湖北青霉素茶降血脂作用研究

湖北青霉素茶降血脂作用研究

现在，随着高脂肪和蛋白等食物的增加，老年人的高血脂症患者越来越多。现有的降血脂药物大多有副作用,不宜长期服用。因此,寻求从天然植物中提取具调节血脂的活性成分已备受关注。大量研究表明,茶叶具有抗脂质过氧化、预防高血脂症、减少心脑血管疾病发生的作用,其中研究较多的是绿茶、乌龙茶及其活性成分茶多酚和茶色素等。近年来,有关普洱茶、茯砖茶的降脂活性研究日益增多。傅冬和研究了茯砖茶不同提取物对过氧化物酶增殖体活化受体、肝X受体(LXR)、法尼酯衍生物X受体(FXR)具有一定的作用,提示其多条降脂途径。宋鲁彬等人选用不同黑茶材料进行对比分析,结果表明,所分析黑茶对PPARδ及PPARγ两种核受体模型具有一定的激活能力,具有潜在的降血糖和降血脂作用的可能。青砖茶为湖北特有的黑茶,为西北高寒高脂饮食地区人们的生活必需品,前期研究表明其具显著的减肥功效。本文拟对其辅助降血脂作用和机制进行深入研究,为青砖茶的开发利用提供理论依据。1材料和方法1.1血脂康取助剂制备工艺青砖茶由湖北省赤壁市赵李桥茶厂提供,分贮藏1年砖和10年砖;阳性药为血脂康胶囊(北京北大维信生物科技有限公司生产)。试验时,先将青砖茶打碎,按料水比(m/V)为1:20加沸蒸馏水煮沸7min,煮两次,过滤后合并茶汤,于旋转蒸发器上浓缩至相应的体积。绿茶(湖北宣恩炒青绿茶一芽二叶左右嫩度)用沸蒸馏水浸泡两次(料水比m/V为1:20,浸泡时间为每次40min),过滤后合并茶汤于旋转蒸发器上浓缩至相应的体积。血脂康取粉剂用蒸馏水配制而成。饲料:动物普通饲料由湖北省实验动物研究中心提供。高脂饲料配方:基础饲料78.8%、猪油10.0%、蛋黄粉10.0%、胆固醇1.0%、胆盐0.2%。1.2centrifacifge50r天平,解剖器械,751型分光光度计,RE-52AA旋转浓缩仪,HH-6数显恒温水浴锅,EppendorfCentrifuge5810R(Germany),微量移液器等。胆固醇、胆盐、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)测定试剂盒(上海科欣生物技术研究所提供);超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)试剂盒(南京建成生物工程研究所);其他试剂均为国产分析纯。1.3实验分组、给药及饲料雄性Wistar大鼠80只,体重为(150±5)g,(SPF级,由湖北省实验动物研究中心提供,)在实验环境下将大鼠适应性饲养5d,然后取尾血,测定血清TC,根据TC水平,参考体重随机分为8组(每组10只):空白对照组(NC)、模型对照组(MC)、阳性药对照组(XZK,0.12g/kg),贮藏1年青砖低剂量组(QT1-L,0.75g/kg)、中剂量组(QT1-M,1.5g/kg)、高剂量组(QT1-H,3.0g/kg)和10年青砖剂量组(QT10,1.5g/kg)、绿茶剂量组(GT,1.5g/kg)。空白对照组灌胃蒸馏水,喂饲普通饲料;模型对照组灌胃蒸馏水,喂饲高脂饲料;其它6个剂量组分别灌胃相应的受试样品,喂饲高脂饲料。实验喂养6周,定期称量体重。实验结束时,禁食12h,称体重,颈动脉取血,2000r/min4℃离心10min,分离出血清,测定血清TC、TG、HDL-C及SOD、GSH-PX、MDA水平,解剖大鼠,肉眼观察大鼠体内脏器变化情况。取大鼠同一部位肝脏0.5g左右于10%的中性福尔马林液中固定,石蜡包埋切片,HE染色,用Olympus万用显微镜摄影记录。1.4大鼠相关指标的测定血清TC、TG、HDL-C、SOD、GSH-PX、MDA按试剂盒要求进行测定。1.5处理数据采用SPSS16.0版本软件,用one-wayanova方法进行方差分析。2结果分析2.1各组大鼠的最终体重、体重增重情况分组时各组初始体重差异不明显,经过6周喂养后,模型对照组体重最高,增重最多,其最终体重及体重增幅都极显著高于其他各组大鼠。喂饲贮藏10年的青砖茶组大鼠体重及增重幅度为各实验组最小,其次是高倍剂量的储藏1年青砖茶组(表1)。说明,青砖茶较绿茶对高脂大鼠降低体重效果更明显。2.2两组大鼠血脂水平的比较实验结果(表2)表明,经6周高脂饲料喂养,模型组大鼠血清TC、TG显著高于空白对照组,说明建模成功。与高脂模型组比较,喂饲青砖茶的大鼠血清TC、TG显著降低,1年青砖茶有剂量依赖关系。各处理中,以10年青砖茶组大鼠血清的TC、TG最低,接近正常对照组大鼠血脂水平。其次是1年青砖茶的高、中剂量组。绿茶组大鼠血清TC、TG的值为各实验组最高。HDL-C以10年青砖茶喂食组最高,极显著高于模型组及对照组。1年青砖茶高、中剂量喂食组大鼠血清HDL-C提高明显,极显著高于模型组。绿茶对大鼠血清HDL-C的提高也比较明显;血脂康对大鼠血清HDL-C提高不显著。以上分析结果表明,1年青砖、10年青砖、绿茶都有降低大鼠血清TC、TG,升高大鼠血清HDL-C的作用,尤以1年青砖高剂量组和10年青砖茶的降TC、TG效果最好。2.3加强动力学mda、gsh-px抗氧化能力研究实验结果如表3所示,与模型组比较,阳性对照及各受试样品组大鼠血清SOD、GSH-PX的活性都显著或极显著提高,血清MDA极显著降低作用,其中,1年青砖茶对大鼠血清抗氧化作用有明显的量效关系。2.4肝脏水肿,肝脏以红色解剖大鼠后肉眼观察肝脏形态,发现高脂模型组大鼠肝脏肿胀,颜色大多为黄褐或泛白,喂饲青砖茶后,肝脏大小、颜色趋于正常。说明青砖茶对喂饲高脂饲料的大鼠肝脏有调节保护作用。3不同给药剂量对大鼠降血脂效果的影响本实验结果显示,青砖茶对实验大鼠血清TC、TG水平有明显的降低作用,对HDL-C水平有明显的升高作用。说明青砖茶对实验大鼠具有辅助降血脂功能。实验所用阳性药血脂康是一种由红曲中提炼制成的血脂调节剂,主要功能性成分为洛伐他汀,其药理作用是调节异常血脂,可降低血清TC、TG、LDL-C含量和升高HDL-C含量;抑制动脉粥样硬化斑块的形成,保护血管内皮细胞;抑制脂质在肝脏沉积。血脂康是人们常用的降血脂药物,但长期服用对肝脏有副作用。实验结果显示,青砖茶的辅助降血脂效果优于血脂康。显微切片图(图1)可以看出,正常组大鼠肝小叶结构清晰,中央静脉清楚,肝细胞索呈放射状排列,肝窦正常,肝细胞大小一致,细胞核清晰,胞浆均匀。而模型组大鼠肝细胞组织结构异常,肝窦缩小甚至消失,细胞界限不清,肝索排列紊乱,肝细胞大面积肿胀,胞浆呈空泡样,浅染。其余各实验组症状减轻,细胞界限较明显,空泡面积较少。其中喂食10年青砖组和1年青砖高剂量组大鼠肝脏保护较好,已趋于正常组大鼠肝细胞状态,说明青砖茶对实验大鼠的肝脏有较好的保护作用。本实验同时比较了青砖茶与绿茶的降血脂效果,结果显示,即使1年青砖茶低剂量的降血脂效果也优于绿茶。青砖茶由于原料、加工工艺与绿茶存在较大差异,因此,内含成分与绿茶也有较大差异,据笔者分析,青砖茶中,茶多酚明显减少,而多酚的氧化聚合产