实验室常规试剂配制

实验室常用试剂、缓冲液的配制1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度1MTris-HCl配制量1L配制方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。P”值JSHCI74约了0ml7.6约60ml50約碌ml4.将溶液定容至1L。5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1°C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。1.5MTris-HCl(pH8.8)组份浓度1.5MTris-HCl配制量1L配制方法 1.称量181.7gTri置于1L烧杯中。加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。用浓盐酸调节pH值至8.8。将溶液定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。10或EBuffer(pH7.4,7.6,8.0)组份浓度100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量1L配制方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。1MTris^HCIBuffer(pH74n7.6r8.0) 100ml500mMEDTAtpHS.O) 20ml向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。室温保存。3M醋酸钠(pH5.2)组份浓度配制量称亂+0壬9NaQAc* 于佃D—石ml輔杯申，規入约40ml齢进禹子水揑擇潘解*加入氓醋®呕督pH值垂弓片缶抑去莒子服将溶磁圭客筆怙丛M0年、矗-濫戏压況帶席"窒温煤萍"配制方法PBSBuffer组份浓度137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HP04,2mMKH2P04配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。[JaCI39KGI0.2g1.42gKH^POi0.27g向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加浓盐酸将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度10M醋酸鞍配制量100ml配制方法1.称量77.1g醋酸鞍置于100〜200ml烧杯中，加入约30ml的去离子水搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至100ml。使用0.22mm滤膜过滤除菌。密封瓶口于室温保存。注意：醋酸鞍受热易分解，所以不能高温高压灭菌。Tris-HCl平衡苯酚配制方法使用原料：大多数市售液化苯酚是清亮无色的，无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色，应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚，结晶苯酚必须在160°C对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物，这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此，苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要，我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。操作注意：苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上，苯酚平衡操作方法如下：液化苯酚应贮存于-20C，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68C水浴中使苯酚充分融解。加入羟基喹啉(8-Quinolinol至终浓度0.1%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。加入等体积的1MTris-HCl(pH8.0)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。重复操作步骤③。加入等体积的0.1MTris-HCl(pH8.0)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。将苯酚置于棕色玻璃瓶中4°C避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:)。1氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。配制方法：将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1混合均匀后，移入棕色玻璃瓶中4C保存。10%(W/V)SDS□组份瀧度10%配制量100ml□配制方法 1.隸蜃1右g赢缠糜的曲乞置尹00-餉OEj烧那扎加A^80ml的去關子水.阴上如熬谊執2.腐如锻盐載谨节阳厦羞7怎3将溶酒定容卸沁E扃塞馮躁存°2NNaOH组份浓度2NNaOH配制量100ml配制方法量取80ml去离子水置于100〜200ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热，有可能使玻璃烧杯炸裂)。称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中，边加边搅拌。3•待NaOH完全溶解后，用去离子水将溶液定容至100ml。将溶液转移至塑料容器中后，室温保存。2.5NHCl组份浓度2.5NHCl配制量100ml配制方法 1.在78.4ml的去离子水中加入21.6ml的浓盐酸(11.6N),均匀混合。室温保存。5MNaCl组份浓度5MNaCl配制量1L配制方法 1.称取292.2gNaCl置于1L烧杯中，加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后，适量分成小份。高温高压灭菌后，4C保存。20%(W/V)Glucose组份浓度20%(W/V)Glucose配制量100ml配制方法称取20gGlucose置于100〜200ml烧杯中，加入约80ml的去离子水后，搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至100ml。高温高压灭菌后，4°C保存。Solution 取用)组份浓度25mMTris-HCl(pH8.0),10mMEDTA,50mMGlucose配制量1L配制方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。1LITris-HCI(pH8.O)25mi0.5MEDTA(pH8O)20mlOTbGlucose(1.11M)45ml910m3高温高压灭菌后，4C保存。使用前每50ml的Solutionl中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII质粒提取用)组份浓度200価NaOH,1%(WAOSOS配制量'切用配制方法鬣取下列濬减置子500m喘杯札10%SDS 5<Jml2NNaOH 50ml士牺灭戯水定容至BOOmi,充第混匀*3-富邂保存。收落濾保存时阖国好不要超过一亍月，fl®：SDS^产生范泡|不農剧烈拨拌QSolutionIII质粒提取用)组份浓度3MKOAc,5MCH3COOH配制量500ml配制方法1.称量下列试剂，置于500ml烧杯中。KOAC 147gCHaCOOH 57.5m!加入300ml去离子水后搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至500ml。4-高温高压灭菌后，4c保存。0.5MEDTA(pH8.0)组份浓度0.5MEDTA配制量1L配制方法1.称取186.1gNa2EDTA・2H20，置于1L烧杯中。加入约800ml的去离子水，充分搅拌。用NaOH调节pH值至8.0(约20gNaOH)。注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。加去离子水将溶液定容至1L。适量分成小份后，高温高压灭菌。室温保存。1MDTT组份浓度1MDTT配制量20ml配制方法1.称取3.09gDTT,加入到50ml塑料离心管内。加20ml的0.01MNaOAc(pH5.2)，溶解后使用0.22mm滤膜过滤除菌。适量分成小份后，-20°C保存。10mMATP组份浓度10mMATP配制量20ml配制方法1.称取121mgNa2ATP・3H20，加入到50ml塑料离心管内。力加20ml的25mMTris-HCl(pH8.0)，搅拌溶解。适量分成小份后，-20C保存。组份浓度10mMATP配制量20ml配制方法1.称取121mgNa2ATP・3H20，加入到50ml塑料离心管内。力加20ml的25mMTris-HCl(pH8.0)，搅拌溶解。适量分成小份后，-20C保存。蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法30%(W/V)Acrylamide组份浓度30% (W/V)Acrylamide配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。Acrylamide 290Q&IS Wg向烧杯中加入约600ml的去离子水，充分搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L,用0.45 山山滤膜滤去杂质。于棕色瓶中 向烧杯中加入约600ml的去离子水，充分搅拌溶解。 向烧杯中加入约600ml的去离子水，充分搅拌溶解。 加去离子水将溶液定容至1L,用0.45mm滤膜滤去杂质。 于棕色瓶中4C保存。注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。40%(W/V)Acrylamide组份浓度40% (W/V)Acrylamide配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。Acrylami-deBIS 20g

注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。10%(W/V)过硫酸铵组份浓度m'.W.'Vl配制量IM配制方法1■£- ml的去离子水葩拌溶解“&號存于4©c注意=过麒酸姣落浪在4七像萍时可價用2周左宿・超过期隈衾失吿僑优作用.5xTris-GlycineBuffer(SDS电泳缓冲液)组份浓度0.125MTris,1.25MGlycine,0.(5%W/V)SDS配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"Tris 15.1 g\o"CurrentDocument"Olycin-e 94 g\o"CurrentDocument"S-DS 5.0 g加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存。5xSDS^oading^uffer组份浓度250mPJTris-HCI(pH6.&)10%(W.'V)SDS0,5%(W-V)BPB50%(V/V)甘油5%(W-'V)p-^i乙麟(2-ME)配制量5ml配制方法1.量取下列试剂，置于10ml塑料离心管中。1.25ml0.5g25mg2.5ml1MTris-HCI(pH6.8)1.25ml0.5g25mg2.5mlSD8BPB甘油加去离子水溶解后定容至5ml。小份(500ml份)分装后，于室温保存。使用前将25ml的2-ME加到每小份中。加入2-ME的LoadingBuffer可在室温下保存一个月左右。考马斯亮蓝R-250染液组份浓度0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇，10%(V/V)冰醋酸配制量1L配制方法1.称取1g考马斯亮蓝R-250，置于1L烧杯中。量取250ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。加入100ml的冰醋酸，搅拌均匀。

加入650ml的去离子水，搅拌均匀。用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。考马斯亮蓝染色脱色液组份浓度10%（V/V）醋酸，5%（V/V）乙醇配制量1L配制方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。100ml50mla50ml500ml甲詡4HR500ml甲詡4HR100ml400ml充分混合后使用。凝胶固定液（SDS银氨染色用）组份浓度50%（V/V）甲醇，10%（V/V）醋酸配制量1L配制方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。组份浓度50%组份浓度50%CW)甲醸10%(WV)找二醛2.均匀混合后室温保存。凝胶处理液（SDS 银氨染色用）配制方法「蟹觀革列试剂，加入的试剂痢扎配制方法「蟹觀革列试剂，加入的试剂痢扎配制量50ml均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状，此时应补加浓氨水，直至透明。本染色液应现用现配，不宜保存。显影液（SDS 银氨染色用）组份浓度50ml均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状，此时应补加浓氨水，直至透明。本染色液应现用现配，不宜保存。显影液（SDS 银氨染色用）组份浓度0.005%（W/V）柠檬酸，0.02%（V/V）甲醛20临AgNOa4蘇N^OH96mi2ml甲醉戊二蹩40mlZ均匀醍會后峑碣躁潯‘凝胶染色液（SDS 银氨染色用）组份浓度0.4%（W/V）AgNO3,1%（V/V）浓NH3^2o,0.04%（W/V）NaOH配制量100ml配制方法1.量取下列试剂，加入100〜200ml的试剂瓶中。

配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L试剂瓶中。甲酶50mg甲酶0.2nil加入1L去离子水后，摇动混合溶解。室温保存。核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50或AEBuffer(pH8.5)组份浓度2MTris-醋酸，100mMEDTA配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。Tris 242口MasEDTA2HaO 37.2g向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。加入57.1ml的醋酸，充分搅拌。加去离子水将溶液定容至1L后，室温保存。10或BEBuffer(pH8.3)组份浓度8&O 20nnMEDTA配制量1L配制方法匸称量下列试剂m遗于M烧都驶TrisNa^EDTA・2HQiosg7.44^55g2淹烧那申挪入約和0曲的去篱子就充分搅拌謬臊’3堀去离乎水罄溶液泉容至1L嵐塞涓棵存"10刻OPSBuffer组份浓度200mMMOPS，20mMNaOAc，10mMEDTA配制量1L配制方法称量41.8gMOPS，置于1L烧杯中。加约700mlDEPC处理水，搅拌溶解。使用2NNaOH调节pH值至7.0。再向溶液中加入下列试剂。1MNaOAs(DEPC处理) 20ml0.5MEDTA(pHS.O){DEPCjfci^)20ml用DEPC处理水将溶液定容至1L。用0.45um滤膜过滤除去杂质。室温避光保存。注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用，但变黑时不要使用。溴乙锭（10mg/ml）组份浓度10mg/ml漠乙锭配制量100ml配制方法称量1g漠乙锭，加入到100ml容器中。加入去离子水100ml，充分搅拌数小时完全溶解漠乙锭。将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。漠乙锭的工作浓度为0.5 mg/mlo注意：漠乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。Agarose凝胶配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5XTBE或1XTAE）。根据制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。在锥形瓶的瓶口封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套，小心摇动锥形瓶，使琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否则会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。熔化琼脂糖时，必须保证琼脂糖充分完全熔化，否则，会造成电泳图像模糊不清。使溶液冷却至60°C左右，如需要可在此时加入漠乙锭溶液（终浓度0.5mg/ml），并充分混匀。注：漠乙锭是一种致癌物质。使用含有漠乙锭的溶液时，请戴好手套。6•将琼脂糖溶液倒入制胶模中，然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3~5mm之间。7.在室温下使胶凝固（大约30分钟~1小时），然后放置于电泳槽中进行电泳。注：凝胶不立即使用时，请用保鲜膜将凝胶包好后在4C下保存，一般可保存2〜5天。琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围琼脂植熾度最佳线形口科A分辨薙圉（bp）0.6%仁000+30,cm07%600十12,00010%500710,00012%400-7,0001.5%200-3,00050-2.0006>LoadingBuffer(DNA电泳用)组份浓度30mM&DTA组份浓度30mM&DTAGilycerQl0.05%(W/V)XyleneCyanolFF0.05%(W/V)Br-omophenolSiue配制量配制方法500讯仁称矍下列试亂鳖齐皿制翩中。EDTABromoph-enolBlue250mgXyiene=CyanolFFE5Vmg二|匕民，吋别k丈;心」门I的W出20木3」加入180m啲甘油（Glycerol）后.便用2NNaOHffl节pH值至70丄用去專乎水定窖至的住网钛室湛■懐飢lOxLoadingBuffer(RNA电泳用)组份浓度10mM厅组份浓度10mM厅0%W3C25%(VW)D.25%(W.V)&DTAGlycerolXyleneCyanolFFBr^mophenolB!ueTOC\o"1-5"\h\z配制量 10ml配制方法 1.称量下列试剂，置于10ml离心管中。O5L1EDTA（pH&0） 2QQyl&rom（｝pnenoiBlue 25 mgXyleneCyanoiFF 25 mg向离心管中加入约4ml的DEPC处理水后，充分搅拌溶解。加入5ml的甘油（Glycerol）后，充分混匀。用DEPC处理水定容至10ml后，室温保存。核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法组份浓度配制量配制方法20XSSC组份浓度配制量配制方法3.0MNaCl,0.3M柠檬酸钠1L称量下列试剂，置于1L烧杯中。NaCI甘NaCI甘掠黴讷・加Q175-3Q£8.2g2-向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加14NHCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。20XSSPEBuffer组份浓度3.0MNaCl,0.2MNaH2PO4,0.02MEDTA配制量1L配制方法称量下列试剂，置于1L烧杯中。NaCI 175.3gN耳H#P04.HQ 27,egN匪EDT7V2FW 了4g2-向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。加NaOH调节pH值至7.4（约6.5ml的10NNaOH）。加去离子水将溶液定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。50XDenhardt's溶液组份浓度1%（W;V）Ficoll4001%W'V}P-olyvinyIpyrrol?done恢（mo盼配制量500ml配制方法称量下列试剂，置于500ml烧杯中。TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"Fiecll400 5g\o"CurrentDocument"Palyvinylpyrrolidone 5gBSA 5g加去离子水约400ml,充分搅拌溶解加去离子水将溶液定容至500ml。用0.45mm滤膜过滤后，分装成每份25ml。-20r保存。0.5M磷酸盐Buffer组份浓度0.5MNa2HPO4配制量1L配制方法称量134gNa2HP04・7H2O置于1L烧杯中。加入约800ml的去离子水充分搅拌溶解。力口入85%的H3PO4（浓磷酸）调节溶液pH值至7.2。加去离子水定容至1L。高温高压灭菌后，室温保存。SalmonDNA（鮭鱼精DNA）组份浓度10mg/mlSalmonDNA配制量约100ml配制方法称取鮭鱼精DNA2g置于500ml烧杯中，加入约200ml的TEBuffer。用磁力搅拌器室温搅拌2〜4小时，溶解后加入4ml的5MNaCl，使其终浓度为0.1M。用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以切断DNA。加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。离心回收DNA后，溶解于100ml的去离子水中，测定溶液的0D260值。计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10mg/ml。&煮沸10分钟后，分装成小份（1ml/份）。-20£保存。9.使用前在沸水浴中加热5分钟后，迅速冰浴冷却。DNA变性缓冲液组份浓度丨占"毗匚I.D.E："MlOH配制量1_配制方法吊下列尬兀言于1L燥萨中、MaCI 57.7gNaOH 20g2同烧霁中加入约加0同的去薛巒札充分搅禅溶解，M鋼去舅予水将落液定客對L后.室温躁存中预杂交液/杂交液（DNA奈交用）组份浓度6XSSC(^SSPE)Denham's0.5%(W-V)SDS100*g/nniSalmon口MA配制量约100ml配制方法1•称量下列试剂，置于200ml烧杯中。2CXSSCC^SSFE)30ml50xD^nhardt^-1Qml10%SDS5mlWmgirlSalmonDNA1ml54ml2,充分退匀后，耀用0屈切德脚g去杂质后使用预杂交液/杂交液（RNA泰交用）组份浓度6xSSCf^SSPE)5xDenhardt*80.5%(W.-V}SDS100*gmlSalmonDNA50%WMFormamide配制量100ml配制方法1•称量下列试剂，置于200ml烧杯中。2OXSSCC^SSFE)30ml50xDenharcitd510mlWbSDS5mlWmgrrlSalmonDNA1mlFormamide50ml卅O4ml2.充分混匀后，使用0.45um滤膜滤去杂质后使用。膜转移缓冲液（Westem杂交用）组份浓度39mMGlycine,48mMTris,0.037%（W/V）SDS,20%（V/V）甲醇配制量1L配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。^lyemTris 58gSD8 C.37g向烧杯中加入约600ml的去离子水，充分搅拌溶解。加去离子水将溶液定容至800ml后，加入200ml的甲醇。室温保存。TBSTButfer（Western杂交膜溝洗液）组份浓度20mMTris-HCl,150mMNaCl,0.05%（V/V）Tween20配制量1L配制方法称量下列试剂，置于1L烧杯中。NaCI 8.5g1MTris-HCI（pHB.O） 20ml向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。加入0.5mlTween20后充分混匀。加去离子水将溶液定容至1L后，4£保存。封闭缓冲液（Western杂交用）组份浓度5%（W/V）脱脂奶粉/TBSTBuffer配制量100ml配制方法称量5g脱脂奶粉加入到100ml的TBSTBuffer中，充分搅拌溶解。4£保存待用（本封闭液应该现配现用）。

实验室常用培养基的配制方法Ampicillin（100mg/ml）组份浓度100mg/mlAmpicillin配制量50ml配制方法称量5gAmpicill置于50ml离心管中。加入40ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。用0.22mm过滤膜过滤除菌。小份分装（1ml份）后，-20°C保存。IPTG（24mg/ml）组份浓度24mg/mlIPTG配制量50ml配制方法称量1.2gIPTG置于50ml离心管中。加入40ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50ml。用0.22mm过滤膜过滤除菌。小份分装（1ml份）后，-20C保存。X-Gal（20mg/ml）组份浓度巴］W'mlX心i配制量心’川配制方法「称刊：UM丄干50Iill与［营白.巴加人诰0咄匸甲挂甲醛髏）.充分潑合溶隸民定睿荃閔m咗-111历「h.-20C避光保存。LB培养基组份浓度1恢〔VVW]Tryptone,0.5%(VWMYeastExtraot.1%(W/V)NaC配制量配制方法仁称耽配制方法仁称耽F列试剂.置于iL燼杯忆10S5fl10S5fl1QgTiyptoneYeastExtractN^CIN脚入約8曲即的去离子离充分搅拌瀋解“生滴加于NNaOH（酌gml）.谟竽口H備產匸仇4』口去藉子水将培驟基定客產1L4LB/Amp培养基组份浓度1%Tryp-loneG.5%(W/V)VeastExtract(W/V)0.1mg/mlAmpicillin配制量1L配制方法称取下列试剂，置于1L烧杯中。Trypi^neYe-a^tEidractNaCI加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。滴加5NNaOH(约0.2m3)，调节pH值至7.0。加去离子水将培养基定容至1L。高温高压灭菌后，冷却至室温。加入1mlAmpicill(in100mg/ml)后均匀混合。4C保存。TB培养基组份浓度1.2%(W^V)Tiyptone2,4%(W'V).0.4%[V/V)Gi/cercl17mMKH沪672mMKiHPQj配制量1L配制方法配制磷酸盐缓冲液(0.17MKH2PO4，0.72MK2HPO4)100ml。溶解2.31gKH2P04和12.54gK2HP04于90ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100ml，高温高压灭菌。称取下列试剂，置于1L烧杯中。TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"Trypt-one 12g¥&astExtraci 24gGlycerol 4 ml加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。5•待溶液冷却至60°C以下时，加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。4C保存。TB/Amp培养基组份浓度1.2%(W/V)Tiyptone2A%(W.V)VeasflExtnact0.4-%(V/V)Gij/earcl17mWKH2PO172mMKzHPS0.1mg-FTilAmpicillin配制量1L配制方法门匣制磷醸盐线科購(0J7MKH3P0-r0,72K?HPOi)100mL鸿俯萌1gKHB6和iZS4E心HPQ疔毗ml的去离子水中，遽锌港躺民M去醫子水定穽至1QDml,SgjgJE灭菌“2•称取下列试畫于1L燈杯中尸TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"Tryptcne 12g\o"CurrentDocument"YeastExtracl 24gGlycerol 4 mlN加入約呂00帕的去离子7^充分税押解解-4.捌去藹子水将塔养L后.窩温商殛兎蔺"5特谗師睚60工以下时，拥入1仙曲的上谨天蘭勰耀®申璇和酣的鬧酬1川00恤)”&均匀谯含丘车亡像弹‘！SOB培养基组份浓度2%(W；V)Tryptone05%(W/V)VeastEMtudI0.05%(W.'V)NaGI2.5iriMKCI10mMMgGls配制量1L配制方法配制250mMKC1溶液。在90ml的去离子水中溶解1.86gKC1后，定容至100ml。配制2MMgC12溶液。在90ml去离子水中溶解19gMgC12后'定容至100ml，咼温咼压灭菌。

20g阴0.5g称取下列试剂，置于20g阴0.5gTryptoneYeastExtrasMaCI加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。量取10ml250mMKCl溶液，加入到烧杯中。滴加5NNaOH溶液(约0.2ml)，调节pH值至7.0。加入去离子水将培养基定容至1L。&高温高压灭菌后，4C保存。9.使用前加入5ml灭菌的2MMgCl2溶液。SOC培养基组份浓度2%(W；V)Tryplone0.5%(WV)YeastExtract0.05%{W/V}NaCI2.5E训KGI10nnMMgCL20mM配制量100ml配制方法配制1M葡萄糖溶液。将18g葡萄糖溶于90ml去离子水中，充分溶解后定容至100ml,用0.22mm滤膜过滤除菌。向100mlSOB培养基中加入除菌的1M葡萄糖溶液2ml，均匀混合。4€保存。2XYT培养基组份浓度 I (■i.'u；'VI~[y-[it：-)rr.I'1r.:WV]i=st匚Mi勺e：t.i.'J..5''r.: )N.iiJTOC\o"1-5"\h\z配制量 'ih配制方法 1祢戊下列试刊、日干1丨圧屎中. Tiyptone 15g\o"CurrentDocument"YeastExtract 1□gNaCI 5g£加入豹塔Em的去离子也充營搅拌落勲3,M5NWaQHr阖唱活H值垂了.屯心抑去厲子水檢培养匯定睿蚤1匚£雋谒廊压灭蕃府‘4C^<Pbxbroth组份浓度 I ('A'■'Vily{it：-)rr.T'r.:WV] i=洛匚Mi勺e：t.U.5''r.: )N.iiJTOC\o"1-5"\h\z配制量 'L配制方法 1.称决下列菽宇匚廿干J丨.丘砧中一 Tiyptone 16gYeastExtract 1□gNaCI 5gZ捕入約MJ恻的去离子殂充分搅拌藩桃£滴期5NWaQHr调节田值垂了G心抑去离子赤将培歸墓定容封L.NZCYM培养基组份浓度0.5%(W.V)Yeas!Extract0.1%(W/V)C-asaminoAcid1%(W.-V)NZ^5%(W/V)N^CI0.2%(W/V)MgSOj•7HiO配制量1L配制方法1.称取下列试剂，置于1L烧杯中。YeastExtraclsgCas-anninQAcidNZ^lOgNaCIMgSQa-7HaO2g加入约800ml的去离子水，充分搅