气相色谱测定桑叶中残杀威残留量

气相色谱测定桑叶中残杀威残留量

氨基丙烯酸农药有多种类型，其中一些毒性高，通常导致氨基丙烯酸中毒，其中之一是由此产生的垃圾。由于氨基甲酸酯类杀虫剂近年来较广泛地使用,其所引起的食物中毒、误服以及投毒事件时有发生。在临床上抢救中毒患者时,能否快速准确地确定毒物种类对拯救患者生命至关重要。由于残杀威为非常规理化检验项目,目前尚无标准检验方法。经查阅文献,目前国内外常用的检测残杀威的方法包括气相色谱法、气相色谱–质谱法、液相色谱法、液相色谱–质谱法及薄层层析法等。其中液相色谱法是最常用的方法,但该方法前处理较繁琐,分析周期长。气相色谱法由于选择性、分离效能高,分析速度快,灵敏度高,检测限可达到pg级,尤其适用于农残分析工作。目前,就残杀威在桑叶中的残留分析未见报道,本文对气相色谱检测残杀威的方法进行了实验,并加以优化改进,同时提供了样品前处理方法。1材料和方法1.1仪器、试验装置岛津2010气相色谱仪(带NPD检测器);HY–5型回旋式振荡器;EYELAN–1001D旋转蒸发仪;N–EVAP111氮吹仪;KQ–3200超声波清洗器;BS110S电子天平;具塞量筒等玻璃器皿。乙腈、丙酮、氯化钠均为分析纯,残杀威标准品(纯度99.5%)。1.2u3000nacl的稳定性将桑叶剪碎,称取样品20g,加入80mL乙腈,振荡提取1h。抽滤至盛有5gNaCl的100mL具塞量筒中,盖上塞子,剧烈振荡1min。在室温下静置10min,让乙腈相和水相分层。准确吸取10mL上层乙腈相溶液,放入150mL浓缩瓶中,在旋转蒸发仪上浓缩至近干,用丙酮定容2mL进气相色谱测定残杀威的含量。1.3高纯氢氧流样,特性有以下几种情况检测器:氮磷检测器(NPD);色谱柱:SPB–50,30m×0.32mm×0.25µm;温度条件:柱温150℃保持0min,25℃/min升至280℃,保持1.8min,残杀威的保留时间为3.34min。进样口250℃,检测器300℃。气体条件:载气为高纯氮,2.0mL·min-1;分流进样,分流比1∶10;高纯氢流速1.5mL·min-1;空气流速145mL·min-1。尾吹20mL·min-1。残杀威标样气相色谱图见图1。1.4样品进样体积vx样品的定性分析采用与农药标样的保留时间相对照的方法,单点峰面积外标法定量。公式如下:式中:X—待测样品中农药浓度(mg·kg-1);Cs—标样中农药的浓度(mg·kg-1);Ax—待测样品的出峰面积;As—标样的峰面积,由仪器所配工作站自动完成;Vx—待测样品进样体积(µL);Vs—标品取样体积(µL)。2结果与分析2.1标准曲线的绘制准确称取50.0mg(精确至0.0002g)残杀威标准样品定容至100mL容量瓶中,用丙酮溶解定容。再用丙酮梯度稀释为0.1、0.5、1、5、20mg·L-1,在上述色谱条件下进行测定,以标准溶液浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标绘制标准曲线(图2)。由标准曲线可见,残杀威在0.1～20mg·kg-1范围内,浓度与色谱峰面积呈线性关系,相关系数达0.9996,可满足残留分析的需要。2.2提取剂为单一溶剂残杀威常用的提取溶剂有乙酸乙酯、甲醇、苯、乙腈等,本研究对这4种溶剂进行萃取率及杂质干扰比较。在桑叶空白样品中添加残杀威浓度为1mg·kg-1,分别用乙酸乙酯、甲醇、苯、乙腈进行提取,其中乙酸乙酯、甲醇、苯的提取液经弗罗里硅土柱净化,乙腈提取液直接浓缩定容后进气相色谱分析,结果见表1。从表1可以看出,用乙腈提取的平均添加回收率最高,变异系数最小,其平均回收率为95.48%,变异系数为6.42%;乙酸乙酯提取回收率最低,为70.77%,变异系数最大,为12.47%。造成4种溶剂萃取率较大差别的原因可能是乙酸乙酯、甲醇、苯提取需要净化处理,增加了实验步骤,降低了回收率;而用乙腈提取后,样品可直接进行仪器分析,实验环节少,损失少,回收率较高。从4种溶剂的提取液杂质干扰看,乙酸乙酯、甲醇、苯提取的杂质较多,不能直接进样分析,需净化后才能进样;单用乙腈提取的效果优于其他3种溶剂的提取,主要是因为乙腈为中等极性的溶剂,用它提取可减少共萃物的干扰,因而选择乙腈为提取溶剂。2.3回收率、精密度与定量限用未施药的空白对照样品,按照上述提取及测定步骤,分别做0.05、1mg·kg-1两个浓度的添加回收率试验,每个浓度做5个重复,结果见表2。结果表明,残杀威在桑叶中的平均回收率在81.23%～102.54%之间;相对标准偏差(变异系数)<6.42%,最小检出量为0.01ng,最低检测浓度为0.05mg·kg-1,符合农药残留测定要求。桑叶空白及桑叶残杀威添加色谱图见图3、4。由图3、图4对比可以看出,残杀威出峰的位置上均不存在干扰峰,因此,采用乙腈提取残杀威能够减少样品中干扰物的存在,确保残留量测定准确。3样品的检测结果1)建立了检测桑叶中残杀威残留的方法。在添加水平为0.05～1mg·kg-1时,回收率在81.23%～102.54%之间,变异系数最大为6.42%。在上述分析条件下,残杀威在桑叶中的最低检测浓度0.05mg·kg-1,这说明该方法的准确度、重现性和精确度都符合农药残留量分析与检测的要求,适用于对实际样品中残杀威的分析与