橄榄对睾丸炎睾丸组织结构及血清抑制素b和气泡刺激素含量的影响

橄榄对睾丸炎睾丸组织结构及血清抑制素b和气泡刺激素含量的影响

近年来，无育症已成为世界医学和社会问题。大约2.10%的男性和女性都是由免疫因素引起的。自身免疫性睾丸炎已成为男性免疫性不育的主要原因。隐睾、外伤、腮腺炎病毒感染、输精管结扎或切除都可引起免疫性睾丸炎。睾丸炎中产生的抗精子抗体、引起的血供不足、激活的炎症细胞等因素都可以诱导血-睾屏障破坏,影响生精细胞的分化活性,进而影响男性生育功能。以往的研究主要集中在检测卵泡刺激素和睾酮,近年来主要集中在抑制素B(INHB)上,INHB是由睾丸支持细胞分泌的一种糖化蛋白,能够直接反映睾丸的精子发生,还可以反馈性的调节卵泡刺激素(FSH)分泌。因此本实验采用FSH和INHB来作为检测指标。橄榄油是橄榄核果的榨取物被誉为“液体黄金”。橄榄油的人体吸收率达93.4%,对人体具有多种保健功效。它的药用价值早在公元前460～370年就被Galen、Hippocrates等古希腊名医师所认识。本研究通过观察橄榄油对自身免疫性睾丸炎的睾丸生精细胞和支持细胞的影响,来探讨橄榄油对自身免疫性睾丸炎是否具有一定的治疗作用。1材料和方法1.1实验动物g健康成年BALB/c雄性小鼠30只,体重(20±2)g,由新疆医科大学实验动物中心提供。适应性饲养1周,自由摄食和饮水。按随机化原则将小鼠分为3组,每组10只(正常对照组、模型组和橄榄油组)。1.2试验剂及仪器抑制素B试剂盒(美国ADL公司),卵泡刺激素试剂盒(美国ADL公司),橄榄油(意大利),Leica切片机(德国,型号RM2235),奥地利Anthos2010酶标仪。1.3小鼠灌胃法细化在造模前3天开始灌胃,正常对照组小鼠和模型组小鼠给予生理盐水灌胃,橄榄油组小鼠给予橄榄油灌胃,各组小鼠灌胃量0.5ml/d。然后参照文献造模,10%冰醋酸注射0.03ml注射一侧睾丸。连续灌胃24d。然后快速脱臼处死动物,取睾丸和血液进行检测。1.4睾丸的固定造模3周后,取材检测。血浆保存于-80℃,睾丸用10%甲醛固定。比较各组睾丸系数(睾丸质量/体质量),常规HE染色观察每组动物睾丸组织结构变化,ELISA法检测FSH和INHB。1.5统计分析方法采用SPSS16.0统计软件进行分析,统计描述采用均数±标准差(ˉx±s)表示,采用单因素方差分析,样本两两比较使用SNK法,检验水准α=0.05。2结果2.1两组血清inhb、infb水平的比较肉眼观正常对照组睾丸体积正常、色泽红润、质地饱满。模型组手术侧睾丸萎缩,外观色白,质软。橄榄油组睾丸外观接近正常。橄榄油组的睾丸系数与模型组相比明显增大,差异具有统计学意义(P<0.05)。模型组血清INHB水平低于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。而橄榄油组INHB则是明显高于模型组的,但低于生理盐水组,差异也具有统计学意义(P<0.05)。橄榄油组血清FSH低于模型组,而又高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表1。2.2睾丸生精特性分析正常对照组睾丸生精小管分布均匀,间质无水肿、渗出,可见少量间质细胞,核大而圆,偏位,各级生精细胞排列有序,管腔中可见大量精子(图A)。模型组可见睾丸生精上皮坏死、脱落、生精小管管腔变大,管壁变薄,有成片均质红染物质,生精小管基膜上只见肌样上皮细胞,部分生精小管仅见支持细胞及精原细胞。可见巨大核细胞,睾丸间质水肿,可见淋巴细胞和巨噬细胞浸润(图B)。橄榄油组生精小管内可见生精细胞,睾丸间质水肿不明显(图C)。3粉包中酚类化合物对自身免疫睾丸炎的预防作用本实验得出橄榄油对自身免疫性睾丸炎具有一定的拮抗作用。橄榄油富含脂溶性VA、VD、VE、VK及多种微量元素等天然营养物质,其中VK含量高达8mg/100g,角鲨烯含量高达60～70mg/100g,β-谷甾醇含量高达200～250mg/100g。由于这些物质可以提高免疫细胞活性,增强免疫功能,清除人体内自由基,促进新陈代谢。因此,对于提高人体的抗病能力有不可忽视的功能。维生素E是众所周知的抗氧化剂,橄榄油富含大量VE以及其他多种抗氧化剂,能有效地减少自由基对细胞膜、蛋白质、油脂、RNA和DNA的攻击和损伤,尤其是对DNA线粒体的诱发性攻击,从而起到对疾病的预防作用。橄榄油中所含的酚类化合物具有抗氧化、抗炎和抗凝的特性,其微量组分在人体中具有生物活性并已显示出抗氧化和改善内皮细胞功能的效果。这些具有改善微循环功能的作用,在Ruano的实验中曾得以证明。因为本实验模型在3周时损伤最严重,故本次实验只采取了3周这个点。抑制素B是由睾丸支持细胞分泌的,在释放入血后可以反馈性的抑制垂体分泌卵泡刺激素。因此,抑制素B的变化能准确反映睾丸支持细胞及生精细胞的状态。本次实验橄榄油组的抑制素B和卵泡刺激素的含量与模型组和正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。证明橄榄油对自身免疫性睾丸炎具有一定的预防保护作用。据此推测橄榄油抗小鼠自身免疫性睾丸炎的机制可能为:(1)抗氧化作用,橄榄油富含的一元不饱和脂肪酸以及维生素E、多酚物质、鲨烯等多种抗氧化物质,能有效地减少自由基对细胞膜、蛋白质、油脂、RNA和DNA的攻击和损伤,尤其是对DNA线粒体的诱发性攻击,这些可能是橄榄油对生精小管内环境的影响。(2)抗炎作用,橄榄油中含oleocanthal,其可抑制炎症通路中的酶,与非类固醇抗炎药布洛芬引起的感觉相同,oleocanthal作为一种天然的抗炎化合物起作用,其特性与布洛芬有着惊人地相似。这自然对睾丸炎的发生也具有一定的拮抗作用。(3)改善微循环作用,于长青等人实验证实了富含酚类物质的橄榄油可改善微循环功能。橄榄油组的小鼠在吸收橄榄油后毛细血管扩张,改善血流,使睾丸血流供应充足,再与抗炎等一系列作用结合,可能也是降低睾丸炎产生的重要机制。(4)提高细胞免疫活性,使用橄榄油的小鼠细胞的免疫活性大大提