败酱草中10种元素提取及测定

败酱草中10种元素提取及测定

失败草是失败科草本植物的黄花和失败草的带根植物，也被称为泽草和苦菜。它是中国常用的中药。具有清热除湿、解毒、排脓、活血化瘀的功效，临床应用广泛。研究表明:败酱草对多种病菌都有抑制作用,能增强网状细胞和白细胞的吞噬能力,促进抗体形成及提高血清溶菌酶的水平,从而达到抗菌消炎的目的。目前,有关败酱草中微量元素的形态分析尚未见报道。本文结合微量元素形态分析流程,按照文献的方法进行消化,采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)对败酱草中10种元素的各种形态进行分析,并计算了提取率和颗粒吸附率,所得结果对败酱草的进一步研究具有一定的意义。1实验部分1.1仪器、试药和分析溶液ICPS-7510型电感耦合等离子体原子发射光谱仪(岛津国际贸易有限公司);PB210S型电子天平(上海精密科学仪器有限公司);720型电热板(浙江省诸暨县马剑电热仪器厂);SHZ-22型水浴恒温振荡器(太仓市华美生化仪器厂);pHS-3C型精密酸度计(上海雷磁仪器厂)。各种元素的标准溶液全部按照国家标准物质研究中心的标准溶液配制方法配制。Mn、Sr、Ca和Mg的质量浓度为1.0000g·L-1,Fe、Cu、Zn、P、Al和B的质量浓度为0.1000g·L-1;LSA-10大孔吸附树脂(陕西蓝深特种树脂有限公司);0.45μm微孔滤膜(上海市新亚净化器件厂);硝酸、盐酸、高氯酸、正辛醇均为分析纯;实验用水为超纯水(18.2MΩ·cm)。败酱草由延安市中医医院提供,并经过陈永锋副主任药师鉴定。1.2实验方法1.2.1空白实验方法精密称取败酱草0.1g,加6mLHNO3和1mLHClO4,密封过夜,次日于电热板上加热消解至溶液近干,取下冷却,加0.5mol·L-1的HCl5mL,用纯水定容至50mL,同时做空白实验。1.2.2总提取液的制备精密称取败酱草30g,加300mL纯水,浸泡1h,用传统中药煎煮法煮沸后保持微沸40min,煎煮三次,合并三次水煎液,将滤液浓缩定容至500mL,得总提取液。取总提取液400mL,经0.45μm滤膜抽滤,滤液为可溶态,滤膜上的残渣为悬浮态。悬浮态为总提取液与可溶态含量之差。1.2.3无机态含量的测定取可溶态溶液10mL,调其pH为3.0,以1mL·min-1通过LSA-10树脂柱(树脂预先经95%乙醇浸泡24h,装柱,用纯水冲干净后使用),用纯水以5mL·min-1的流速淋洗至流出液呈中性,收集试样流出液和淋洗液,混匀后,蒸发至近干,按1.2.1项消解后测定,即得各元素的无机态含量。然后再用甲醇(20mL×3)淋洗柱截留物,收集流出液,蒸发至近干,按1.2.1项消解后测定,即得各元素的有机态含量。1.2.4醇溶态模拟测定移取总提取液两份各10mL,用稀HCl和NaOH溶液调其pH为1.3和7.6,置于37℃恒温水浴振荡器中保温12h后,每份加10mL正辛醇,水浴恒温震荡2h,萃取2次,合并两次萃取的水相并蒸发至近干,按1.2.1项消解后测定,即得模拟胃酸和小肠液酸度下各元素在水溶态中的含量,差减法计算得到醇溶态含量。2结果与讨论2.1形态分析用ICP-AES测定由形态分析流程所分离后的湿法消解液,测定结果见表1。2.2元素悬浮态颗粒吸附率根据败酱草各形态分析测定结果,计算形态分析参数,结果如表2所示。提取率=水煎液含量/总量,表示该药实际可服用部分,所以水煎液中元素提取率是制定中药剂量或考察其毒性的重要依据。由表2知,Mg的提取率最高,其次是P和Fe,Cu的提取率最低,说明仍有大量的Cu未被提取出来。元素悬浮态颗粒吸附率=悬浮态含量/总量,Fe在悬浮态中含量远高于可溶态,可见Fe明显吸附于胶体上而被滤膜截留。在可溶态中,各元素都是无机态比例较高。Fe和Zn虽然以无机态为主,但有机态比率稍大一些。中药配位化学认为:中药有效化学成分是有机成分与微量元素组成的配合物。当中药的有机成分与微量元素形成配合物进人体内后,由于改变了原来的分子大小、电荷性和脂溶性特别是改变了立体构型,使其与一定载体、受体和酶易于结合,改变药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程,增加了对靶细胞和受体的选择性,从而达到提高疗效、降低毒副作用和耐药性。2.3正辛醇醇含量与药物相关性关系正辛醇是一种在结构上与人体内的碳水化合物和脂肪类似的长链烷烃醇,药理学中药物鉴定中常以正辛醇-水萃取体系测定KOW参数以评价药物的亲脂性及生物活性。如微量元素作为主要有效成分,正辛醇醇溶性微量元素含量与药性、药效存在密切关系。从表3可以看出,Fe、Cu和Al在胃、肠液酸度下KOW均大于1,其余元素的KOW值均小于1。表明在水煎液中,Fe、Cu和Al亲脂性、生物活性较强,而其他元素亲脂性、生物活性较弱;pH变化对Cu、Zn、B和Al的影响较大,说明这四种元素的生物活性与pH值密切相关,而pH值对其他元素影响不大。2.4返回率和相对标准偏差之间的差异以败酱草的可溶无机态为样品,进行加入回收实验。结果见表4。3微量元素的形态关