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文档简介
免疫学检测技术免疫标记技术ELISA---双抗夹心法
(1份/组)细胞免疫功能检测E玫瑰花环实验 示教淋巴母细胞转化实验 示教一、ELISA---双抗体夹心法
血清总IgE是针对各种抗原的特异性IgE的综合,正常人血清IgE含量极低,故需要采用高度灵敏的方法进行检测。
本实验采用双抗体夹心ELISA法。双抗体夹心法加抗原加酶标抗体加底物实验材料羊抗人IgE抗体(已包被到反应孔)酶标羊抗人IgE抗体底物显色剂实验步骤在反应孔中加待测血清1滴,阴\阳性对照各1滴,室温放置20分钟,倒掉反应液,用洗液洗涤并甩掉,在吸水纸上拍干。每孔加酶标羊抗人IgE抗体1滴,室温放置10分钟,倒掉反应液。用洗液反复洗涤5遍,在吸水纸上拍干。加底物1滴加显色液1滴,观察结果。二、E玫瑰花环形成实验实验原理:T细胞表面标志CD2,即绵羊红细胞受体绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合可用于T细胞的计数与分离三、T淋巴细胞转化实验T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂原刺激时,可发生转化。特异性抗原非特异性丝裂原:PHA、ConA等。正常人淋巴细胞受到PHA刺激后,其转化率为60-80%。转化细胞形态特征细胞体积:增大细胞核大小:增大染色质
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