玉米大斑病菌的化学农药防治研究

玉米大斑病菌的化学农药防治研究

玉米斑点是一种全球疾病，也是吉林省玉米生产的主要疾病之一。它在省内不同程度上发生。这是吉林省水稻生产的一个重要因素。由于生产上对玉米大斑病的防治一直以种植抗病品种及增施氮肥等栽培措施为主,而且有关杀菌剂对大斑病菌孢子萌发及菌丝扩展抑制作用的研究报道甚少。近年来生产实践表明,在某些条件下(如种植特用玉米及制单交种)该病发生较严重时采用化学防治也有一定作用。为此,笔者选用12种目前生产上较常使用的农药进行药剂对病菌孢子萌发及菌丝扩展抑制程度试验,以期选出对该病有较好防效的药剂。此前已有人研究证明玉米花粉粒与孢子萌发率有明显关系,但此项研究尚不深入,笔者也做了进一步明确花粉粒对孢子萌发及药剂效果影响的试验研究。此外,考虑到离体叶片上的病斑产孢规律也很少有研究报道,而且弄清这一问题对明确玉米大斑病初侵染源的产生过程也有价值,故也对此进行了专项研究,现将有关研究结果报道如下。1材料和方法1.1对病原体的抑制作用1.1.1常用的可湿性药剂A.70%代森锰锌可湿性粉剂;B.69%安克锰锌可湿性粉剂;C.58%甲霜灵锰锌可湿性粉剂;D.50%福美双可湿性粉剂;E.50%速克灵复方可湿性粉剂;F.50%速克灵可湿性粉剂;G.25%灰克可湿性粉剂;H.50%扑海因可湿性粉剂;Ⅰ.70%甲基托布津可湿性粉剂;J.56%靠山水分散粒剂;K.75%百菌清可湿性粉剂;L.65%万霉灵(65%甲霉灵)可湿性粉剂。1.1.2全倍镜下各测定一个培养细胞称取各药剂1g配制成1000倍药液,并配制大斑病菌孢子悬液(10×10低倍镜下每视野中5～10个孢子)。在各个载玻片上分别滴2滴孢子悬液和2滴药液,并设立对照(2滴蒸馏水,2滴孢子悬液),各处理重复3次。在25℃保湿培养12h,然后镜检,计算各处理的孢子萌发率,以及各药剂对大斑病菌孢子萌发的抑制率。1.1.3培养基平板制备称取以上药剂各1g,配制成1000倍药液,记好顺序,将已消毒的滤纸片放药液内浸透,在灭菌的培养皿内各滴2滴孢子悬液,然后倒入PDA培养基(45～50℃)上并摇匀,待培养基冷却后即成为平板。将每个平板上置4种沾药滤纸片,并做好标记,再放入25℃温箱内(以上药剂均重复3次)。2d后取出培养皿,测量沾药滤纸片周围抑菌圈直径,记录结果并加以比较。1.2花粉粒制备工艺从玉米植株上采集已散出的花粉。(Ⅰ)将不同数量的花粉粒和2滴孢子悬液滴到载玻片上。(Ⅱ)将每毫升花粉粒分成9个梯度,每个梯度花粉粒数量为①200～300个/mL;②500～700个/mL;③800～1000个/mL;④1200～1500个/mL;⑤2000～2500个/mL;⑥3000～3500个/mL;⑦4000～4500个/mL;⑧5000～6000个/mL;⑨约7500个/mL。同时也在2滴孢子悬液中加入上述花粉粒,置载玻片上。将(Ⅰ)、(Ⅱ)各处理均放入25℃温箱保湿培养12h,然后镜检计算每个处理孢子萌发率,每个处理重复3次。(Ⅲ)选6种对大斑病菌孢子萌发有一定抑制作用的杀菌剂,分别测定每种杀菌剂1000倍药液对大斑病菌孢子萌发的抑制作用,并测定在相同浓度药液中加入较多花粉粒(1500个/2滴药液)时对大斑病菌孢子萌发的抑制作用。1.3玉米离体叶片病斑产量规律1.3.1病斑的制备在田间剪回约5cm长的玉米5个品种(四单19、丹玉13、本育9、吉单156、掖单11)大斑病的病斑,其中四单19、丹玉13、掖单11各取20个病斑,吉单156取9个病斑,本育9取7个病斑。首先用清水洗净病斑表面原有的孢子梗及孢子,再采用“半斑法”(从病斑中间对半剪开)置于培养皿中保湿培养,将每个病斑剪成的2个半斑分别放入2个培养皿中,其中一个皿中病斑正面朝上,另一个皿中病斑反面朝上。在25℃温箱培养24h以后,分别用10mL清水洗下各皿中全部病斑上的孢子,仍置于同一培养皿中,再镜检皿中孢子数量(取50个视野平均数)。最后比较各个品种叶片病斑正、反面相对产孢数量的多少。1.3.2产孢数量测定取10个玉米大斑病的幼龄病斑,置于培养皿中保湿培养,每隔48h检查1次病斑产孢数量(方法同“1.3.1”项),取30个视野平均数,并对每次产孢数量加以比较。2结果与讨论2.1不同药物对大斑病菌生长的影响1)不同杀菌剂对玉米大斑病孢子萌发的抑制作用试验结果见表1。由表1可知:代森锰锌及其复配制剂均可显著抑制大斑病菌的孢子萌发,福美双及速克灵复方剂也有明显抑制大斑病菌孢子萌发的作用。其余药剂,如万霉灵、百菌清、靠山、甲基托布津、扑海因等对大斑病菌孢子萌发抑制作用较差。2)不同杀菌剂对大斑病菌菌丝生长的抑制作用试验结果见表2。由表2可知:代森锰锌及其复配制剂均可显著抑制大斑病菌菌丝的生长;速克灵复方、福美双及靠山也有明显抑制大斑病菌菌丝生长的作用;灰克、扑海因及百菌清略有抑制作用;甲基托布津、速克灵、万霉灵对大斑病菌菌丝的生长无抑制作用。综上可得出如下结论:代森锰锌及其复配制剂甲霜灵锰锌、安克锰锌均能显著抑制大斑病菌孢子的萌发及菌丝的生长,是较好的防治玉米大斑病的药剂,福美双及速克灵复方药剂对大斑病菌的孢子萌发和菌丝生长也有明显抑制作用,也可用来防治玉米大斑病。如,1999年某甜玉米生产基地发生较重玉米大斑病后,经使用代森锰锌进行防治,取得了较好的效果。2.2花粉粒添加量对地区充放电药物的安全性影响花粉粒对孢子萌发具有明显的促进作用,在2滴孢子悬液中花粉粒数量大于500个时,其孢子萌发率显著提高,但在花粉粒数量少于500个时,对孢子萌发率提高不显著(表3)。试验结果表明:孢子萌发率随花粉粒数量的增多呈直线上升,但当孢子萌发的抑制因素作用很大,花粉粒数量为7500个/mL时,这种促进作用并不突出(表4)。试验结果还表明:无论杀菌剂对大斑病菌的孢子萌发抑制作用大小,药液中加入较多花粉后均使药效明显降低。孢子萌发率可由原来的2%增加到79.5%,可由原来的50%增加到95%以上。由此可以推论:在田间有大量花粉附着于玉米叶片上时,杀菌剂的防效将大大降低。若用化学药剂防治大斑病,应在玉米大量散粉前进行(表5)。2.3玉米离体叶片病斑的产量规律1表6显示了保藏性病毒后前后的生殖能力的比较试验2产孢量的比较见表1试验结果表明,玉米大斑病的病斑经在培养皿内保湿连续产孢10d后病叶腐烂,病斑前4d的产孢量明显高于后6d,但第1,2d与第3,4d产孢量的差异不大,第5,6d与第7,8d和第9,10d之间产孢量的差异也不大。3离体玉米小斑的产孢1)代森锰锌及其