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文档简介

4.3种子扩大培养的原则4种子扩大培养种子扩大培养的原则种子罐级数是指制备种子需逐级扩大培养的次数。取决于：①菌种生长特性、孢子发芽及菌体繁殖速度；

②所采用发酵罐的容积。1、种子罐级数的确定

为简化工艺和控制，减少染菌机会，种子罐级数越少越好。但种子级数太少，接种量小，发酵时间延长，会降低发酵罐的生产效率。虽然种子罐级数随产物的品种及生产规模而定，但也与所选用工艺条件有关。如改变种子罐的培养条件，加速孢子发芽及菌体的繁殖，也可相应地减少种子罐的级数。霉菌的生长较慢，如青霉菌，一般采用二级种子罐扩大培养，为三级发酵。

即：孢子悬浮液→一级种子罐(27℃,40h孢子发芽，产生菌丝)→二级种子罐(27℃,10～24h，菌体迅速繁殖，粗壮菌丝体)→发酵罐。放线菌的生长速度更慢，采用三级种子罐扩大培养，为四级发酵。种子扩大培养的原则1、种子罐级数的确定细菌的生长速度快，种子用量比较少，故种子罐相应也少，采用一级种子罐扩大培养，也称二级发酵。即：茄子瓶→种子罐→发酵罐发酵级数确定的依据级数受发酵规模、菌体生长特性、接种量影响。级数大，难控制、易染菌、易变异，管理困难，一般为2-4级。种子扩大培养的原则1、种子罐级数的确定定义：接种龄又称种龄，是指种子罐中培养的菌丝体开始移人下一级种子罐或发酵罐时的培养时间。概述：通常接种龄以菌丝处于生命极为旺盛的对数生长期，而且培养液中菌体尚未达到最高峰时较为合适。过于年轻的种子接入发酵罐后，往往会出现前期生长缓慢，使整个发酵周期延长，产物开始形成的时间推迟。而过老的种子会造成生产能力下降，菌体过早自溶。不同菌种或同一品种工艺不同，其种龄也不一样，具体时间一般要经过多次试验来确定。种子扩大培养的原则2、接种龄总结：种龄短：菌体太少；种龄长：易老化。原则:对数生长期末，细胞活力强，菌体浓度相对较大，但是最终由实验结果定。种子扩大培养的原则2、接种龄定义：

接种量是指移入的种子液体积和接种后培养液体积的比例。概述：

接种量的大小取决于生产菌种在发酵罐中的生长繁殖速度。

采用较大的接种量，可以缩短发酵罐中菌体繁殖到达高峰的时间，使产物的形成提前到来。但是，如果接种量过多，往往使菌丝生长过快，培养液黏度增加，造成溶解氧供应不足而影响产物合成。而接种量过少，除了延长发酵周期外，往往还会引起其他不正常情况。

在丝状菌发酵生产中，最适接种量多为7～15%，而细菌发酵中接种量相对较小，一般为1～2%。总之，对每一个生产菌种，要进行多次试验才能确定其最适接种量。种子扩大培养的原则3、接种量过大过小都不好，最终以实践定，如大多数抗生素为7-15%，但是一般认为大一点好。双种：两个种子罐接种到一个发酵罐中。倒种

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