利乐无菌试验

无菌实验操作指南(仅供内部参考)注意:无菌实验安排在试产良好及档案统计完善的基础上进行.

目录TOC\o"1-3"1.定义 42.无菌实验的准备 4(1).生产加工区与灌装区的清洗 4(2).超高温(UHT)杀菌设备与灌装机的清洗检查 43.无菌实验合同的拟定 GOTOBUTTON_Toc5(1).双方职责 6(2).费用 6(3).时间安排 5(4).产品 5(5).辅助用品阐明 54.无菌实验操作环节 PAGEREF7(1).评定原则 7(2).操作参数与原料质量 7(3).中间产品质量规定 7(4).取样办法 6(5).无菌实验次数及取样量 8(6).评定办法 9(7).坏包样品的定义 9(8).无菌实验统计 7(9).工厂接受原则 7(10).低于接受原则成果的解决 7附录1.灌装间规定 8附录2.生产用水与锅炉用水质量规定 9附录3.灌装机用双氧水质量规定 10附录4.不同的AQL与可信度下的取样阐明 11附录5.灌装机统计表 12附录6.无菌实验统计表 13附录7.无菌实验合格证书 14注意:下列无菌实验必须最少有一位利乐包装(中国)有限公司的代表参加进行。1.定义调试即在销售公司的主持下,对设备进行初步运转,以确保设备满足基本的设计意图并可投入商业运作。设备合用于被考核的设备,如单个机器,部分生产线或整条生产线。阐明:设备由顾客界定。性能指标特殊的功用性参数,表明设备抱负的运转水平;有时已包含于利乐包装与客户间的合同及有关条款中。工厂符合销售公司性能指标所规定的一条或几条生产线,甚至涉及厂房。销售公司向买方提供设备(销售或租赁)或服务的,有关的利乐包装或利乐拉伐销售公司。买方设备买方或租赁方,或同时按交易条款申请技术服务的一方。灌装机能提供纸盒成型,液态产品灌注(无菌或非无菌状态)以及进一步将其密闭的设备。无菌实验一系列检测程序与条款,用以确认设备已达成商业无菌生产原则。无菌实验安排在设备调试完毕及设备投入商业生产之迈进行。2.无菌实验前的准备(1).生产加工区与灌装区的清洗生产加工区及灌装区：从地面到天花板作彻底清洗,并进行空气降贯彻验以检查无菌灌装间卫生状况(附录1中列出了灌装间的基本规定及空气降贯彻验办法)。(2).超高温(UHT)杀菌设备与灌装机的清洗检查在无菌实验之前,进行两次完整的CIP。第一次CIP重要是针对系统内化学残留物质检查,具体办法是:在最后15分钟的CIP清水冲洗阶段,每隔2分钟进行一次电导率测试(电导率测定仪量程为0~105?s/cm?1.5%);最后取样时间应尽量靠近冲洗循环结束阶段。另外,在CIP后,还需检查某些核心点处(如管道末端/弯管及保温段)与否有沉淀物。检查结束后,进行第二次CIP。3.无菌实验合同无菌实验安排在试产完毕后进行。无菌实验用于考核整条生产线能否有效生产商业无菌产品。无菌实验由商家,加工设备/包装机及其它生产设备供应商共同参加进行。在无菌实验之前,利乐包装(中国)有限公司与客户之间应达成统一合同并根据执行。(1).双方职责订立最后合同之前,应就双方职责达成合同;在评定过程中,双方各委派一名代表解决有关的事务。各方代表应妥善解决所产生的分歧,若临时未达成统一意见的,应向双方更高层人员报告以协调解决。每次无菌实验成果以书面合同形式记载,并颁发合同设备“无菌实验”合格证书(见附录7),合格证书应在评定结束后两天内,经双方代表签字后颁发,证书一式四份,双方各留两份。合格证书的签发,表明客户正式接受合同设备,并因此独立承当设备的保养、安全、操作及维修工作。合格证书签发之前,设备的操作使用权由利乐包装(中国)有限公司全部。若客户将设备投入商业运作,合同设备被视为自动交接!设备中所存在的,不影响基本操作功用的外观缺点及故障,将不影响合格证书签发,但利乐包装(中国)有限公司应加以备注阐明，并立刻予以补救;倘若，由于客户的因素使机器达不到应有的性能，利乐包装(中国)有限公司将向客户提出改善方案，在这种状况下，客户应签收合格证书。(2).费用无菌实验过程中,技术工程服务费用由利乐包装(中国)有限公司承当;其它由客户承当,涉及(不仅限于)原材料、包材，生产辅助供应如水、电、气及压缩空气、实验设施、人员配备等。(3).时间安排无菌实验时间应在最后合同订立前,由双方共同拟定。利乐包装(中国)有限公司将提前告知客户无菌实验时间,时间一经拟定,双方务必恪守。普通无菌实验安排在设备调试成功后15天内进行;无菌实验所需的一切条件应在评定前准备就绪;无菌实验应在20天内完毕。如果无菌实验失败，则对应增加天数。(4).产品液态产品能够分成高酸产品(pH<4.5)和低酸产品(pH?4.5)两类;为了确保产品商业无菌,用于无菌实验的产品应与商业销售产品一致;如果同一生产线将生产高酸与低酸两类产品,无菌实验时优先使用低酸产品。(5).辅助用品阐明生产用水与锅炉用水质量规定见附录2。双氧水质量规定见附录3。4.无菌实验操作环节无菌实验只合用于整条生产线检查,不合用于生产线局部检查;当在无菌实验原则上达成统一合同后,不仅要注意设备操作及整体安装的环境卫生,并且要注意原料(配方组份)与半成品的微生物质量,由于这将影响所获得的成果。无菌实验评定应由利乐包装(中国)有限公司与客户按下列内容共同协商进行:(1).评定原则无菌实验原则普通用质量接受水平AQL表达,又称为最大可接受坏包率。需要强调的是坏包率不可能为0,AQL是食品生产商的一项总体质量方针,应当由客户自己拟定。文中所列条件基于AQL1:1000,文末附录4列出了其它AQL值及有关规定。不管所制订的AQL值是多少,应注意:坏包率与可信度亲密有关,坏包率只表达在某段时间内,特定的现存条件下,所达成的成果，与该生产线在其它时段、其它条件下所获得的成果没有可比性。(2).操作参数与原料质量对于生产操作参数(如灭菌温度)及原料质量阐明,无法给出统一规定,由于各公司设计及安装形式各不相似;但对于具体状况,应达成统一合同。(3).中间产品质量规定从微生物角度看,不管生产何类产品,要使最后产品AQL达成1:1000,其进入超高温灭菌机(UHT)之前的半成品应满足下列规定。芽孢总数(cfu/ml) 100耐热芽孢计数(cfu/ml) 10(4).取样办法无菌实验阶段,采用随机取样；同时应进行目的性取样以用于故障排除；在评定无菌实验成果时,应剔除目的性取样。不同状况下的目的性取样及其取样数量(推荐使用):取样 取样数量生产开始 5包替代包材连接前后 2+2包纵封贴条发生变化前后 2+2包灌装机停机 2包生产结束 5包(5).无菌实验次数及取样量在即将开始无菌实验之前,应就无菌实验等级与客户达成合同。普通推荐，每台灌装机在投入商业生产前,进行三次无菌实验;最先两次无菌实验安排在持续前两天完毕,停车一天后,第四天进行第三次无菌实验。每次试车后,安排一次完整的CIP,第三次试车前需增加一次CIP。若在杀菌机与灌装机之间装有无菌罐，如果50%的产品直接从灭菌机进入灌装机，而另外50%产品灭菌后进入无菌罐，储存5小时后供进一步无菌实验使用，并且无菌罐的密封性及有关功效达不到规定,则其生产产品的坏包率将远高于前者。每次无菌实验使用的产品类型、等级、灌注体积及装配应统一;生产应安排在类似的时段及在同样的生产条件下进行。当AQL为1:1000，可信度为90%时,取样数量为2300包。注意:如果用于无菌实验的灌装机与其它灌装机安装在同一生产线上,则全部灌装机产品阀的蒸汽屏障应处在工作状态。(6).评定办法全部的样品应随机获得,低酸产品在30~35?C下保温7天,而高酸产品在20-25?C下保温10天,此后进行下列评定:检查全部外包装,如胀包或其它感官缺点对全部样品进行pH测定(除高酸产品外,pH计精度应达成0.01)对全部样品进行感官检查测定(涉及色质/气味/分层/结块等)(7).坏包样品的定义产生下列情形的样品,可视为微生物不合格可疑样品：保温实验后，样品的盼望pH值下降0.2(或以上)，样品的风味或口感发生变化,以及产生胀包及外观缺点。为了确承认疑样品与否为微生物不合格,需进一步进行微生物检查(如划线实验)与包装密闭性测定；对于划线实验,菌落数不大于等于3个的,可无视不计。污染菌的鉴别应当场进行。机械损伤样品不计入坏包数量。(8).无菌实验统计无菌实验统计应在生产条件下进行,涉及使用对数方格表及曲线图进行统计;将全部的机器设定统计下来(灌装机统计表见附录5)。全部样品应准时间编号,认真统计保温实验成果,报告格式见附录6。(9).工厂接受原则无菌实验工厂接受原则由客户拟定,重要为AQL与可信度。若规定AQL1:1000/可信度90%,三次保温实验的总坏包数量为3包。(附录4表2中列出了其它有关的AQL值/可信度及接受原则)(10).低于接受原则成果的解决在保温实验之前,应就对低于接受原则的成果解决程序,与客户达成统一意见。当三次保温实验总坏包量超出3包时,应对整条生产线进行研究分析,并重复三次保温实验,直达成标为止。

附录1灌装间规定原则号: 01颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1物理指标空气流速 0.2-0.3m/s正压值 2-4mmH2O温度 15-30?C湿度 30-70%换气频率 10-15次/小时注意:灌装间应保持温湿度恒定。卫生条件空气降贯彻验菌落计数不超出30个。

空气降贯彻验办法:将营养琼脂倒入直径9cm并通过灭菌解决的培养皿中,放入灌装间,打开培养皿暴露15分钟；而后,放入35?2?C恒温箱内保温两天,取出计数。如果菌落计数成果不不大于30个,表明灌装间需要彻底清洗,并需要进行特殊解决如改善空气过滤系统,用紫外灯或乳酸消毒灌装间。

附录2生产用水与锅炉用水质量规定原则号: 02颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1理化指标沉淀物,mg/L 无混浊度 无 气味 无口味 无色度 ?10干物质,mg/L ?500高锰酸钾消耗,mg/L ?10钙镁含量,mg/L ?100硬度(碳酸钙计,mg/L) ?100 铁,mg/L ?0.1锰,mg/L ?0.05铜,mg/L 0铝,mg/L ?0.1锌,mg/L 0重碳酸盐,mg/L ?80氯化物,mg/L -氰化物,mg/L 1有毒物质 无pH 7-8.5 微生物指标总菌数,cfu/ml <100大肠杆菌,cfu/100ml 0凝胶细菌,cfu/ml 0

附录3灌装机用双氧水(H2O2)质量规定原则号: 03颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1化学名 H2O2质量规定 无菌级或食品级浓度 35%-40%(重量比)外观 清晰无色的液体磷酸盐 <100ppm磷 <35ppm 氯(Cl) <1ml/l砷(As) <1mg/l铅(Pb) <1mg/l铁(Fe) <0.1mg/l铜(Cu) <1mg/l重金属如铅 <10mg/l105oC时不挥发物 <500mg/lpH 2-4

附录4不同的AQL与可信度下的取样阐明原则号: 04颁布日期: 版号: 01页数: 1表1.可信度,取样量与AQL之间的关系(每次实验有1个坏包)可信度(%)AQL取样量999080706050(1:1000)4600230017001400950740(1:)940048003400280019001480(1:3000)1410072005100420028502220(1:4000)1880096006800560038002960(1:5000)2350018500700047503700(1:6000)282001440010200840057004440(1:7000)329001680011900980066505180(1:8000)3760019200136001120076005920(1:9000)4230021600153001260085506660(1:10000)4600023000170001400095007400表2.不同可信度下,评定合格的生产线坏包数量可信度(%)999080每次实验取样量(1:1000)4600680010000230040005400170031004400每次实验取样量(1:5000)23500340005000010270008500165002每次实验取样量(1:10000)4600068000100000230004000054000170003100044000三次实验坏包总量369369369表3.半成品微生物指标AQL指标项目1:10001:1:30001:40001:50001:60001:70001:80001:90001:10000TSC100503025201614121110TRSC10532211111TSC:芽孢总数,cfu/mlTRSC:耐热芽孢计数,cfu/ml

附录5超高温灭菌机统计表原则号: 05颁布日期: 版号: 01页数: 2 日期:产品名:容积:试车开始/结束时间:时间项目实测值产品温度(?C)平衡罐脱气前均质前均质后预热保持(如90?C)灭菌保持(如137?C)灌装介质(水)温度(?C)热水蒸汽喷射前蒸汽喷射后加热后温度预热段冷却后压力(bar)脱气前压力真空度均质前灭菌保持段(137?C)灌装压力蒸汽喷射后蒸汽调节阀前均质压力其它热水流量(L/H)产品流量(L/H)产品回流量(L/H)均质机转速(Hz)CIP执行状况CIP流量(L/H)碱液浓度(%)酸液浓度(%)停机统计停机代码停机时间开机时间停机因素

附录6灌装机统计表原则号: 06颁布日期: 版号: 01页数: 1 日期:产品名:容积:试车开始/结束时间:进入车间包材量:合格包材量:时间项目实测值双氧水浓度双氧水液位双氧水加热水液位蒸汽温度预杀菌温度双氧水温度“气刀”温度杀菌空气温度夹爪冷却水流量纵封温度贴条附贴温度纵封状况贴条附贴状况横封状况易拉贴密封电导率检查*染色检查*体积(重量)包装外形CIP执行状况注：“*”为选项停机统计停机代码停机时间开机时间停机因素剔除产品数量

附录7无菌实验统计表原则号: 07颁布日期: 1/9/98版号: 01页数: 1第一次无菌实验样品数量包装外观产品色质与气味产品构造pH第二次无菌实验样品数量包装外观产品色质与气味产品构造pH第三次无菌实验样品数量包装外观产品色质与气味产品构造pH

附录8ACCERTANCECERTIFICATEFORLINEPERFORMANCEEVULATIONProjectand/orcontract:Purchaser:Seller:SectionsofPlant(ifapplicable)DescriptionofthePerformanceEvaluation:Test/InspectionPeriod:StartDate:Completiondate:PurchaserandSelleragreethatthePlantorabov