第1章 发酵工程利用微生物进行规模化生产 同步训练 （有解析）2023-2024学年高中生物学沪教版（2023）选择性必修三

第第页第1章发酵工程利用微生物进行规模化生产同步训练（有解析）2023-2024学年高中生物学沪教版（2023）选择性必修三第1章发酵工程利用微生物进行规模化生产同步训练

一、单选题

1．泡椒凤爪在加工贮藏过程中易被嗜冷杆菌等微生物污染，导致溶烂、胀气等腐败现象，辐照杀菌是一种冷杀菌的方式，能有效降低泡椒凤爪中微生物的数量，达到一定的杀菌效果。下列叙述正确的是（）

A．嗜冷杆菌中含量最多的化合物是蛋白质

B．嗜冷杆菌细胞生命系统的边界是细胞壁

C．胀气的原因是嗜冷杆菌线粒体产生CO2导致

D．辐照可使嗜冷杆菌蛋白质变性达到杀菌目的

2．微生物无处不在，与人们的生活息息相关，下列叙述不正确的是（）

A．勤洗手主要是切断传染病的传播途径，避免接触传染

B．鸡蛋一般煮熟后再食用，不仅能够灭菌，还有利于消化

C．估算煮熟酒酿中的酵母菌数量不能使用稀释涂布平板法

D．在筛选微生物高产突变菌株时可采用高通量筛选的方法

3．为了检测冰激凌中的大肠杆菌含量是否超标。下列有关做法，正确的是（）

A．配制培养基，高压蒸汽灭菌后，将pH到调节最适

B．将冰激凌溶化后，进行梯度稀释，再用平板划线法进行接种

C．该实验应设置未接种样品的空白对照，以检测培养基是否被污染

D．置于37℃恒温箱中培养12h，统计培养基中长出来的菌落数

4．生产、生活和科研实验中常用到无菌技术。下列相关叙述错误的是（）

A．腌制泡菜时，泡菜坛内缺氧、呈酸性的环境不利于杂菌生长

B．生活中用煮沸消毒法处理牛奶既可灭菌又不会破坏牛奶中的营养成分

C．实验室中的吸管、锥形瓶等均可以用干热灭菌法处理

D．高压蒸汽灭菌时，需将高压蒸汽灭菌锅内的水加热煮沸，彻底排除锅中原有冷空气

5．下图为滤膜法测定大肠杆菌数目的大致流程：用滤膜过滤待测水样→水样中的细菌留在滤膜上→将滤膜转移到伊红-亚甲蓝琼脂平板上培养→统计滤膜上菌落数目。相关叙述错误的是（）

A．伊红-亚甲蓝琼脂培养基属于鉴别培养基

B．为防止杂菌污染，过滤装置使用前需灭菌

C．为将细菌尽可能留在滤膜上可用蒸馏水多次冲洗滤杯

D．若过滤100ml样液的结果如图所示，则1L水样中含大肠杆菌约170个

6．下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（）

成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝琼脂蒸馏水

含量10g10g2g0.46g适量1000mL

（注：伊红美蓝可用于检测大肠杆菌，使菌落染成黑色，带金属光泽）

A．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌

B．培养基中葡萄糖作为碳源，牛肉膏可以作为碳源和氮源

C．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用

D．从物理性质看，该培养基属于固体培养基，从用途看，该培养基属于选择培养基

7．下列关于塑料瓶制作果酒和果醋的叙述正确的是（）

A．为了提高果酒的产量，果汁应尽量装满发酵瓶

B．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌污染

C．制作果酒和果醋的过程中，每天需适时拧松或打开瓶盖

D．果酒制成后，可将装置移到温度较高的环境中制果醋

8．下列关于泡菜制作和腐乳制作的叙述，错误的是（）

A．泡菜制作时产生的乳酸量的多少会影响泡菜的口味和品质

B．在泡菜发酵与腐乳发酵中，起作用的菌种均为原核生物

C．在腐乳发酵过程中，需要用到菌种产生的蛋白酶等

D．制作泡菜时，腌制时间的长短等条件都会影响亚硝酸盐的含量

9．下表为某培养基的部分配方，下列叙述正确的是（）

成分蛋白胨葡萄糖K2HPO4琼脂FeSO4蒸馏水

含量10g10g2g15g0.5g1000mL

A．该培养基缺少提供生长因子的营养成分

B．除去蛋白胨，该培养基可用于选择培养固氮微生物

C．配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行

D．该培养基包含的营养成分有碳源、氮源、水、无机盐和琼脂

10．如表所示为某培养基的配方，下列叙述错误的是（）

成分NaNO3K2HPO4MgSO4·7H2O（CH2O）蒸馏水青霉素

含量3g1g0．5g30g定容至1000mL0．1万单位

A．根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基

B．根据功能划分，该培养基属于选择培养基

C．根据培养基的配方可知，该培养基可培养异养型微生物

D．该培养基可以用于培养细菌

11．在伊红—亚甲蓝培养基中，大肠杆菌若分解乳糖则可形成深紫色菌落，并有金属光泽；若分解葡萄糖则形成透明菌落。研究人员在伊红—亚甲蓝培养基中同时加入葡萄糖和乳糖，在所有操作均规范的情况下培养大肠杆菌，初期培养基中仅出现透明菌落，培养4h后，菌落数量稳定在个·左右；培养6h后，开始出现深紫色菌落；培养10h后，全部为深紫色菌落，且菌落数量达个·左右。下列分析错误的是（）

A．葡萄糖和乳糖均可作为大肠杆菌生长过程中的碳源

B．生长过程中，大肠杆菌优先利用葡萄糖，之后再利用乳糖

C．4h左右大肠杆菌生长停滞，可能与细胞中缺乏利用乳糖的酶有关

D．大肠杆菌由利用葡萄糖转变为利用乳糖的原因是发生了基因突变

12．如图是草莓酒制作的步骤，下列叙述错误的是（）

A．步骤⑤为加入酵母菌液

B．步骤②是对草莓进行严格的灭菌处理

C．在草莓酒发酵后期放气间隔时间可延长

D．发酵过程中发酵液密度和pH会逐渐减小

二、多选题

13．樱桃中含有丰富的矿质元素，具有补血、抗氧化等多种保健功能。某兴趣小组用带盖的瓶子制作樱桃酒和樱桃醋，下列叙述错误的是（）

A．榨取樱桃汁装入发酵瓶后需要用湿热灭菌法进行灭菌

B．利用樱桃酒酿制樱桃醋的过程中需要略微降低温度

C．樱桃醋制作过程中每隔一段时间需要将瓶盖拧松一次

D．向发酵液中倒入一些糙米陈醋可以缩短果醋制作时间

14．北京冬奥会食堂让各国运动健儿爱上中国味道，其餐余垃圾在垃圾集中点采用“生化+雾化+膜过滤”技术处理后，可以达到无二次污染的标准。为筛选对抗生素有抗性，高效降解淀粉的微生物，提高生化处理效率，研究人员将餐余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如图所示的操作。下列说法正确的是（）

A．用平板划线法将稀释的餐余垃圾浸出液接种在X培养基上

B．餐余垃圾浸出液在接种前需要添加淀粉、抗生素和进行高压蒸汽灭菌

C．X培养基是含有琼脂的固体选择培养基，Y是不含琼脂的液体培养基

D．图中降解淀粉最高效的微生物是⑤，可根据菌落特征判断微生物类型

15．我国古代劳动人民酿制的美酒、制作的腐乳等为生活增添色彩，反映了发酵产品已经融入了我国传统文化和人们的饮食生活。下列有关传统发酵技术及制作传统发酵食品的叙述，正确的是（）

A．传统发酵以混合菌种的固体发酵、半固体发酵及液体发酵为主

B．多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母、曲霉和毛霉等

C．葡萄醋制作过程中发酵液表面一般会形成一层菌膜

D．在果酒发酵进程中应适时拧松瓶盖放气，在发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可延长

16．甲拌磷（3911）是高毒类有机磷农药，在土壤中存留可达50天左右，我国已禁止在水果蔬菜上使用。下图是从土壤中筛选甲拌磷降解菌XT2的过程，有关说法正确的是（）

A．图中的选择培养基需用干热灭菌法灭菌并以甲拌磷为唯一碳源进行细菌培养

B．在稀释样品接种的培养基培养的同时，需和一个未接种的共同培养在恒温箱中。

C．该过程用到的接种方法为稀释涂布平板法

D．若用图中的接种方法进行计数，则计菌数的结果比实际值偏小

三、综合题

17．地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶将纤维素分解成葡萄糖从而为人类所利用。某同学想从富含纤维素的土壤中筛选可分解纤维素的菌株，请回答下列问题：

(1)纤维素酶是一种复合酶，其组分中葡萄糖苷酶的作用是。

(2)从富含纤维素的土壤中筛选目标菌株的方法是染色法。实验流程是→选择培养→→涂布平板→挑选菌落。

(3)在选择培养基中，所用碳源是。在操作过程中要对涂布器和培养基进行灭菌，灭菌方法分别是、。在挑选菌落时，应挑选的菌落。

(4)该同学从富含纤维素的土壤中筛选纤维素分解菌的原因是。

18．自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下表是两种培养基配方及有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。

表1：A培养基配方

KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂H2O

1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g15.0g1000mL

表2：B培养基配方

纤维素粉Na2NO3Na2HPO4·7H2OKH2PO4MgSO4·7H2OKCl酵母浸膏H2O

5g1g1.2g0.9g0.5g0.5g0.5g1000mL

(1)如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应选择上述（A、B）配方的培养基，在该培养基中加入指示剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。据B培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是。

(2)在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是。

(3)若取土样6g，应加入m的无菌水配制成稀释10倍的土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同稀释倍数的土壤溶液。将103～107倍稀释的稀释液分别吸取0.2mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48h，观察并统计菌落数，结果如表，其中倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为个。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目（填“低”或“高”），因为。

稀释倍数103104105106107

菌落数/个1号平板478367277265

2号平板496354261208

3号平板509332254293

(4)若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格（体积为0.1mm3）有25个中方格的计数板为例进行计算，设5个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为个/mL。

19．将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中，再将所缺的营养物质点植于平板上，该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质，便在这种营养物质扩散处生长繁殖，形成肉眼可见的菌落圈，这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类（碳源）的需求情况，操作流程如下：

Ⅰ．培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表（加水定容至1L）：

成分NaClKH2PO4K2HPO4（HN4）2SO4MgSO47H2O琼脂

质量/g10．50．520．220

同时配制质量分数为10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL

Ⅱ．将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀，倒平板。

Ⅲ．将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区，并注明要点植的糖类名称。

V．通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片，待平板吸收干燥后倒置培养24小时。

结合所学知识，回答下列问题：

(1)无碳培养基配方中加入（NH4）2SO4的目的是。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是。倒平板后用法进行接种。

(2)该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生，但大小不同，据此得到的初步结论是。

(3)生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株（失去合成某种生长因子能力的菌株）的筛选和鉴定，例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体，现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液，但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型，某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定，请将他们的实验设计补充完整。

实验思路：将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀，倒平板；将培养基划分成两个相等的区域A、B；A区、B区；在适宜温度下培养，观察菌落产生的区域。

实验结果及结论：。

四、实验题

20．暹罗芽孢杆菌有望作为饲料发酵剂和添加剂应用于畜禽生产，以实现绿色健康养殖。

(1)大肠杆菌、沙门氏菌和产气荚膜梭菌（厌氧菌），能引起家禽和家畜的肠道疾病，常使用氨苄青霉素治疗。为检测暹罗芽孢杆菌代谢物的抑菌能力，实验过程如图1所示。

I、请完善实验过程：①；②（填选项）

a、37℃、200转/min、恒温培养箱

b、37℃、200转/min、厌氧培养箱

c、37℃、恒温培养箱

d、37℃、厌氧培养箱

e、上层清液

f、下层沉淀

Ⅱ、该抑菌实验还需要设计作为对照（填选项）。实验结果说明暹罗芽孢杆菌对三种病原菌有较好的抑菌活性，且不弱于氨苄青霉素。

A．等量无菌水

B．等量LB液体培养基

C．等量FTG液体培养基

D．等量含有氨苄青霉素的无菌水

E．等量含有氨苄青霉素的LB液体培养基

F．等量含有氨苄青霉素的FTG液体培养基

(2)研究者基于（1）的部分操作和检测方法，设计了如下表所示实验，发现暹罗芽孢杆菌具有较好的产酶能力。请任选一组完善下表中的实验设计。

检测酶的种类培养基成分检测指标

蛋白酶+2%琼脂

淀粉酶+2%琼脂

纤维素酶+2%琼脂

(3)已知肠道中的胆盐能够抑制肠道细菌的生长。检测暹罗芽孢杆菌酸性耐受和胆盐耐受能力，实验结果如图2．

综合上述研究，阐明暹罗芽孢杆菌可以添加在畜禽生产的饲料中的理由是。

参考答案：

1．D

【分析】细胞中的化合物包括无机化合物和有机化合物，无机化合物包括水和无机盐，有机化合物包括糖类、脂质、蛋白质和核酸，其中细胞含量最多的化合物是水，细胞中含量最多的有机物是蛋白质。

【详解】A、活细胞中含量最多的化合物是水，因而嗜冷杆菌中含量最多的化合物是水，A错误；

B、细胞作为一个基本的生命系统，它的边界是细胞膜，不是细胞壁，B错误；

C、嗜冷杆菌属于原核生物，没有线粒体，C错误；

D、辐照杀菌是利用射线（包括X射线、γ射线和加速电子束等）的辐照来杀灭有害细菌的一项技术，这些射线会使嗜冷杆菌的蛋白质变性而达到杀菌目的，D正确。

故选D。

2．B

【分析】实验室常用的灭菌方法：①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】A、微生物无处不在，勤洗手主要是切断传染病的传播途径，避免接触传染，A正确；

B、鸡蛋是从母鸡的泄殖腔排出来的，蛋壳上存在大量的微生物，鸡蛋者熟后蛋白质的空间结构被破坏，容易被蛋白酶水解，食用后更容易消化，但水煮只能杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，即水煮只能消毒，不能灭菌，B错误；

C、酒酿煮熟后想估算其中的酵母菌数量只能利用显微镜进行直接计数，不能用稀释涂布平板法，因为酵母菌已经死亡，不能培养出菌落，C正确；

D、高通量筛选是微生物菌种选育过程中常用的筛选技术，它以微孔板为载体，将诱变后培养得到的单菌落接种到含有发酵培养基的微孔板中培养，可以实现同一时间检测上万份产物产量的目标，在筛选微生物高产突变菌株时可采用高通量筛选的方法，D正确。

故选B。

3．C

【分析】稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。

【详解】A、应先调节pH到弱碱性，再进行高压蒸汽灭菌，A错误；

B、将冰激凌溶化后，进行梯度稀释，再用稀释涂布平板法进行接种，B错误；

C、设置未接种样品的空白对照，可以根据培养基中是否存在菌落来判断培养基是否被污染，C正确；

D、置于37℃恒温箱中培养1-2天，统计培养基中长出来的菌落数，D错误。

故选C。

4．B

【分析】实验室常用的灭菌方法：

①灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

②干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。

③高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】A、腌制泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，无氧呼吸能够产生乳酸，泡菜坛内缺氧、呈酸性的环境不利于杂菌生长，A正确；

B、生活中用巴氏消毒法属于低温消毒，其处理牛奶既可杀死部分微生物又不会破坏牛奶中的营养成分，B错误；

C、实验室中的吸管、锥形瓶属于玻璃器皿可以用干热灭菌法处理，C正确；

D、高压蒸汽灭菌时，需将高压蒸汽灭菌锅内的水加热煮沸，彻底排除锅中原有冷空气，若未排尽锅内的冷空气，则无法达到灭菌效果，D正确。

故选B。

5．C

【分析】1、伊红美蓝培养基通常用于鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成黑色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。

2、由题图信息分析可知，滤膜法是检测水样中大肠杆菌群的方法。将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠杆菌菌落，依据过滤水样体积计算每升或每100毫升水样中的大肠杆菌菌群数。该方法操作简单、快速，主要适用于杂质较少的水样。

【详解】A、伊红-美蓝琼脂培养基可鉴别大肠杆菌，所以伊红-美蓝琼脂培养基属于鉴别培养基，A正确；

B、测定前，滤杯、滤膜、滤瓶、镊子均需进行灭菌处理，B正确；

C、为防止杂菌污染，在无菌条件下需用无菌水冲洗滤杯，并再次过滤，C错误；

D、据图可知，平板上出现了17个菌落，说明100ml样液中有17个大肠杆菌，则1L水样中含大肠杆菌约17÷100×103=170个，D正确。

故选C。

6．B

【分析】据表分析：此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。微生物的培养基的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐，有的还会有生长因子等。

【详解】A、此培养基中能生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，A错误；

B、培养基中葡萄糖作为碳源并提供能量，牛肉膏可以为微生物的生长繁殖提供碳源和氮源，B正确；

C、该培养基调节合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌，C错误；

D、从物理性质看该培养基含有琼脂，属于固体培养基，从用途看该培养基用于鉴定大肠杆菌，属于鉴别培养基，D错误。

故选B。

7．D

【分析】果酒制备的菌种是酵母菌，一般控制在18～30℃，属于兼性厌氧型细菌，进行无氧呼吸产生酒精．果酒制作的原理是酵母菌在无氧的条件下进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。果醋制备的菌种是醋酸菌，温度为30～35℃，属于好氧性细菌，果醋制作的原理是醋酸菌在氧气充足的条件下可以将葡萄糖转变成醋酸或将乙醇变成醋酸；温度和氧气影响酵母菌和醋酸菌的生长，因此在发酵过程中应注意控制发酵的温度和通气状况，为保证产品的品质，在发酵过程中应防止杂菌污染。

【详解】A、果酒发酵会产生CO2，灌的过满会导致瓶子难以容纳CO2，影响发酵进程，甚至使塑料瓶涨破，A错误；

B、醋酸发酵是有氧发酵，应开启气口，保证空气流通，但要制作净化装置，以防止杂菌进入，B错误；

C、制果酒的过程中每天需适时拧松或打开瓶盖，以排出CO2，醋酸发酵是有氧发酵，应开启气口，C错误；

D、果酒发酵应将温度控制在18～30℃，而醋酸菌是嗜温菌，在进行果醋发酵时，应将温度控制在30～35℃，D正确。

故选D。

8．B

【分析】腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵制作的大豆食品。早在公元S世纪的北魏古籍中，就有关于腐乳生产工艺的记载。千百年来，腐乳一直受到人们的喜爱。这是因为经过微生物的发酵，豆腐中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸，味道鲜美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存。多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等其中起主要作用的是毛霉。

【详解】A、泡菜制作时产生的乳酸量的多少会影响泡菜的口味和品质，酸度过大或过小都影响口味，A正确；

B、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，主要是真核生物，B错误；

C、在腐乳发酵过程中，多种微生物产生蛋白酶、脂肪酶等发挥作用，C正确；

D、制作泡菜时，腌制时间的长短等条件都会影响亚硝酸盐的含量，一般是先增多后降低，应在合适的时间食用，D正确。

故选B。

9．B

【分析】各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

【详解】A、生长因子主要包括维生素、氨基酸和碱基等，它们一般是酶和核酸组成成分，蛋白胨可以提供生长因子，A错误；

B、选择培养具有固氮能力的微生物时应该用不含氮源的选择培养基，该培养基的中蛋白胨能提供氮源，故去掉该培养基中的蛋白胨，可用于选择培养固氮微生物，B正确；

C、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而配培养基不需要在酒精灯的火焰旁进行，C错误；

D、该培养基包含的营养成分有碳源、氮源、水、无机盐，琼脂属于凝固剂，D错误。

故选B。

10．D

【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2、伊红美蓝培养基通常用于鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成黑色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽。

【详解】A、液体培养基中加入凝固剂（如琼脂）可形成固体培养基，题表所示的培养基配方中没有加凝固剂，因此属于液体培养基，A正确；

B、该培养基中的加入了青霉素，可以分离得到真菌，属于选择培养基，B正确；

C、该培养基中的（CH2O）可作为有机碳源，因此其培养的微生物的同化作用类型是异养型，C正确；

D、该培养基中含有青霉素，其能抑制细菌的生长，因此不能用于培养细菌，D错误。

故选D。

11．D

【分析】根据题干信息，我们可知大肠杆菌先消耗葡萄糖，当葡萄糖消耗殆尽后再消耗乳糖。

【详解】A、由题意可知，大肠杆菌可以分解葡萄糖和乳糖，说明二者均可作为培养大肠杆菌的碳源，A正确；

B、培养大肠杆菌初期仅出现透明菌落，6h后才出现深紫色菌落，说明生长过程中，大肠杆菌优先利用葡萄糖，再利用乳糖，B正确；

C、培养4h后，菌落数量稳定在个·左右，说明4h左右大肠杆菌生长出现停滞，可能与细胞中缺乏利用乳糖的酶有关，C正确；

D、因整个过程中大肠杆菌的数量在增加（并无减少），故大肠杆菌由利用葡萄糖转变为利用乳糖的原因并不是基因突变的作用，D错误。

故选D。

12．B

【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、分析题图：图中①表示冲洗，⑤表示接种。

【详解】A、步骤⑤为接种，即加入酵母菌液或含酵母菌的凝胶珠，A正确；

B、步骤②是冲洗，不能进行灭菌处理，B错误；

C、在草莓酒发酵后期，酵母菌减少，释放的二氧化碳减少，因此放气间隔时间可延长，C正确；

D、发酵过程中，葡萄糖被分解形成酒精和二氧化碳，因此发酵液密度和pH会逐渐减小，D正确。

故选B。

13．ABC

【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。

果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。

当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

【详解】A、榨取樱桃汁装入发酵瓶后不需要灭菌，否则将会杀死野生型酵母菌，A错误；

B、酿制果醋所需的菌种是醋酸菌，温度是30-35℃，需要持续通入空气；果酒制备的菌种是酵母菌，条件是18-25℃，密封，所以利用樱桃酒制作樱桃果醋，需要适当升高温度，并且及时通气，B错误；

C、酿制果醋所需的菌种是醋酸菌，需要持续通入空气，所以制作过程不需要每隔一段时间将瓶盖拧松一次，C错误；

D、向发酵液中倒入一些糙米陈醋，增加了醋酸菌的数量，可以缩短果醋制作时间，D正确。

故选ABC。

14．CD

【分析】微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

【详解】A、微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划线法，图示表示用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上，A错误；

B、若对餐余垃圾浸出液在接种前通常进行高压蒸汽灭菌会杀死菌种，导致实验失败，B错误；

C、结合题意可知，本实验目的是筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，故图中X培养基以淀粉为唯一碳源，且应添加抗生素起选择作用；Y培养基是液体培养基，进行扩大培养，其中不含凝固剂琼脂，C正确；

D、淀粉与碘变蓝色，加入碘液后，能够分解淀粉的菌落周围出现清晰区，图中能最高效降解淀粉的微生物是⑤（分解圈最大）；不同微生物形成的菌落特征不同，可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。

故选CD。

15．BCD

【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

【详解】A、传统发酵食品所用的是自然菌种，没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵和半固体发酵为主，A错误；

B、腐乳的制作过程中有多种微生物参与，如酵母、曲霉和毛霉等，B正确；

C、葡萄醋制作过程中发酵液表面一般会形成一层菌膜，是因为醋酸菌是好氧菌，是由醋酸菌大量繁殖形成，C正确；

D、在果酒发酵过程中有CO2产生，应适时拧松瓶盖放气，在发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可延长，D正确。

故选BCD。

16．BCD

【分析】选择培养基：在培养中加入某种化学物质，该物质能够抑制其他微生物生长或促进目的微生物生长，从而分离出特定微生物，例如用尿素作唯一碳源的培养基来培养尿素分解菌。

【详解】A、培养基灭菌应为高压蒸汽灭菌法，A错误；

B、为检验培养基灭菌是否合格，可在稀释样品接种的培养基培养的同时，和一个未接种的共同培养在恒温箱中，B正确；

C、由图可知，平板中菌落均匀分布，说明该过程用到的接种方法为稀释涂布平板法，C正确；

D、图示接种方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起形成一个菌落时，会计数成一个菌体，所以该种方法统计的菌体数量比实际值偏小，D正确。

故选BCD。

17．(1)将纤维二糖分解为葡萄糖

(2)刚果红土壤取样梯度稀释

(3)纤维素灼烧灭菌法高压蒸汽灭菌法周围产生透明圈

(4)在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种环境中更容易获得目的菌株

【分析】稀释涂布平板法：将待分离的材料作一系列稀释，取不同稀释度适量涂布于固体培养基平板上或与已熔化的固体培养基一起倾注入平板内，经过培养即有一个微生物细胞繁殖来的单个菌落。高压蒸汽灭菌法是可杀灭包括芽孢在内的所有微生物的一种灭菌方法，是灭菌效果中最好的。适用于普通培养基、生理盐水、手术器械、玻璃容器及注射器、敷料等物品的灭菌。灼烧灭菌法：直接用火焰焚烧物体以彻底杀灭其中微生物的方法。通常用于实验室中接种环、接种针等器具的灭菌。

【详解】（1）葡萄糖苷酶主要是水解葡萄糖苷键，将纤维二糖分解为葡萄糖。

（2）刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，因此可以用刚果红染色法从富含纤维素的土壤中筛选分解纤维素的目标菌株；稀释涂布平板法可以用来分离目的菌，实验流程是土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。

（3）若选用分解纤维素的目的菌，需要以纤维素为唯一碳源的培养基；对涂布器进行灭菌可以采用灼烧灭菌法（在酒精灯火焰上进行），对培养基可以采用高压蒸汽灭菌法；由于目的菌含纤维素酶，能将培养基中的纤维素水解，因此应挑选周围产生透明圈的菌落。

（4）在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种环境中更容易获得目的菌株，因此该同学从富含纤维素的土壤中筛选纤维素分解菌

【点睛】本题主要考查微生物的分离，要求学生有一定的实验设计及结果分析能力。

18．(1)A酚红异养型

(2)防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发

(3)54稀释涂布平板法1051.32×108低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

(4)将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落2.25×108

【分析】接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体—菌落。

【详解】（1）如果要分离土壤中能分解尿素的细菌，应以尿素为唯一的氮源，应选择上述A配方的培养基，尿素分解菌能够将尿素分解成氨，PH升高，可以用酚红指示剂进行鉴定出该种细菌能否分解尿素。B培养基含有纤维素粉，所培养微生物的同化作用类型是异养型。

（2）在制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是防止培养皿盖上冷凝的水滴入培养基造成污染，避免培养基水分过快蒸发。

（3）若取土样6g，应加入54ml的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液，样品的稀释程度直接影响平板上生长的菌落的数目，选用一定稀释范围的样品进行培养，将103-107倍的稀释液分别吸取0.2mL加入到固体培养基上，用稀释涂布平板法将菌液用涂布器涂布到固体培养基上。105倍的稀释菌落数在30～300之间，比较合适。由此计算出每克土壤中的菌落数为：（277+261+254）÷3÷0.2×105=1.32×108。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目低，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（4）平板划线法分离土壤中的尿素分解菌时第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌种逐步稀释分散以便获得（不连续）单个菌落。原菌液的菌群密度为(45÷5)/(0.1÷25)×102×103=2.25×108个/mL。

19．(1)提供氮源（供微生物合成含氮有机物）高压蒸汽灭菌稀释涂布平板

(2)大肠杆菌可以利用四种糖类（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖）作为碳源，但利用的程度不同

(3)点植氨基酸点植维生素若菌落只在A区产生，则为氨基酸缺陷型；若菌落只在B区产生，则为维生素缺陷型；若菌落产生在AB交界处，则为氨基酸-维生素缺陷型

【分析】1、培养基一般含有水、碳