丙型肝炎病毒实验活动风险评估报告

丙型肝炎病毒实验活动风险评定报告一、生物学特性（一）种类和病毒分型丙型肝炎病毒（HepatitisCvirus，HCV）引发的丙型肝炎曾被称为肠道外传输的非甲非乙型肝炎（PT-NANB）。病毒颗粒呈球形，有包膜，直径约55~65nm。基因组为单正链线状RNA，长度约为。基因组由5'端非编码区（5'UTR）、编码区和3'端非编码区（3'UTR）构成。5'端非编码区是HCV基因组中最保守的序列，是设计诊疗用PCR引用的首选部位。编码区仅含一种长的开放阅读框（ORF），编码一种大分子的多聚蛋白前体。该前体蛋白在病毒蛋白酶和宿主信号肽酶的作用下切割产生病毒的构造蛋白和非构造蛋白。病毒的构造蛋白涉及核心蛋白C和包膜蛋白E1、E2。非构造蛋白涉及NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a和NS5b。对于3'端非编码区的功效尚不清晰，可能与病毒复制有一定关系。根据HCVNS5区基因序列的同源性，可将HCV分为6个基因型，11个亚型，即1a、1b、1c、2a、2b、2c、3a、3b、4a、5a、6a。其中，欧美流行株多为1a、1b、2a、2b和3a；中东地区以4a为主；亚洲涉及我国以1b、2a和2b亚型较为多见。（二）来源1989年，美国学者Choo等应用了分子克隆技术在实验室感染PT-NANB的黑猩猩血浆中初次获得了病毒的cDNA克隆，测定了约70%的HCV基因序列，并运用这些基因体现的蛋白质为抗原，检测到PT-NANB病人血清中的特异性抗体。此后，又获得了来自PT-NANB患者血清的病毒全基因组序列，从而拟定了PT-NANB的病原体，并将命名为丙型肝炎病毒。1991年，国际命名委员会将其归类为黄病毒科丙型肝炎病毒属。（三）传染源重要传染源为急、慢性患者和无症状HCV携带者。慢性患者和病毒携带者有更重要的传染源意义。（四）传输途径传输途径重要为输血及血制品传输。另外，亦可通过非输血隐性途径的微小创伤、性接触、家庭亲密接触及母婴接触进行传输。（五）易感性人群对HCV普遍易感染，同性恋、静脉注射者及接受血液透析的患者为高危人群。（六）潜伏期急性感染丙型肝炎病毒1~3周，在外周血可检测到HCVRNA。普通，潜伏期为2~26周，平均50d；输血感染者的潜伏期较短，约为7~33d，平均19d。出现临床症状时，仅50%~70%患者的抗―HCV阳性，3个月后约90%患者的抗―HCV阳转。（七）剂量一效应关系现在，尚未见有HCV对人体精确感染剂量的报道。HCV的感染重要与暴露途径和感染方式亲密有关。（八）致病性HCV感染引发的临床过程轻重不一，可体现为急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带。HCV感染极易慢性化，40%~50%的丙肝患者的可转变成慢性肝炎，部分可发展成肝硬化肝癌。肝癌患者血中抗―HCV阳性率高。现在认为，HCV的致病机制与病毒的直接致病作用和免疫病理损伤有关。实验证明，丙型肝炎患者血清HCV-RNA的含量与血清丙氨酸转移酶的水平呈正有关，提示HCV的复制与肝细胞损伤有关，病毒在复制过程中可能直接损伤肝细胞。异常的细胞免疫反映是HCV另一重要的致病机制。HCV感染后不能诱导有效的免疫保护反映。实验感染的黑猩猩恢复后，在用同一种病毒株攻击黑猩猩，黑猩猩几乎无力保护。（九）变异性HCV的构造蛋白涉及核心蛋白C和胞膜蛋白E1及E2。其中，胞膜蛋白E1和E2是两种高度糖基化的蛋白。编码这两种蛋白的基因含有高度变异性，造成胞膜蛋白的抗原性发生快速变异。这种变异引发的免疫逃逸作用是病毒在体内持续存在而感染易于慢性化的重要因素，也是HCV疫苗研制的一大障碍。（十）环境中的稳定性HCV对理化因素抵抗力不强，对氯仿、甲醛、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂敏感，加热100℃5min、紫外线照射、甲醛（1：6000）、20%次氯酸等均可使之灭活。血液或血制品经60℃解决30h可使HCV的传染性消失。（十一）药品敏感性对丙型肝炎尚缺少特效药，已证明IFN-α对早期HCV有较高效率。现在，HCV感染的首选治疗方案是IFN-α和利巴韦林（RBV）联合治疗。（十二）消毒剂敏感性HCV对氯仿、甲醛、乙醚、三氯甲烷等有机溶剂敏感，甲醛（1：6000）、20%次氯酸等也均可使之灭活。（十三）物理灭活HCV对理化因素抵抗力不强，加热100℃5min、紫外线照射等均可使之灭活。血液或血制品经60℃解决30h后，HCV的传染性消失。（十四）在宿主体外存活普通，病毒离开宿主会在很短时间内死亡。HCV也是如此，普通在10min左右就会死亡。（十五）与其它生物和环境的交互作用国内外研究已证明丙型肝炎和乙型肝炎是肝癌的重要病因。国外资料的Meta分析成果显示HCV感染对肝癌的危险比值比（OR）达，并且与HCV的混合感染体现出协同作用。HCV在外环境中较易死亡，但在血液或血制品中易于成活。（十六）防止和治疗方案⒈防止方法我国已规定，必须对献血员进行抗―HCV检测，以减少HCV的感染和传输。对血制品亦需进行HCV检测以防污染。⒉治疗方法由于HCV免疫原性不强，且毒株易于变异，因此疫苗的研制较为困难。现在尚无疫苗用于特异性防止。对丙型肝炎尚缺少特效药，已证明IFN-α对早期HCV有较高效率。现在HCV感染的首选治疗方案是IFN-α和利巴韦林（RBV）联合治疗。二、实验室有关活动风险评定与控制（一）实验室感染性因子的种类、来源和危害⒈感染性因子的种类本实验室可能的感染因子为HCV本身。⒉感染性因子的来源⑴用于HCV―抗体检测的血液样本。⑵样本采集与检测过程中涉及的全部实验场合。⑶实验室操作中可能产生的含病毒的气溶胶。⒊感染性因子可能造成的危害⑴被污染的实验器材、器皿等对实验室环境造成污染。⑵实验室废弃物对环境造成污染。⑶实验人员暴露后感染。⑷实验室含病毒的气溶胶实验室环境造成污染。（二）实验室常规活动过程中的风险评定与控制⒈实验办法⑴风险点识别若采用国标、行业原则之外的其它未经拟定的实验办法，或在使用国标、行业原则之前未进行技术确认，操作时可能存在安全风险。⑵风险控制方法尽量采用国标、行业原则或通过充足验证的实验办法；在使用新的或变更过的国标、行业原则之前，必须通过严格的技术确认。⒉样本采集⑴所用器材一次性采血针、真空采血管、消毒棉签及一次性利器盒。⑵风险点识别①采血过程中若被急性或者慢性丙肝患者的血液污染的皮肤、黏膜，或者被含有HCV的血液污染了的针头刺破皮肤，则被感染的可能性很大。②血液标本溅洒可能造成人员或环境污染。⑶风险控制方法采血前做好个人防护，穿戴防护服、口罩、帽子、手套；抽血前检查针管的密闭性，用过的针头直接放入利器盒内，严禁用手直接接触使用后的针头或将使用后的针头重新套上针头套；采血管用真空抗凝管，采好血后直立于试管架中，避免倒翻；消毒棉签等污染物放入医疗废弃物专用袋中，统一进行消毒解决。⒊样本的包装和运输⑴所用器材真空采血管、95千帕样品运输罐、B类标本运输箱（UN3373冷藏箱）、运输车辆。⑵风险点识别若是用不合格包装进行运输、容器密封不严，则将不能安全有效的避免运输过程中包装容器意外破损，从而产生污染扩散的可能。⑶风险控制方法严格按照生物安全的规定，采用三层容器包装。第一层采用真空采血管装样本，应密闭防渗漏；95千帕样品运输罐，可容纳并保护第一层容器，密封不易破碎、耐压力房渗漏且易消毒；第三层采用B类标本运输箱，要容纳并保护、固定第二层容器，且易于消毒。样本应由中心专车运回实验室。⒋样本接受⑴风险点识别如果在运输途中意外发生样本破裂、血液溢漏，也可能对样本接受人员造成污染。⑵风险控制措样本直接送至实验室，由专业检查人员接受，接受样本前做好个人防护，穿戴防护服、帽子、口罩、双层乳胶手套。若有样本管意外破裂，则立刻在生物安全柜内将尚存留的样本移出，废弃物放入带盖的防刺破的塑料罐中，被污染的容器用20%次氯酸溶液等消毒液浸泡后再清洗。⒌样品检测⑴所用材料离心机、生物安全柜、移液器、洗机板及酶标仪等设备。⑵风险点识别①离心过程中离心管破裂造成离心机污染。②实验操作过程中血液样本溅洒，从而造成人员或台面、地面等环境污染。③洗板、读板时液体溅出从而污染设备表面或工作台面。⑶风险控制方法全部检测操作均在BSL-2实验室中进行，检测人员在实验前按照二级生物安全防护规定做好个人防护；加样移液操作在生物安全柜内进行，动作轻缓；判读成果时酶标板轻拿轻放，避免液体溅出；待实验完毕，先消毒手部，再脱去手套并立刻洗手；若故意外状况发生，应及时采用有效方法。①离心过程中离心管破裂应立刻关闭电源，让离心机停止工作，静止30min。然后缓慢打开离心机盖，将离心机平稳地拿到生物安全柜中。如果发生泄漏，则将配制好的1%的次氯酸钠消毒液灌入离心杯腔体中消毒30min，然后弃去消毒液和离心管碎片，将离心杯清洗后擦干。②样本溅洒污染设备表面可用24%次氯酸溶液或75%酒精擦拭消毒。③台面、地面及人员暴露于污染物的解决方法同“采样部分”。④在任何可能造成潜在的传染性物质溅出的操作过程中，应保护好面部、眼睛和嘴；发生液体溅出、溢出等事故，明显暴露于传染源时，应立刻向科室负责人报告，及时解决并对事故的发生与解决作统计，必要时进行适宜的医学评定、观察、治疗，保存书面统计。⒍阳性样本保存⑴所用器材生物安全柜、移液器、带螺旋盖的塑料管一种密封的塑料冻存盒。⑵风险点识别HCV阳性标本若保存不当，则易造成人员和环境污染。⑶风险控制方法按照二级生物安全防护规定做好个人防护；样本的保存在生物安全柜内，进行动作要轻缓；全部样本的血清或血浆都保存在带螺旋盖的塑料管内，在装入可密封的塑料冻存盒中，置于-20℃下列冰箱内保存，严格实施双人双锁管理。⒎实验室的清洁和消毒⑴风险点识别工作完毕后若不及时对工作台面、生物安全柜等进行消毒，则有可能会会造成实验室环境污染或人员感染。⑵风险控制方法工作完毕后，及时对检测所涉及的工作台面积地面用100倍稀释的施康清洗消毒液Ⅰ檫拭。用消毒液擦拭后要干燥20min以上；生物安全柜用70％~75%酒精擦拭消毒。待实验和消毒完毕，先脱去手套，再脱去防护服，并对的使用肥皂和流水洗手。⒏废弃物处置⑴所用器材医疗废弃物专用袋、硬质耐高压且防渗漏的垃圾桶、高压灭菌器。⑵风险点识别剩余的阳性标本很大的污染源，若采血过的针头解决不当，则存在人员被刺伤，甚至感染HCV的存在风险。⑶风险控制方法实验过程中产生的全部感染性废弃物，涉及不再需要的剩余样本、酶标反映板、移液头等全部实验过程涉及的用品，需置于装有医疗废弃物专用袋的硬质耐高温且防渗漏的垃圾桶中，经121℃高压灭菌15~20min后才可运出实验室；针头、破碎玻璃等损伤性废弃物必须放入利器盒，利器盒严禁再次打开。装满针头等利器的一次性利器盒严禁再次打开，须密封好后，同上述垃圾一起解决。全部解决完毕的废弃物集中寄存，由有资质的医疗废弃物解决单位上门收集、集中解决。同时，做好交易统计，全部有关统计定时整顿归档。（三）实验室常规活动中其它风险评定与防止控制方法⒈电力⑴风险点识别若实验室没有布置双路供电，或电力供电不稳定，存在实验活动忽然中断、实验设备停止工作等所带来的有关安全风险。⑵防止控制方法实验室尽量要布置双路供电，没有布置双路供电的应配备备用电源，以确保高压灭菌器、生物安全柜等重要设备的安全运行。⒉电气操作⑴风险点识别实验室活动涉及的电气操作，涉及实验室工作区内电气设备的启动、关闭、安装和维修；设备层内UPS、空调机组等电气设备的启动、关闭和维修等。这些电气操作的过程可能产生触电、电击、电气故障等风险。⑵防止控制方法①电气设备的设计及制造符合有关的安全原则的规定。实验室工作区内若有380V电源插座，则需明确标记，并由有资质的人进行专业操作。②新的、改装过的或修理过的电气设备在未经专业人员（如有资质的电工）完毕电气安全测试和设备符合规定安全使用规定之前，不允许使用。③电气设备使用人员接受对的操作的培训，操作方式不减少电气安全性。电气设备使用人员要定时检测设备可能引发电气故障的破损。只有专业人员才可从事电气设备和电路工作。严禁未经授权的工作。④采用方法对设备去污染，以减少维护人员感染的风险。⒊实验室给排水设施设备⑴风险点识别实验室含有给排水的设施设备，涉及位于工作区和洗消区的高压灭菌器和洗涤池。当管道意外破裂、排水管道阻塞时，感染性材料可能溢出，有污染实验人员和环境污染的风险。⑵防止控制方法实验室所产生的全部染菌物及器具，必须先经高压灭菌或含氯消毒剂浸泡消毒后洗涤，产生的污水集中排入中心污水池进行消毒解决，严禁直接排放。最少每月监测粪大肠菌群，定时检查实验室给排水管道各接口的密封性，及时发现安全隐患。⒋实验室设施设备管道⑴风险点识别设施设备实验室设施设备管道穿越维护构造的部位可能存在密封不严的问题，当感染性材料溢出时，有污染环境的风险。⑵防止控制方法全部管道穿越维护构造的部位应严格密封，定时进行检查，避免感染性材料外溢从而污染环境。⒌重要检测仪器设备⑴离心机①风险识别点在分离血清的过程中，若没有做好平衡，则可能会发生离心管破裂、离心盖脱落、离心转子和离心腔被污染。②防止控制方法离心时配备耐离心压力的且带螺旋管盖的离心管，离心前做好平衡，选择对的的离心速度和离心力；规范对的操作，定时维护，确保离心机性能正常；每次使用后做好清洁消毒和使用统计，定时进行功效检查。⑵酶标仪和洗板机①风险点识别在使用酶标仪和洗机板的过程中，可能会发生阳性对照或在测样品污染设备表面个工作台面的风险。②防止控制方法酶标仪每年强检一次，半途再做一次期间核查；洗机板每年进行一次功效检查；在洗板、读板时，要做到动作轻缓，小心操作；倘若有液体溅出，要立刻进行消毒解决。⒍生物安全设施设备⑴生物安全柜①风险点识别若不按照安全柜操作规程进行操作、维护与检测，则其防护屏障效果会明显减少，甚至消失，失去安全防护效果；若长时间使用或未及时更换HEPA过滤膜，则会使其功效丧失，造成工作窗口气流速度减少或流向紊乱；使用后若不进行彻底消毒解决，对清洁、维护人员将会产生污染。②防止控制方法对的选配生物安全柜，操作人员应接受有关的操作、维护培训，日常操作和维护严格按照设备操作规程或使用阐明进行；每年请有资质的服务机构对生物安全柜进行风速、气流、尘埃粒子、紫外线强度等核心要素的检查，确保其性能正常。一旦造成污染，应及时进行消毒解决。⑵高压灭菌器①风险点识别若不按照高压灭菌器操作规程进行操作、维护，其效果会明显减少，甚至失效，失去污染与无害化的作用；若长时间使用又不定时做检测灭菌效果，则对其灭菌效果无从考证，可能产生功效缺损，存在灭菌不彻底从而引发污染的隐患；在长久关停期间，若内部水分不及时排干，则将会使内部器件老化从而失去正常功效。②防止控制方法采用下排式高压灭菌，避免气溶胶污染；规范操作，定时维护，确保高压灭菌器性能正常；定时检定、核查，做好使用统计，持证上岗；进行日常灭菌效果监测，以确保灭菌质量。⑶个人防护用品①风险点识别个人防护品若穿戴不规范、大小不适宜或使用过期的防护用品等，则将会造成防护效果减少，甚至失效。②防止控制方法进行HCV血清学有关操作时要按二级生物安全防护水平进行个人防护，必须选择大小适宜、有效的防护用品，穿戴时互相检查确认，避免使用有破损、缺点和过期的防护用品。⑷应急救治设施和用品①风险点识别实验室若没有配备洗眼器、应急药箱等必要的应急设施和物品，或配备的急救用品种类不全、不适合或过期，则造成急用时无法发挥作用。②防止控制方法在实验室内对的配备洗眼器,确保功效正常。配备的75%乙醇、碘附或其它消毒剂、创可贴等急救物品与实验活动相适应，并在使用期内使用，由专人负责管理，定时维护、清理和更新。⑸消毒灭菌剂①风险点识别消毒产品无生产许可证、过期、配制办法或浓度不对的、种类选择不合理，都将会造成消毒效果减少、生物灭活能力减少、对物品腐蚀性增加、对皮肤造成刺激等问题。②防止控制方法选择符合国标的正规厂家生产的产品，选择合理的消毒剂，按照规定的消毒办法、消毒时间、消毒浓度（剂量）进行消毒，避免使用过期产品；消毒过程中消毒人员应做好必要的个人防护，避免发生意外。根据HCV对不同的消毒剂的敏感性，本实验室选用施康消毒剂Ⅰ（重要成分为次氯酸钠）、碘附、75%酒精、漂白粉等作为惯用的消毒剂。⒎管理体系的风险⑴风险点识别管理体系（涉及应急预案）、程序文献、作业指导书和操作规程都是确保生物安全的重要因素。如果组织构造不健全、设立不合理、体系文献与实际工作不匹配，以及部门职责不清或衔接不当等，则都可能带来安全风险。⑵防止控制方法定时开展对管理体系的评审，发现问题及时修订、完善，以确保生物安全管理体系持续有效地运行。（四）工作人员的风险评定与防止控制方法⒈风险点识别⑴人员数量人员过少会因缺少互相提示或因工作量增大而造成操作过程中工作失误增加，风险增加。⑵人员构造及资质新进职工若没有高资历人员带教操作，则不能较好地解决意外事件，风险会增加。实验人员不熟悉实验检测办法及操作规范，在进行实验前未进行有关的专业知识培训，无法确保工作质量和安全。⑶职业操守若责任心不强的人员参加该项工作，则产生生物危害而危及人员安全、环境安全与社会安定的可能性较大。⑷健康管理健康状况重要涉及生理、心理素质与免疫状态。当身体出现腹泻等胃肠道症状、手部皮肤有开放性损伤或其它不适合工作的状况时，职业暴露风险会增加。⑸生物安全培训及应急事件解决能力工作人员上岗前没有接受严格的生物安全，以及有关生物安全设备操作的技术培训，易造成生物安全事故的发生。上岗后没有接受实验室突发事件解决的培训，一旦发生意外事件，就不能有效地进行早期解决和控制生物安全事件。⒉防止控制方法⑴人员数量尽量有2名工作人员同时进行采样、检测或有质量监督员对核心环节进行监督。⑵人员构造及资质实验室检测人员的年纪和资历构造应配备合理，新进人员应有高资历人员带教或监督操作。检测技术人员需通过上岗培训和在岗上持续培训。规定掌握有关专业知识和技能，能独立纯熟地操作，并经考核合格，持证上岗。⑶职业操守加强职业道德教育，培养工作责任心。⑷健康管理建立健康申报制度，遇有手部皮肤有开放性伤口及其它不适合工作的状况时，应及时向科室负责人报告并暂停工作；对于裸露皮肤的微小伤口、擦伤、皲裂等应用防水材料严密覆盖。⑸生物安全培训及应急事件解决能力检查人员必须接受上岗前培训和复训，每年参加本中心组织的生物安全知识或生物安全操作技术培训、考核。实验室工作人员必须严格按照《实验室意外事故和职业性疾病报告制度》和《病原微生物生物安全应急处置技术方案》中规定的规定进行应急事件的处置，强化职业暴露的应急解决能力，规范工作中职业暴露后现场急救解决方法。（五）实验室非常规活动中的风险评定与防止控制方法⒈实验室重要的非常规活动⑴检查外专业人员对实验室设施设备的维护、维修、检测验证（如重要设施设备的检测验证）和更换（如高效过滤器的更换）。⑵实验室后勤保障人员对实验室及公共环境的保洁、实验器材洗刷消毒。⑶外部人员来实验室参观及上级部门对实验室的检查。⑷任何其别人员需要进入实验室从事实验活动以外的行为（如发生火灾、水灾时消防人员、急救人员的进入。）⒉风险点识别⑴进入实验室可能会引发实验室感染，特别是不慎打翻、打破血管或损坏仪器部件状况下。⑵实验室运行过程中某些人员需要进入实验室参观，存在影响实验室正常运行的风险。⒊防止控制方法⑴实施人员准入、登记制度。外部人员来进行参观或检查前，应对实验室做彻底消毒；任何外来人员进入实验室时应有实验人员陪伴。⑵进入人员绝对不能私自动用实验室内有标志的危险品（除非通过授权），绝不能将未经消毒解决的物品拿出实验室区。⑶在实验室进行设施、设备维护维修过程中，若发生意外事件，应立刻报告实验室负责人。实验室负责人进行风险评定，并采用应对方法。⑷对实验室的设施、设备进行维护维修工作时动作轻柔，避免产愤怒溶胶。检测维修后、离开实验室前，必须洗手。（六）被误用和恶意使用的风险与防止控制方法⒈风险点识别若阳性标本未明确标记并未实施双人双锁管理，实验活动结束后不及时消毒操作场合，其它工作人员在不知情的状况下可能误用标本、实验材料和设施设备等，造成人员感染和实验室环境污染等。⒉防止控制方法⑴实施严格的人员准入和持证上岗制度。⑵因此获得同意进了实验室工作的人员，必须严格按规程操作实验材料和设施设备。⑶发生事故时必须及时报告并作必要的解决和统计。⑷实验所用材料和试剂等必须有明确的标记。⑸阳性标本严格实施双人双锁管理。（七）有关实验室以发生的事故分析和从中得到的启示我国有众多HCV感染者。因此，我国医务工作者有较高的HCV职业暴露危险性。据逄增昌等的报道，医务人员HCV感染率为%，卢国强等的研究成果也显示医务人员感染率为%。另有一项研究显示，与其它利器相比较，HCV更容易通过细孔针头传输，黏膜暴露于血液则极少传输HCV。实验室人员在进行采样、检测及废弃物解决等工作过程中，务必严格实验室有关规定，做好个人防护，规范采样、检测操作，减少和规避职业暴露风险。三、实验室理化因素风险评定及安全防护方法（一）紫外线⒈风险点识别生物安全柜及实验室均使用紫外线灯进行物体表面消毒。紫外线波长为250~280nm，重要影响眼睛和皮肤，可引发急性角膜炎和结膜炎、慢性白内障等眼部疾病，还可诱发皮肤癌。紫外线灯启动时人员在不知情的状况下进入可受到伤害。⒉安全防护方法在实验室工作应避免紫外线直接照射人体，特别是眼部。生物安全柜表面贴有紫外线危害的标记。在进行紫外线消毒时，实验人员尽量远离消毒区域，基本可规避紫外线对人体的危害。（二）辐射⒈风险点识别实验室筹建选址时未对周边辐射源进行排查，使用含辐射的仪器时未严格管理，存在辐射源或辐射事故间接造成病原微生物屏障系统破坏的隐患。⒉防止控制方法实验室在筹建选址时对周边建筑群可能存在的辐射源进行严格排查。（三）施康清洗消毒剂Ⅰ⒈风险点识别施康清洗消毒剂Ⅰ属于含氯消毒剂，有效氯的含量为%~%，次氯酸钠重要杀菌因子。含氯的消毒液会残留在空气中不挥发，长久使用会使人感到头疼、恶心。对于有过敏体质的人，还容易引发过敏、哮喘等疾病。高浓度的含氯消毒剂对人的呼吸道黏膜和皮肤有明显的刺激作用，可使人流泪、咳嗽，并刺激皮肤和黏膜，严重可发生氯气中毒。急性中毒的出现躁动、恶心、呕吐呼吸困难等症状，甚至因窒息而死。⒉安全防护方法按照使用阐明，根据消毒对象不同配制不同的浓度，避免使用不必要的高浓度的消毒液，稀释和使用时戴好手套，消毒后及时开窗通风，基本可规避消毒液对人体的危害。（四）其它⒈风险点识别实验室内的照明和声音（生物安全柜等）有可能因强光和噪声对人员造成损害。⒉安全防护方法对实验室的照明和声音等参数进行检测，确保合格，避免强光和噪声对人员的损害。（四）实验室火灾风险评定与防止控制方法⒈风险点识别⑴超负荷用电，电线过长。⑵电器和电源老化、电器保养不良，如电缆的绝缘层破旧或损坏。⑶用火不当引发怒灾。⑷仪器设备在不使用时未关闭电源。⑸使用的仪器设备不是专为实验室环境设计。⑹易燃、易爆品解决、保存不当。⑺不相容化学品没有对的隔离。⑻在易燃物品和蒸汽附近有能产生火花的设备。⑼通风系统不当或不充足。⒉防止控制方法⑴定时检查电器插座、电线绝缘层与否完好，确保用电负荷，对易燃、易爆等危险品进行有效区域隔离。⑵实验室配备灭火器。放置在易取的地点，摆放部位张贴灭火器标记。该灭火器用于扑灭可控制的火灾，协助人员撤离火场；对灭火器进行定时检查和维护，确保其有效使用。⑶实验室需装设应急灯，全部出口都有黑暗中可见的“紧急出口”标记；当出现紧急状况时，实验室全部出口的锁必须处在启动状态，出口设计因确保不通过高危险区域就能逃脱，全部出口都能通向一种开放空间。⑷走廊、流通区域不能放置障碍物，确保人员流动和灭火设备移动不受影响。⑸在实验室工作区显着位置张贴火警电话标记。实验室每年对工作人员进行消防知识培训，涉及消防器材的使用、火灾发生时应急行动等。五、自然灾害风险评定与安全防护方法自然灾害可能造成的实验室紧急状况重要涉及水灾和地震等。（一）水灾⒈风险点识别水灾可能造成实验室维护构造和设施损坏，实验室内感染性材料随水外溢。⒉安全防护方法⑴安全手册中制订《实验室紧急事件应急预案》，并对全部实验室人员进行培训。⑵实验室一旦发生水灾报警时，应立刻停止工作。首先考虑实验室内感染性物质和人员的转移。实验室负责人、中心主任根据条件及时采用对策，第一时间联系有关消防人员。消防人员应有防护方法，并在受过训练的实验室工作人员陪伴下，进入实验室完毕感染性物质和人员的安全转移工作。（二）地震⑴风险点识别发生地震等自然灾害会造成实验室维护构造和设施损坏，存在人员受伤和实验室感染性材料外溢的风险。⑵风险控制方法实验室应采用方法减少自然灾害带来的风险，确保灾害发生后能够安全撤离实验室，减少对人员和环境的影响。发生地震后，首先设立距实验室维护构造20m范畴内的封锁区。另首先，对封锁区进行消毒，然后由专业人员在做好个人防护的前提下对实验室内部环境边消毒边清理。如果保藏样品的容器没有被破坏，可把它安全转移到其它安全的实验室寄存。如果保藏样品的容器已被破坏和发生外溢，应立刻用可靠办法进行彻底消毒灭菌。六、生物安全及其它紧急事件（事故）解决预案（一）实验室生物安全事件（事故）解决方法⑴当生物安全柜出现持续正压时，应立刻停止操作，告知运行保障人员采用方法恢复负压。如果不能及时恢复和保持负压，应停止实验。发生这类事故或发生意外停电，造成含有传染性物质暴露潜在危险的事故和污染时，工作人员除了采用紧急方法外，还应立刻报告实验室安全负责人，组织对实验室进行终末消毒。⑵离心过程中离心管破裂时，应立刻关闭电源，让离心机停止工作，并静止30min。然后缓慢打开离心机盖，将离心杯平稳地拿到生物安全柜中。如果发生泄漏，用1%的次氯酸钠消毒液灌入离心背腔体中消毒的30min，然后弃去消毒液和离心管碎片，将离心杯清洗后擦干。⑶发生污染物破溅或溢出时，立刻用清洁布或吸水纸覆盖污染处，并倒上10~25倍稀释的施康消毒液，作用最少30min，方可清理全部污染物，用消毒剂擦拭污染区域。全部这些操作过程中都应戴手套。如果发生大范畴污染物扩散事故时，应立刻告知实验室主管领导和安全负责人达成事故现场。待其查清状况，拟定消毒方案，并组织对实验室进行终末消毒。⑷若发生针头刺伤或血液样本溅洒从而污染人员、器具或环境等，应及时采用有效的消毒解决方法。①被采血针头刺伤应立刻用肥皂和大量流水冲洗，尽量挤出损伤处的血液，并用75%酒精或碘附等有效消毒剂对伤口进行消毒解决。②皮肤污染立刻用肥皂和大量流水冲洗污染部位，并用75%酒精或碘附等有效消毒剂对伤口进行消毒解决。③黏膜污染用大量流水或生理盐水冲洗污染部位。④物品污染那煮沸的物品煮沸20min后清洗；对不能煮沸的衣服可用1%漂白粉或%过氧乙酸浸泡2h后再用清水洗涤。⑤地面、墙面等环境污染可用3%漂白粉或2%过氧乙酸喷雾或擦洗2次。（二）其它紧急事件（事故）解决方法在制订的应急预案中应涉及消防人员和其它紧急救助人员。应事先告知他们哪些房间有潜在的感染性物质，让他们熟悉实验室的布局和设备。在实验室发生不可控制的火灾、水灾、爆炸或其它危险状况时，为确保工作人员的安全，要进行紧急撤离。全部实验室人员须理解紧急撤离的行动计划、撤离路线和集合地点。每年最少参加一次紧急撤离演习，涉及急救设备使用和采用对应急救方法。（三）生物安全及其它紧急事件（事故）报告和统计⑴发生生物安全紧急事件时，在紧急解决的同时必须立刻向主管领导和生物安全委员会报告。⑵对于意外和事故必须进行登记，具体统计发生的时间、地点、通过、解决办法及过程，涉及专家赴现场指导和解决的状况。七、生物安全和生活安全保障风险管理（一）生物安全风险评定根据风险评定所根据的数据及拟采用的风险控制方法、安全操作规程等均应以国家卫生和计划生育委员会、世界卫生组织、国际原则化组织等机构或行业权威机构公布的指南、原则等为根据。危险发生的概率评定（见表7-2）表7-2丙型肝炎病毒实验活动危险发生的概率评定序号潜在危险因素危害程度发生概率固有风险方法合理性残留风险风险可控程度1样本运输过程中容器意外侧翻、造成样本泄露中度可能中度合理低风险可控2样本接受、启动及加样等常规实验活动中产愤怒溶胶中度较大可能中度合理低风险可控3离心过程中样本管破裂产生大量气溶胶中度可能中度合理低风险可控4检测未通过灭活的样本对仪器与环境造成污染中度较大可能中度合理低风险可控5样本、实验材料及设施设备等被误用中度较小可能中度合理低风险可控6阳性样本被恶意使用高度较小可能高度合理低风险可控7废弃物解决不当造成病原微生物扩散中度可能中度合理低风险可控8检查人员及工勤人员破损的皮肤、黏膜接触到血液样本或被锐器刺伤等造成职业暴露高度可能高度合理低风险可控9检查人员个人防护不当造成病原微生物扩散中度可能中度合理低风险可控10非检查人员、进修实习等外来人员进入实验室的不当操作造成病原微生物的扩撒中度可能中度合理低风险可控11水、电、火灾或自然灾害造成病原微生物扩散中度较小可能中度合理低风险不可控（三）风险评定人员由中心主任组织检查科、质量管理科及其它科室熟悉HBV检查有关风险的专业人员进行风险评定并形成风险评定报告。形成的风险评定报告经中心生物安全委员会审核，请省市熟悉有关病原微生物特性、实验设施设备、操作规程及个体防护设备的不同领域的专家进行评定和讨论，不停完善修订完善。（四）风险评定报告风险评定报告应是实验室采用风险控制方法、建设安全管理体系和制订安全操作规程的根据。在统计风险评定的过程中，风险评定报告应注明评定时间、编审人员和所根据的法规、原则、研究报告、权威资料及数据等。（五）需重新进行风险评定的状况⑴二级生物安全实验室改造前（或新建造前）和正式启用前。⑵当收集到的资料表明HCV的致病性或传染方式发生变化时，应对其背景资料及时变更，并对其实验操作的安全性进行重新评定。⑶开展新的实验活动（增加新的项目），应对项目的实验活动进行再评定。⑷生物安全实验室操作人员在进行实验活动中，发现有原评定报告中未涉及的隐患存在，或者在检查过程中发现存在生物安全问题，则应进行再评定。⑸在实验活动中发现阳性标本泄露或人员感染等意外事件或事故时，应立刻进行再评定。⑹当评定过的实验