼儿1~5ml/次，血量与培养基比例以1:10为宜脑脊液

采集3~5ml/次，35-37℃保温，立即送检粪便标本自然排便采集法

挑取有脓血、粘液或絮状物部分置采便盒/保存液/增菌液中送检直肠拭子采集法

置C-B保存液/增菌液中送检呼吸道标本咽拭采集法

尽量避免口腔正常菌群污染自然咯痰法

用清水反复漱口，用力自气管深部咳出当日第一口脓痰，置无菌容器中尽快送检小儿取痰法气管镜采集法胃内采痰法

结核病人可用此法采集气管穿刺法

用于厌氧菌培养呼吸道标本采集注意事项痰液标本以晨痰为佳，咳前要充分漱口，减少口腔正常菌群的污染采集的痰液标本必须是肺深部的痰液而不是唾液标本采集后及时送检，以防某些细菌在外环境中死亡。作结核分枝杆菌或真菌培养的痰液如不能及时送检，应放入4℃冰箱，以免杂菌生长做结核分枝杆菌检查，最好收集24小时痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能发生菌血症，可同时做血培养尿液标本中段尿采集法肾盂尿采集法

确定菌尿是否来自肾脏膀胱穿刺尿采集法

用于厌氧菌培养四、食物中毒采样原则和标本处理

（一）食物中毒采样原则代表性原则：所采的样本能真正反映被采样的总体水平。典型性原则：

应根据中毒症状，可疑中毒物性质采集可能含毒量最多的样本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。适时性原则：及时采样，尽快送检。适量性原则：采样数量应根据检验项目和目的而定，但每份样本不少于检验需要量的三倍，以便供检验、复检和留样备用。程序原则：采样、送检、留样和出具报告必须按规定的程序进行，各阶段都要有完整的手续，责任分明。样本种类和数量粪便：2ml(g)呕吐物或洗胃液：5