第七章 消毒灭菌

第七章消毒与灭菌

概念

消毒：指杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使之达到无害化的处理（预防性消毒、疫源性消毒；随时消毒、终末消毒）灭菌：指杀灭或清除传播媒介上的所有微生物（包括芽胞），使之达到无菌程度灭菌可包括消毒，而消毒却不能代替灭菌

消毒多用于卫生防疫方面，灭菌则主要用于医疗护理

消毒与灭菌区别消毒、灭菌的原则

1.明确消毒的主要对象(感染途径、传播媒介和病源微生物的种类)2.采取适当的消毒方法3.控制影响消毒效果的因素采取适当的消毒方法

根据对象选择简便、来源丰富和价格适中的方法：高度危险的器材：穿过皮肤、粘膜而进入无菌的组织或器官内部，或与破损的皮肤粘膜密切接触的器材（手术器械）中度危险的器材：仅与皮肤、粘膜密切接触，而不进入无菌组织内（内窥镜）低度危险器材和物品：不进入人体组织，不接触粘膜，仅直接或间接地与健康无损的皮肤接触（口罩）

控制影响消毒效果的因素微生物的种类（细菌繁殖体，细菌芽孢，病毒和真菌，或者对热敏感，或者对消毒因子敏感）微生物的数量有机物的存在（保护层，形成化合物，降低浓度，中和）温度的影响（环氧乙烷温度升高1倍，杀菌效果增加10倍）PH值影响处理剂量与监测芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下，细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体。对多数细菌来说1个菌体细胞只形成1个芽孢，所以其没有繁殖功能。某些细菌在条件恶劣的情况下会形成芽胞以帮助该细菌度过恶劣条件.在形成芽胞之后,细菌处于休眠状态,此时的细菌几乎没有任何生命活动,对外界的抵抗力也相当强,此时的细菌状态就叫“休眠体”.当芽胞遇到适宜条件就会萌发,恢复“正常”状态,进行新陈代谢和繁殖,此时的细菌即“正常”状态下的细菌,就叫做“繁殖体”不过,把细菌说为繁殖体很少见,繁殖体多数用于霉菌、蕨类植物、藻类等低等生物在一些繁殖状况下形成的特殊结构。细菌当外界条件恶劣的时候就会产生芽孢形成休眠体以度过困难时期，休眠体生理活性极低，几乎不进行新陈代谢，当其遇到适宜的条件，休眠体又会萌发恢复正常的生理、形态特征，进行正常的生活，此时就是营养体。

消毒、灭菌的方法

热力消毒灭菌辐射消毒空气净化超声波消毒微波消毒化学消毒灭菌

一、热力消毒灭菌

使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的--湿热、干热

热力消毒灭菌分类湿热干热干烤法：电热烤箱、微波消毒燃烧法：灼烧法、焚烧煮沸法高压蒸汽灭菌法干热消毒灭菌

相对湿度在20％以下的高热一般繁殖体在干热80—100℃中经一小时可以杀死，芽孢需160—170℃经两小时后方可杀死燃烧法

烧灼法、焚烧（简单、迅速、彻底的灭菌方法：耐高温器械）干烤法电热烤箱：玻璃器皿及瓷器，温度降至50-40℃以下，开启柜门，以防炸裂微波消毒：食品药品的消毒，对人体有危害作用

湿热消毒灭菌

由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短煮沸法

--将水煮沸至100℃，在水中加入碳酸氢钠至1％－2％浓度时，沸点可达105℃高压蒸汽灭菌法

--利用高压和高热释放的潜热（当lg100℃的水蒸汽变成lg100℃水时，释放出2255.2J的热量）进行灭菌

煮沸消毒法

注射器和解剖器械等可用煮沸消毒法一般微生物学实验室中煮沸消毒时间为10-15分钟有条件的地方，一般均采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法灭菌

高压蒸汽灭菌法

高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的

手提式高压蒸汽灭菌器

手提式高压蒸汽灭菌器980.00电热式YXQ-280SD880.00煤电两用YXQ-280MD出厂价(元)2KW/AC220V50Hz电源功率18L消毒器容积130℃最高灭菌温度0.175Mpa最高工作压力卧式高压蒸汽灭菌器

全自动数显立式高压蒸汽灭菌器

全自动多段式预真空高温高压灭菌器

立式灭菌器

卧式矩形灭菌器高压蒸汽灭菌注意事项

无菌包不宜过大，不宜过紧，各包裹间要有间隙，使蒸汽能对流易渗透到包裹中央布类物品应放在金属类物品上，防受潮定期检查灭菌效果高压蒸汽灭菌效果的监测

工艺监测(程序监测)化学指示监测自治测温管（苯甲酸121-123℃，只能用于指示温度,不能指示灭菌时间）

3M压力灭菌指示胶带生物指示剂监测高压蒸汽灭菌指示带3M灭菌指示胶带121℃经20分钟，131℃经4分钟，胶带100%变色RavenProSpore蒸汽灭菌生物指示剂使用方法：消毒后培养，看是否变色干热灭菌与湿热灭菌的比较

水和蒸汽濡湿（皮革损坏）棉织品水液等低（60－134℃）短（4－60分钟）较强空气烤焦金属玻璃等高（160-400℃）长（1－5小时）较差对物品影响适用对象作用温度作用时间杀菌能力湿热干热

间歇灭菌法

有少数培养基例如明胶培养基、牛乳培养基、含糖培养基等用干热灭菌和高压蒸汽灭菌均会受到破坏，则必须用间歇灭菌法阿诺氏流动蒸汽灭菌器

该灭菌器底层盛水，顶部插有温度计，加热后水蒸汽温度达到100℃时，即循环流于器内，水蒸汽碰到器内物体时，又凝成水，流至底层贮水处。灭菌时，将培养基放在器内，每天加热100℃30分钟、连续三天，第一天加热后，其中的营养体被杀死，将培养基取出放室温下18-24小时，使其中的芽孢发育成为营养体，第二日再加热l00℃30分钟，发育的营养体又被杀死，但可能仍留有芽孢，故再重复一次，使彻底灭菌。一般凡能用高压蒸汽灭菌的物品均不采用此法灭菌过滤灭菌血清与糖溶液应用一般加热消毒灭菌方法，均会被热破坏

采用过滤除菌的方法可用滤板过滤器或滤膜过滤器二、辐射消毒

2.1原理辐射消毒主要是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡2.2方法日光曝晒法紫外线灯管消毒法：注意事项（灯管的输出强度岁使用时间的增加而