兰索拉唑的药代动力学研究

兰索拉唑的药代动力学研究

子泵抑制剂兰索拉唑主要用于治疗与胃肠道疾病有关的疾病，如溃疡、胃食管反流疾病（gerd）和伴有佐-埃氏综合征的疾病。已经证明,兰索拉唑在肝脏中由细胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)进行代谢,由于CYP2C19的基因多态性,兰索拉唑的清除有明显的个体差异。除细胞色素P450代谢酶会影响兰索拉唑的代谢外,近年来的体外研究表明,兰索拉唑是P-糖蛋白的底物,MDR1C3435T突变可能会通过改变肠道P-糖蛋白的表达,对兰索拉唑的吸收产生影响。在本试验中将对可能影响兰索拉唑体内分布的蛋白和酶的基因多态性进行研究,检测健康受试者的CYP3A5*3、MDR1C3435T突变基因型,分析其对兰索拉唑肠溶胶囊代谢的影响,同时对CYP2C19*2、CYP2C19*3也进行考察。材料、对象和方法1聚合酶、基因组dna纯化试剂盒兰索拉唑肠溶胶囊,规格:每粒30mg,批号:050201,天津武田药品有限公司生产。DNAMarker、dNTP,为大连宝生物公司生产;TaqDNA聚合酶、基因组DNA纯化试剂盒,美国Promega公司生产:琼脂糖,上海生工生产;实验所用其他试剂,均为分析纯或优级纯;水为灭菌去离子水。PCR扩增仪(Mastercycler),德国Eppendorf公司产品。2实验室检查及知情同意书筛选男性健康志愿者,既往无肝肾疾病、出血性疾病、心脑血管疾病、神经系统疾病、血液病史,无过敏史,经查体及实验室检查证实身体健康。实验室检查包括血常规、血生化、尿常规、HBsAg、十二导心电图,均在正常范围内。受试者自愿签署知情同意书。共有24名健康受试者入选本研究,受试者的平均年龄为34.9岁(30～39岁),受试者的平均身高为1.70m(1.60～1.79m),平均体质量65.3kg(54～78kg)。3pcr和测序验证取入选受试者EDTA-Na2抗凝血2mL,用DNA纯化试剂盒提取基因组DNA;用PCR-RFLP检测志愿者MDR1C3435T、CYP3A5*3、CYP2C19*2和CYP2C19*3变异情况。用PCR产物测序验证结果。受试者在服药前1天晚入住本研究中心,在服药前隔夜禁食10h以上,然后服用兰索拉唑肠溶胶囊30mg,用温开水150mL送服;受试者服药后2h内不能平卧,以避免影响胃肠蠕动,2h内禁水,并在4h后给予统一标准午餐。每次分别于服药前、服药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、6、8、12、24h采集静脉血5mL,血样在1h内4℃,3000r·min-1离心10min,分离出血清,保存于-20℃冰箱至测定。5u3000酸相采用高效液相-紫外检测法,分析人血清中的兰索拉唑。色谱条件:TSK-gelODS120T色谱柱(5μm,150mm×4.6mm);流动相为乙腈-20mmol·L-1磷酸氢二钾水溶液(pH=7.46)(37:63);流量为1.0mL·min-1,柱温40℃;UV波长285nm;进样量为40μL。血清中兰索拉唑分析浓度范围为20～2000ng·mL-1(γ=0.996)。各样品的日内、日间精密度均≤15%。6力学参数的测定用WinNonLin5.0软件计算主要药代动力学参数;Cmax和tmax均为实测值,AUC0～tn用梯形法计算;用Spss16.0软件对Cmax、AUC等药代动力学参数进行统计学分析。结果1cyp2c1924名志愿者的基因型:CYP3A5*1/*1为1名;*1/*3为11名;*3/*3为12名;MDR1CC为9名;CT为11名;TT为4名。CYP2C19*1/*1为9名;*1/*2为11名;*2/*2为3名。仅1名受试者携带CYP2C19*1/*3。各基因型间体质量、身高无统计学差异。2兰索拉唑致-4.3/3的比较本试验中对不同基因型的药代动力学参数进行了比较,见下表。从表可见,CYP3A5*3突变型纯合子与表达CYP3A5*1的受试者比较,兰索拉唑各个药代动力学参数间不存在显著性差异;但*3/*3较*1携带者AUC0～∞和Cmax分别降低22.8%和19.8%;CYP2C19*1/*1与*2/*2比较,AUC0～∞存在显著性差异(P=0.04);MDR13435C与3435TT比较,tmax存在显著性差异(P=0.026)。3物的吸收速率AUC0～2是兰索拉唑从给药至tmax的血药浓度时间曲线下面积,用其表示药物的吸收速率具有更高的统计意义。MDR13435C与3435TT2组比较,平均AUC0～2分别为(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2组间存在显著性差异(P=0.03),见图1、2。cyp3a1.3和mdr135t-3对兰索拉唑药代动力学参数的影响兰索拉唑是一种具有H+-K+腺苷三磷酸(ATP)酶抑制作用的苯并咪唑类衍生物,口服兰索拉唑肠溶胶囊30mg后,1.5～2.2h就可达到血药浓度,血中主要检测到药物原形。兰索拉唑在肝脏中由细胞色素P4502C19(CYP2C19)和3A(CYP3A)进行代谢。CYP2C19基因突变对兰索拉唑药代动力学的影响已有一些研究报道;但在以中国人为对象的研究报道中以中国汉族健康志愿者为研究对象,兰索拉唑AUC0～∞在CYP2C19*1/*1、*1/*2和*2/*2间存在显著相关性(P<0.001)。Hu等也得到一致的结果(P<0.01)。CYP3A5*3和MDR1C3435T对兰索拉唑药代动力学影响,国内外少见报道。MiuraM等的研究显示,CYP3A5*3对日本肾移植患者兰索拉唑代谢没有影响,在CYP2C19快代谢者中,携带MDR1C3435TC的患者兰索拉唑血药浓度较高。本研究结果显示,CYP2C19*1/*1与*2/*2比较,AUC0～∞存在显著性差异(P=0.04),表达CYP2C19*2/*2的受试者,其体内兰索拉唑的暴露量是*1/*1者的1.75倍。与以往的研究比较,本研究中CYP2C19*2基因组间药代动力学差异显著性较低,这可能是因为本研究入选的24名受试者中,仅3名为CYP2C19*2/*2。AUC0～2表示兰索拉唑的吸收速率,MDR13435C与3435TT2组比较,平均AUC0＿2分别为(250.7±200.03)、(504.4±192.49)ng·h·mL-1,2组间存在显著性差异(P=0.03),说明表达MDR13435TT的受试者兰索拉唑的吸收快于其他基因型受试者;但由于总暴露量(AUC0～∞)2组间没有差异,所以并不能得出MDR13435TT基因型表达者,兰索拉唑吸收强于其他受试者的结论。本研究未发现CYP3A5*3突变与兰索拉唑药代动力学参数的统计学相关性;但是CYP3A5*3/*3突变型纯合子的平均AUC0～∞和Cmax,均低于表达CYP3A5*1者。因为样本量限制,本文未能进行多因素相关性分析。本研究分析了CYP3A5*3、MDR1C3435T和CYP2