血红蛋白电泳

StrictlyconfidentialtoSebia

血红蛋白检测基础

Aboutthehemoglobin

关于血红蛋白StrictlyconfidentialtoSebiaStrictlyconfidentialtoSebia什么是血红蛋白?血红蛋白是由4条珠蛋白肽链组成的聚合物，即来自父母成人有4种不同的珠蛋白肽链α,β,γ,δ珠蛋白肽链如何聚合的？StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbF不同时期的珠蛋白链合成StrictlyconfidentialtoSebiaHemoglobincompositionforanormaladultblood:正常成人血液中血红蛋白的组成：HbA≈96%HbA2≈3%HbF<1%AnormalCEprofile正常电泳图谱StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2δ2:HbA2正常电泳图谱StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFHbFnotquantifiedherebecauseinaverylowconcentration(<0.1%)

innormaladultbloodHemoglobinopathies

血红蛋白病Qualitatively性质由于珠蛋白基因的突变而影响血红蛋白的结构血红蛋白病（Hb变异体）数量由于珠蛋白基因的突变或缺失影响血红蛋白的合成Thalassemias地中海贫血变异体或地贫的类型与珠蛋白基因有关：Alpha-，Beta-，等等StrictlyconfidentialtoSebia病理性血红蛋白的出生率每1,000个出生血红蛋白病是遍布世界各地的最常见的，常染色体隐性失调的疾病。总人口的7%携带异常血红蛋白基因。每年有超过50万受影响的婴儿出生。Source:WorldHealthOrganization2008WHO地区总人口(百万)出生人口(百万)纯合子出生(千)非洲837.032.1234.8美洲929.116.410.0东南亚1807.638.349.1欧洲896.512.22.8东地中海地区592.716.916.2西太平洋(中国)1797.525.518.1合计6860.4141.4332.0全球血红蛋白病人群负荷Blood,2011;WHOStatistics,2012.常染色体隐性遗传的遗传性疾病正常基因异常基因杂合子(1个异常基因)纯合子(2个异常基因)血红蛋白病理中国南方高发地区人群携带率3%-24%BloodRev,2012.

和

地贫广泛分布于世界热带和亚热带全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者(占总人口的2%)血红蛋白电泳检查的临床意义

-地中海贫血

-地中海贫血异常血红蛋白病醋酸纤维膜电泳

琼脂糖凝胶电泳毛细管电泳常用血红蛋白诊断和筛查技术

电泳

高效液相色谱HPLC检测血红蛋白的毛细管电泳仪标本的要求EDTA抗凝管≥2mL一周内完成检测避免溶血正常标本血红蛋白电泳图谱HbAHbA2Z15:HbH，HbIZ14:HbNZ13:Hb-JRovigo,HbN-BaltimoreZ12:HbBart’s,HbJ-Providence,HbJ-Mexico,HbJ-baltimore….Z11:DenaturatedHbA,HbKaoshiungZ10:HbHope,HbM-IwateZ9:HbA,HbCamperdown,HbPhnomPenh……Z8:AcetylatedHbF,HbAltanta,HbAthens-GAZ7

:

HbF,

denaturatedHbS,HbPorto-Alegre……..Z6:HbD-Punjab,denaturatedHbE,HbKorle-Bu,HbLepore,HbKöln….Z5:HbS,HbHasharon,HbHandsworth,denaturatedHbO-Arab.Z4:HbE,denaturatedHbC,HbKöln,HbA2variants,M-IwateHbA2variantsZ3:HbA2,HbO-ArabZ2:HbC,HbConstantSpring,SetifHbA2variantZ1:HbdA2HbaA2,HasharonHbA2variant,WinnipegHbA2variant……血红蛋白检测条带识别表血红蛋白变异体数据库血红蛋白变异体电泳图谱自动识别自动定量ALPHA-地贫StrictlyconfidentialtoSebiaAlpha-地贫StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

a-Thal1homozygousa-Thal2homozygousa-Thal1heterozygousa-Thal2heterozygousHbH

Alpha地贫（HbH病）

StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbA(↘)α2δ2:HbA2(↘)β4:HbHHbFHbAHbBart’s筛查α-地中海贫血基因类型诊断血常规临床症状血红蛋白类型αα/αα无HbA

:NHbA2

:N(2-3.5%)-α/ααα-地贫杂合子（静置型）轻度的小红细胞MCV:75-80fLMCHC:20-24无HbA&HbA2:NHbBart’s:0-3%出生时-α/-αα-地贫纯合子小红细胞贫血Hb:11-14g/dLMCV:65-75

MCHC:20-24无主要临床症状HbA:NHbA2:Nor

HbBart’s:2-8%出生时--/ααα-地贫杂合子--/-αHbH病小红细胞贫血Hb:4-12g/dLMCV:55-65MCHC:20-24溶血性贫血脾肿大HbA：

HbA2：(<1.5%)HbBart’s:>5%出生时HbH--/--α-地贫纯合子（水肿胎）严重贫血Erythroblastsdestruction红细胞大量破坏严重缺氧宫内死亡HbA&HbF：

缺如HbBart’s：80-100%HbPortland：<5%FromIsabelleVINATIER,CERBAα地贫分类alpha变异体StrictlyconfidentialtoSebiaAlpha变异体（杂合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα*2β2α*2δ2α*2γ2MUTATIONHbG-PhiladelphiaStrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα*2β2α2δ2:HbA2α*2δ2StrictlyconfidentialtoSebiaA/G=2.7A2/G-A2=2.8HbQ-Thailand杂合体beta-地贫StrictlyconfidentialtoSebiaβ珠蛋白缺失β0

β珠蛋白合成减少β+XXXX静止型

β

地贫

/

+重型β地贫

0/

0轻型β地贫

/

0中间型β地贫

+/

+中间型β地贫β+/β0Xβ-地贫分类及基因情况β珠蛋白基因Beta-地贫StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbA(↘)α2δ2:HbA2(↗)筛查β地中海贫血

Anh.Car.A0+A2A1Alc.Ac.NNA2AHbAHbA2StrictlyconfidentialtoSebia基因型诊断血常规临床症状血红蛋白类型β/β无症状HbA

:NHbA2

:N(2-3.5%)β+/βorβ0/βββ-地贫杂合子（静止或轻型）单纯小细胞性贫血血涂片：细胞着色不足无症状HbA2:↗(4-5%)HbF:↗(2-7%),30-50%病例β+/β+orβ+/β0中间型β-地贫小细胞性贫血Hb:6-9g/dL更多的临床症状，输血的需要差异大HbA

HbA2↗HbF

↗β0/β0重症β-地贫小细胞低色素贫血Hb:<7g/dL贫血发生在出生后的一个月内，不输血，将致死HbA缺如HbA2:N或↗HbF

↗↗FromIsabelleVINATIER,CERBA

地贫分类beta变异体StrictlyconfidentialtoSebiaBeta变异体（杂合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα2β*2:HbXMUTATIONHbS杂合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbSα2δ2:HbA2Beta变异体（纯合子）StrictlyconfidentialtoSebia4αgenes

2βgenes2δgenes2γgenesα2β2:HbAα2δ2:HbA2α2γ2:HbFα2β*2:HbXMUTATIONMUTATIONHbS纯合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β*2:HbSα2δ2:HbA2α2γ2:HbFHbS纯合子StrictlyconfidentialtoSebia无背景=无法判定解决方案：与正常A2混合HbEheterozygous

HbE杂合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbEα2δ2:HbA2HbC杂合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbCα2δ2:HbA2HbD杂合子StrictlyconfidentialtoSebiaα2β2:HbAα2β*2:HbDα2δ2:HbA2HbJ-bangkok

杂合体HbNewYork

杂合体临床实例解疑variantHbA2>8%:可能有变异体迁移至此临床实例分析临床资料26岁女未孕血常规参数-Hb 10g/dL-MCV 71fL铁贮备-血清铁8µmol/L(N:10-30)-铁蛋白 8µg/L(N:10-200)

贫血，小细胞性，HbA2低Butirondeficiency!但是铁缺乏缺铁性贫血：HbA2减少，补铁治疗后必须再次检测已知的血红蛋白变异体:>1500

α

variants

β

variants

γ

variants

δ

variants其他:双突变，缺失，插入等只有基因测序可以对现有方法检测到的罕见变异体进行确诊血红蛋白变异体出现变异体的图谱要认真对待:变异位点α?β?

?异常带的含量,和异常带的位置一定要和正常图谱进行比较血常规籍贯血红蛋白变异体数据库:/hbvar/menu.html

血红蛋白变异体结果解读建议Delta变异体（杂合子）4α基因

2β基因2δ基因2γ