机能自主设计实验

机能自主设计实验乙醇对失血性休克的家兔凝血功能的影响班级：2013级预防医学本科班组别：第一大组第2小组组长：蔡文卓组员：孙雅琼马睿臧鹏雯闫宇涵刘维贺乙醇对失血性休克的家兔凝血功能的影响【摘要】目的探讨不同浓度乙醇对失血性休克家兔凝血功能的影响。方法本实验将3只家兔随机分成3组:耳缘静脉注射生理盐水为对照组,注射25%和60%乙醇溶液为实验组。通过颈总动脉放血建立失血性休克模型,并采用玻片法测量模型建立前后凝血时间的差值。结果生理盐水组的凝血时间加快(43±15.70)s,25%乙醇组的凝血时间延缓(16±13.80)s,较生理盐水组的凝血时间显著延长;60%乙醇组的凝血时间加快(60±13.08)s,较生理盐水组的凝血时间缩短。结论低浓度乙醇可延缓失血性休克家兔的血液凝固,而高浓度乙醇浓度可促进失血性休克家兔的血液凝固。【关键词】乙醇；失血性休克；凝血【实验目的】探讨不同浓度乙醇对失血性休克家兔凝血功能的影响。【实验原理】凝血过程是一系列酶促反应，每个凝血因子都被其前一个有关因子所激活，最后生成凝血酶和纤维蛋白。血液凝固可分为三条途径。外源性凝血途径(extrinsicpathway)是指从因子Ⅲ的释放到因子Ⅹ被激活的过程，包括因子Ⅲ、Ⅶ和Ca2+之间的相互作用。内源性凝血途径(intrinsicpathway)是指从因子Ⅺ激活到因子X被激活的过程，包括因子Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ、Ca2+、PK、HMWK之间的相互作用。共同凝血途径(commonpathway)是指因子Ⅹ的激活到纤维蛋白形成的过程，包括因子Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ、ⅩⅢ、Ca2+之间的相互作用。内外凝血途径并非截然无关而是互有联系，可以相互促进。Ⅻa、Ⅸa可促使因子Ⅶ活化；Ⅶa-Ca2+-Ⅲ复合物也能直接激活因子Ⅸ。乙醇可影响PTL的聚集功能，从而对凝血功能具有一定的影响。血中低浓度乙醇主要通过抑制PTL表面粘附因子的活化，抑制钙离子内流来降低PTL的聚集率来降低PTL的聚集率。而高浓度的乙醇反而能激活PTL，增强聚集功能。【实验材料】（1）实验对象:家兔（雌雄不限）（2)实验器材:哺乳动物手术器械、动脉夹、动脉插管、气管插管、兔台、体重秤、注射器、BL-420生物系统、动脉压力换能器、注射器、烧杯、计时器、三通管。（3)试剂与药品：生理盐水、无水乙醇、蒸馏水、20%乌拉坦、1%肝素【实验步骤】分组：生理盐水组、25%乙醇组、60%乙醇组；（2）称重后，分别采血测量凝血时间、耳缘静脉注射20%乌拉坦（5ml/kg)，麻醉后固定于兔手术台上，剪毛。（3）进行颈部气管插管。（4）行颈总动脉插管术，与三通管相连，检测动脉血压。（5）模型制备对照组和两个模型组分别耳缘静脉注射生理盐水，25%和60%乙醇溶液3ml，然后打开颈总动脉插管与三通管相通的开关，使血液自然流入装有肝素的三通管中，监测血压。4min后，抽取全血量20%的血液(全血量计算:70mL/kg)。抽血结束2min后进行耳缘静脉第2次取血，测量凝血时间t2。计算每组家兔前后两次凝血时间差值△t，比较3组家兔的△t值。（6）统计学处理实验数据用均数±标准差(x±s)表示，采用SPSS10.0统计分析软件行单因素方差分析，组间两两比较采用q检验。【实验结果】25%乙醇组与生理盐水组比较，凝血时间明显延长，差异显著（P<0.01）.60%乙醇组与生理盐水组比较，凝血时间明显缩短，差异有统计学意义。各组凝血时间差值组别n△t(s)FP生理盐水25%乙醇组60%乙醇组10101043±15.70-16±13.8060±13.0878.503—0.0000.017注:Dt=t1一t2(t1时间):25%乙醉组中，为建模前的凝血时间，t2>t1，故pt<0;*t2为建模后的凝血*与生理盐水组比较，P<0.01.*与生理盐水组比较，P<0.05【实验结果分析】短时间，大量失血可引起休克，休克进展过程中血液粘滞度增高，血小板（PTL）数目明显增加，PTL可释放纤维蛋白等凝血因子，而血液凝固过程中产生的凝血酶又加强PTL的活化，活化的PTL可为血液凝固过程凝血因子的激活提供磷脂酶表面，PTL表面结合有多种凝血因子，使得凝血系统和纤溶系统的平衡被打破，加速了失血性休克的进展过程，可诱发DIC【1】.乙醇可影响PTL的聚集功能，从而对凝血功能具有一定的影响。血中低浓度乙醇主要通过抑制PTL表面粘附因子的活化，抑制钙离子内流来降低PTL的聚集率来降低PTL的聚集率【2】。而高浓度的乙醇反而能激活PTL，增强聚集功能。本实验显示生理盐水组的凝血时一间加快(43±15.70)s;25%乙醇组的凝血时一间延缓(16±13.80)s，结果较生理盐水组的凝血时一间显著延长;60%乙醇组的凝血时一间加快(60±13.08)s，结果较生理盐水组的凝血时一间缩短。因此本研究提示，低浓度的乙醇对失血性体克家兔的凝血功能可能具有抑制的作用，可以延缓DIC的进程。而高浓度的乙醇对失血性休克家兔可能具有促进的作用，加速D