梅毒检测技术规范

全国梅毒检测技术规范（试行讨论稿）中国疾病防止控制中心二○一○年八月

前言为了加强全国梅毒检测工作的管理，提高检测质量，根据《中华人民共和国传染病防治法》、《中国防止与控制梅毒规划（-）》的精神，在卫生部及中国疾病防止控制中心的领导下，性病控制中心组织国内有关领域的专家制订了《全国梅毒检测技术规范》（下称"规范"）。本“规范”是基于我国现在梅毒检测工作的需要以及梅毒检测技术的发展，对梅毒检测有关的样品采集、检测办法、检测方略、质量管理等做出具体的规范规定，经上报卫生部并获准由中国疾病防止控制中心下发，合用于全国各级医疗、疾病防止控制、妇幼保健、采供血、出入境检查检疫等提供梅毒检测服务的机构。本“规范”起草单位：中国疾病防止控制中心性病控制中心本“规范”参加编写单位：中国疾病防止控制中心艾滋病性病防止控制中心、中国疾病防止控制中心妇幼保健中心、广东省皮肤性病控制中心、江苏省疾病防止控制中心、天津疾病防止控制中心、上海市皮肤性病医院本“规范”参加编写及审核人员：尹跃平、王千秋、王宝玺、邢文革、王临红、郑和平、傅更峰傅更锋、顾伟鸣、郑钟洁、龚匡隆、陈祥生。本《规范》编写工作联系人：魏万慧本《规范》合用于全国全部的梅毒检测实验室。本《规范》解释权属于中国疾病防止控制中心。

目录梅毒及其病原体样品的采集和解决梅毒血清学检测梅毒体病原学检测梅毒核酸检测实验室生物安全梅毒血清学检测实验室质量管理第一章梅毒及其病原体梅毒是由梅毒苍白螺旋体（Treponemapallidum）引发的一种性传输疾病，可引发神经、心血管等多系统损害，严重影响人群的身体健康。另外，梅毒亦可通过胎盘传给胎儿，造成自发性流产、死产或先天梅毒等。20世纪80年代，梅毒在我国重新出现，90年代末以来，全国梅毒报告病例数明显增加，呈快速流行的趋势，已成为我国重要的公共卫生问题。梅毒可分类为早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期梅毒（三期和晚期隐性梅毒），许多梅毒患者的临床体现并不明显或者缺少临床症状，病例的发现往往依赖于实验室的检测。梅毒的早期发现和及时治疗对有效防止和控制梅毒的流行含有重要的意义，梅毒的检测是病例发现、临床诊疗和疗效观察的重要手段。梅毒的检测办法不仅始终沿用许多传统的办法，并且，随着科学技术的发展，其新的检测技术与办法不停出现并广泛应用。因此，规范多种检测办法、制订不同检测方略、加强质量控制和开展试剂评定等对确保梅毒临床服务和现场防治的质量含有重要的意义。

第二章样品的采集和解决1范畴本章规定了用于梅毒检测的各类样品（涉及血清、血浆、全血、皮损部位组织液、淋巴穿刺液和脑脊液）的采集和解决办法，合用于梅毒血清学、病原学检测和核酸检测。2规范性引用文献《梅毒诊疗原则》中华人民共和国卫生行业原则WS273-，《性传输疾病实验室诊疗指南》中国疾病防止控制中心性病控制中心，《医疗机构临床实验室管理方法》卫生部，卫医发〔〕73号，《病原微生物实验室生物安全环境管理方法》国家环保总局,《全国艾滋病检测技术规范》中国疾病防止控制中心，3样品种类及对应的用途3.1血清、血浆、全血及脑脊液可用于梅毒血清学检测或核酸检测。3.2皮损部位组织液、淋巴穿刺液可用于梅毒病原体检测或核酸检测。4操作环节4.1采样前准备4.1.1根据检测项目的具体规定，拟定采集样品的种类、解决、保存及运输的时限和办法，按照临床采样技术规范的规定操作，恪守生物安全规定。4.1.2准备消毒用品、采样用品，涉及采血管及试管架、钝刀（刮勺）、载玻片、硬质废弃物容器等。4.1.3选择适宜的采样空间，受检者坐（卧）于适宜的位置。4.1.4根据样品编码的原则和办法，制订唯一性编码（编号），4.1.5使用样品统计本或记录表统计样品4.2采集和解决样品4.2.1血液4.2.1.1 血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取静脉血，室温下自然放置1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15min，吸出上层血清，置于适宜的容器中，备用。4.2.1.2 血浆：根据需要，用抗凝真空采血管抽取静脉血，1500～3000r/min离心15min，吸出上层血浆，置于适宜的容器中，备用。4.2.1.3 末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上小朋友可选择耳垂、中指、无名指或食指。1岁下列小朋友采用足跟部）。用采血针刺破皮肤，收集滴出的血液，备用。4.2.2皮损部位组织液4.2.2.1用于病原学检查：用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片。4.2.2.1用于核酸检测：用无菌生理盐水浸湿的棉拭子檫去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表面，取渗出液洗入细胞裂解缓冲液(1mL/管）的标本管中。4.2.3淋巴穿刺4.2.4 脑脊液：采用腰椎穿刺术获得，应由有关专业人员操作。4.3样品的保存4.3.1如标本需要保存，采样前应对样品管或玻片进行核对并编码。要将标签贴在试管的侧面或玻片的一侧，最佳使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。4.3.2血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可寄存于2～8℃，一周以上应寄存于低于-20℃的条件下。4.3.3病原学检查用组织液、淋病淋巴穿刺液标本需要首先将标本涂于干净载玻片，然后使用固定液进行固定、自然干燥干燥后可置于2～8℃4.3.4核酸检测用组织液、淋病淋巴穿刺液等标本均应置细胞裂解缓冲液后，放于—70℃4.4样品的运输4.4.1应符合生物安全规定；获得对应部门同意并由含有资质的人员专程护送。4.4.2应采用三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。4.4.2.1第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周边应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。4.4.2.2第二层容器：容纳并保护第一层容器，能够装若干个第一层容器。规定不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒解决。4.4.2.3第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签，注明数量、收样和发件人及联系方式，同时要注明“小心轻放、避免日晒、小心水浸、避免重压”等字样，还应易于消毒。4.4.2.4运输样品必须有统计。4.4.2.5特殊状况下经有关部门同意能够用特快专递邮寄样品，但必须按三层包装，将样品管包扎好，严禁使用玻璃容器。4.5样品的接受4.5.1样品包裹必须在含有解决感染性材料能力的实验室内、由通过培训的、穿戴防护衣、戴口罩、防护眼镜的工作人员在生物安全柜中打开，用后的包裹应及时进行消毒。4.5.2核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立刻将尚存留的样品移出，对样品管和盛器消毒，同时报告实验室负责人和上一级实验室技术人员。4.5.3检查样品的状况，统计有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等状况。如果污染过重或者认为样品不能被接受，应将样品安全废弃。并将样品状况立刻告知送样人。4.5.4接受样品时应填写样品接受单。

第三章梅毒血清学检测1范畴本章规定了梅毒血清学的检测办法、程序、成果报告、检测方略及质量控制。2规范性引用文献《梅毒诊疗原则》中华人民共和国卫生行业原则WS273-，《性传输疾病实验室诊疗指南》中国疾病防止控制中心性病控制中心，《SexuallyTransmittedDiseasesTreatmentGuidelines》美国疾病防止控制中心，《Theuseofrapidsyphilistests》WHO/TDR,3实验室基本规定实验室建筑与设施应符合《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（中华人民共和国卫生行业原则，WS233-）中Ⅱ二级生物安全防护实验室的规定，实验室人员应定时接受专业培训，配备对应的设备（如水平旋转仪等），以满足梅毒实验室检测工作的需要。4检测目的与要点4.1检测的目的4.1.1梅毒血清学检测可用于临床诊疗、血液筛查、流行病学监测等。4.1.2以临床诊疗为目的的检测是为了拟定梅毒感染的状况。4.1.3以血液筛查为目的的检测是为了避免梅毒的经血传输。4.1.4以流行病学监测为目的的检测是为了调查梅毒血清学感染率和发病率4.2检测要点4.2.2根据目的选择检测办法及检测方略。4.2.4可采用任何一类梅毒血清学检测办法作为筛查实验5．检测办法分类梅毒血清学检测涉及非梅毒螺旋体实验（非特异性梅毒抗体检测实验）和梅毒螺旋体实验（特异性梅毒抗体检测实验）两类办法。5.1非梅毒螺旋体实验，涉及快速血浆反映素环状卡片实验(RPR)、甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）、性病研究实验室实验(VDRL)等。5.2梅毒螺旋体实验，涉及梅毒螺旋体颗粒凝集实验(TPPA)、梅毒螺旋体血球凝集实验(TPHA)、梅毒酶联免疫吸附实验（TP-ELISA）、化学发光实验、梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(TP-RT)、FTA-ABS、梅毒IgM抗体检测（TP-IgM）和梅毒螺旋体蛋白印迹实验（TP-WB）等。6．不同血清学检测办法及其所需的检测样品检测方法样品种类血清血浆末梢全血脑脊液非梅毒螺旋体实验快速血浆反映素环状卡片实验(RPR)甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）性病研究实验室实验(VDRL)梅毒螺旋体实验梅毒螺旋体颗粒凝集实验(TPPA)梅毒螺旋体血球凝集实验(TPHA)梅毒酶联免疫吸附实验（TP-ELISA）梅毒免疫层析法-梅毒快速检测(TP-RT)荧光梅毒螺旋体抗体吸取实验（FTA-ABS）化学发光免疫测定实验（CLIA）梅毒IgM抗体检测（TP-IgM）梅毒螺旋体蛋白印迹实验（TP-WB）7．检测试剂全部应用于临床的检测试剂均必须是经国家食品药品监督管理局注册同意、在使用期内的试剂，其中RPR、TRUST、TP-ELISA应有批批检合格证。推荐使用临床质量评定敏感性和特异性高的试剂。8．检测办法8.1非特异性梅毒抗体检测非特异性梅毒抗体检测是以一定比例的心磷脂、卵磷脂及胆固醇混合物作为抗原，根据检测目定性或定量检测梅毒患者血中的抗类脂抗原的抗体。8.1.1快速血浆反映素环状卡片实验（RPR）-定性实验采用血清或血浆标本，置实验卡片的圆圈中，并均匀涂满整个圈内，在每个标本中精确地加1滴（17L）抗原，将卡片置于水平旋转仪上旋转8min，100±2r/min，立刻在亮光下用肉眼观察成果。8.1.2快速血浆反映素环状卡片实验（RPR）-定量实验定量实验是将原血清或血浆标本先在卡片的圆圈中中进行对倍倍比稀释后，再按照定性实验的办法对每一种稀释度的标本进行检测和观察成果。8.1.3甲苯胺红不加热血清实验（TRUST）-定性和定量实验 具体办法同RPR定性实验和RPR定量实验。8.1.4性病研究实验室实验（VDRL）-定性实验采用0.05mL血清或脑脊液标本置入反映板圈中，将血清涂布到整个圈内，用原则针头加入1滴（17L）抗原，并将反映板置水平旋转仪上旋转4min，180±5r/min，立刻置低倍显微镜下观察。8.1.4性病研究实验室实验（VDRL）-定量实验定量实验是将原血清或脑脊液标本先在反映圈中进行对倍稀释后，再按照定性实验的办法对每一种稀释度的标本进行检测和观察成果。8.2特异性梅毒抗体检测8.2.1梅毒螺旋体颗粒凝集实验（TPPA实验是用超声裂解梅毒螺旋体抗原，致敏明胶粒子，其致敏粒子与待检血清或血浆中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生肉眼可见的凝集，有效实验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。8.2.2梅毒螺旋体血球凝集实验（TPHA）TPHA实验用超声裂解的梅毒螺旋体菌体为抗原致敏经醛化、鞣化的羊或禽类红细胞，与待检血清或血浆中抗梅毒螺旋体抗体反映，产生肉眼可见的抗原抗体凝集，有效实验的阴性和阳性对照必须符合试剂盒规定。8.2.3梅毒酶联免疫吸附实验（TP-ELISA）ELISA实验是用包被在固相板条上重组的梅毒螺旋体抗原，与待检血清或血浆标本中的梅毒特异性抗体结合，再与酶标记的抗人免疫球蛋白单克隆抗体反映，形成抗原抗体复合物而使底物显色，用酶标仪测定成果。在实验中需要设立阳性和阴性对照，阳性和阴性对照成果必须符合试剂盒规定。8.2.4梅毒免疫层析法-梅毒快速检测（TP-RT）TP-RT为免疫层析实验，简便快速，普通可在10～30分钟内得出成果。以硝酸纤维膜为载体，重组的梅毒螺旋体抗原抗原线状固定在膜上，待检样品（全血、血清或血浆）沿着固相载体迁移，阳性成果在膜上抗原部位显示出有色条带。质控带显色为有效实验。8.2.5荧光梅毒螺旋体抗体吸取实验（FTA-ABS）将待检血清用吸取剂1:5稀释，阳性及阴性对照血清分别用PBS缓冲液和吸取剂1:5稀释，置37℃湿盒内，30min；每次实验必须设PBS缓冲液、吸取剂、PBS液1:5稀释的阳性和阴性对照血清、吸取剂1:5稀释的阳性和阴性对照血清共6个对照涂片，每个涂片分别加入10L稀释后的血清或缓冲液，置37℃湿盒内，30分钟；用PBS-Tween-80液洗玻片2次，每次5min，最后用蒸馏水洗一次，冷风干燥；每个涂片加10L按规定稀释的荧光抗体，置37℃湿盒内30min8.2.6化学发光实验（CLA）是用包被在固相板条上重组的梅毒螺旋体抗原，与待检血清或血浆标本中的梅毒特异性抗体结合采用发光底物，用发光仪测定成果。在实验中需要设立阳性和阴性对照，阳性和阴性对照成果必须符合试剂盒规定。8.2.7梅毒螺旋体蛋白印迹实验（TP-WB） 在每个反映槽中加2.0mL工作缓冲液，浸湿膜条5分钟，加入0.02mL待检样本，置水平摇床上(50r/min)，18～25℃反映45min；弃去反映槽中液体，加入2.0mL工作缓冲液，置水平摇床洗涤三次，每次5min；加入酶标抗体，置水平摇床反映30min；弃去反映槽中液体，加入2.0mL工作缓冲液，置水平摇床洗涤三次，每次5min；每槽加2.0mL底物，置水平摇床上反映8～10min；待阳性对照带显色清晰，加入1.0mL终止剂2min8.2.8梅毒IgM抗体的检测（TP-IgM）测定IgM抗体办法的基本原理是采用分离柱，使血清中的IgM和IgG按其分子量大小在分离过程中的沉降速度不同，将IgM和IgG分别收集，再进行FTA-ABS等实验。亦可采用抗IgM单克隆抗体的酶标法、蛋白质印迹法等进行检测。9检测方略与流程9.1 以临床诊疗为目的的检测方略9.1.1检测方略：可采用两种方略：9.1.1.1方略一：采用非梅毒螺旋体定性实验对样品进行初筛，对呈阴性反映的样品，可出具非梅毒螺旋体实验阴性（-）报告；对呈阳性反映的样品，用梅毒螺旋体实验复检，对呈阴性反映的样品，可出梅毒螺旋体实验阴性（-）报告；呈阳性反映的样品再进一步做非梅毒螺旋体定量实验，出具梅毒螺旋体实验和非梅毒螺旋体实验均为阳性的报告，同时报告非梅毒螺旋体定量实验滴度。出具报告时均需标明采用的具体办法。9.1.1.2方略二：采用梅毒螺旋体实验初筛检测，对呈阴性反映的样品，可出具梅毒螺旋体实验阴性（-）报告；对呈阳性反映的样品，需要进一步做非梅毒螺旋体定性实验进行复检，对呈阴性反映的样品，可出具非梅毒螺旋体实验阴性（-）报告；呈阳性反映的样品再进一步做非梅毒螺旋体定量实验，出具梅毒螺旋体实验和非梅毒螺旋体实验均为阳性的报告，同时报告非梅毒螺旋体定量实验滴度。出具报告时均需标明采用的具体办法。9.1.2 检测流程非非梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体定量实验报告检测办法及定量成果图1：以临床诊疗为目的的检测方略一梅毒梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体定量实验报告检测办法及定量成果图2：以临床诊疗为目的的检测方略二

9.2以血液筛查为目的的检测方略9.2.1 检测方略：采用高敏感的梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA办法）对样品进行筛检，出具梅毒螺旋体实验阳性（+）或阴性（）成果，普通状况下，对阳性者不需要再采用非梅毒螺旋体实验进行复检。9.2.2 检测流程梅毒梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果图3：以血液筛查为目的的检测方略9.3以流行病学监测为目的的检测方略9.3.1 检测方略：根据流行病学监测的目的选择不同的检测方略，涉及评定梅毒血清学累计感染率（梅毒螺旋体实验阳性率）、现患感染率（梅毒螺旋体实验和非梅毒螺旋体实验双阳性率）和梅毒高滴度（梅毒螺旋体实验阳性及非梅毒螺旋体定量实验滴度>1:8）感染率。9.3.1.1用于预计累计感染率的方略：采用梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA）办法对样品进行检测，报告梅毒螺旋体实验阳性（+）或阴性（）成果，阳性成果（+）者作为计算梅毒血清累计感染率的分子。9.3.1.2用于预计现症感染率的方略：采用梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA）办法对样品进行初筛，对呈阴性反映的样品，报告梅毒螺旋体实验阴性（）成果；对呈阳性反映的样品再用非梅毒螺旋体实验（如RPR或TRUST）办法进行定性检测，报告非梅毒螺旋体实验阳性（+）或阴性（）成果。梅毒螺旋体实验和非梅毒螺旋体定性实验成果均为阳性者作为计算梅毒血清现患感染率的分子。9.3.1.3用于预计高滴度感染率的方略：采用梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA）办法对样品进行初筛检测，对呈阴性反映的样品，报告梅毒螺旋体实验阴性（）成果；对呈阳性反映的样品再用一种非梅毒螺旋体实验（如RPR或TRUST）办法进行定性检测。对非梅毒螺旋体实验呈阴性反映的样品，报告非梅毒螺旋体实验阴性（）成果；对呈阳性反映的样本再做定量（滴度）检测，报告非梅毒螺旋体实验滴度。梅毒螺旋体实验阳性和非梅毒螺旋体实验定量检测成果为不不大于1:8滴度者作为计算高滴度感染率的分子。9.3.2 检测流程梅毒梅毒螺旋体实验（如TP-ELISA）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果图4：以预计梅毒累计感染率为目的的检测方略梅毒梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果图5：以预计梅毒现症感染率为目的的检测方略

梅毒梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体实验（具体办法）阴性报告检测办法及阴性成果阳性报告检测办法及阳性成果非梅毒螺旋体实验定量检测报告检测办法及高滴度(>1:8)成果图6：以预计梅毒高滴度感染率为目的的检测方略10．质量控制10.1血清学检测的非统计学室内质量控制非梅毒螺旋体实验的RPR和TRUST、以及梅毒螺旋体实验的TPPA、TPHA、TP-RT、TP-WB等均采用肉眼直接阅读成果，其实内质量控制采用非统计学办法进行。10.1试剂盒内部对照质控品即为试剂盒提供的阳性和阴性对照血清。试剂盒内部对照用于判断每次实验的有效性，但不能作为室内质控品使用。每个检测日，在检测样品前应先检测试剂盒内部对照，并且只能在同批号的试剂盒中使用。内部对照成果无效，则表明此试剂盒失效。10.10.1.2.1外部对照质控品，可采用商用质控品或自制质控品。质控品应包含阳性和阴性样品。非梅毒10.1.2.2下列状况需做质量控制：更换试剂批号、更换检测人员、10.1.2.3出现下列问题，提示存在质量隐患，应引发重视：运输包装、内盒或试剂盒的物理损伤；在包装内存在混杂物质；标签出现错误、缺失或笔迹含糊（特别是产品名称或出产厂家名称，批号和货号，失效期或/和生产日期）；泄漏或污染；置于过10.110.2血清学检测的统计学室内质量控制梅毒螺旋体实验的ELISA、CLA法等是通过临界值（Cut-off），判读成果，应采用统计学室内质量控制10.2.1试剂盒内部对照：10.2.2室内质控品：10.2.2.1室内质控品的使用和质量规定：每一次实验必须使用室内质控品，方便监控实验的重复性。同时能够理解各批试剂盒的批间或孔间差别。室内质控品的管间或瓶间变异必须不大于监测系统预期的变异（cv＜20%)10.2.2最惯用的质控图是Levey-Jennings质控图，10.2.2.外部质控品的均值和原则差应建立在实验室常规使用办法对外部质控品重复测定的基础上。普通采用在不同批次检测获得最少20个数据；如果仅做少量批次的检测，也最少做5个批次的检测，每个批次中不少于4个质控血清测定成果，以建立一种临时性的均值和原则差，当达成20批次数据后，替代临时性的均值和原则差。（1）算术平均值（）：代表一组质控血清测定的S/CO值的均值。为了统计学上有明显性意义，应当采用最少20次（天）所测得的外部对照质控血清S/CO值成果计算出平均值。（2）原则差（s）：是描述样品与均数之间离散程度的一种指标，是与质控血清S/CO值均值有关的预期范畴。一组S/CO值的原则差以s表达。（3）变异系数（cv）：是反映各次S/CO值相对于均值离散程度的一种指标，能够用来衡量检测的重复性或精密度。（4）控制限：由实验室根据对外部质控品检测成果的均值和原则差来拟定。例如12S质控规则的控制限为外部质控品S/CO均值加减2个原则差；13S质控规则的控制限为外部质控品S/CO均值加减3个原则差。10.2.2.4质控图是把检测数据与已拟定的（计算出的）“控制限”进行比较的图，包含一条中心横线和其上、下两条平行的控制线，并准时间次序点入本实验室每批次实验质控血清的测定值。质控图绘制环节涉及：（1）在常规条件下，对同一批血清持续测定20次（天）或以上，获得一组S/CO值，求均数（）和原则差（s）,超出2s或3s的数据不应删除。（2）将均值（）和原则差（s）分别在质控框架图中标示出来。以S/CO值作纵座标（Y轴），每一批次实验作横座标（x轴），绘制质控图。（3）从第21次起，将每次质控血清的检测成果依次点入该质控框架图中，检查进入质控状态。8.1.3实验室在报告实验成果之前必须评价质控数据，可通过图形统计的检查或由计算机审核成果来决定。现在有许多质控规则，惯用的是12S和13S规则。（1）告警（12S）：当外部质控品的S/CO值超出+2s范畴时，系统处在告警状态，应予注意，与否能够继续检测需要进一步观察。若将12S做失控原则，有较高的假失控概率，因此普通不采用。（2）失控（13S）：当外部质控品的S/CO值超出+3s范畴时，系统处在失控状态，本次实验成果不能被接受，可能是系统误差、随机误差或外部质控品稳定性下降所致。（3）漂移：持续几次（3～5次）外部质控品的S/CO值都落在均值的一侧则称为漂移，提示实验条件发生了较大的变化。（4）趋势：持续几次（5～7次）外部质控品的S/CO值几乎按一种方向分布时称为趋势，普通由参数的缓慢变化引发。质控规则的使用应检出随机误差和系统误差，即含有高的检出分析误差的能力，同时应含有较低的假失控概率。考察实验系统的可靠性应采用多规则质控方案，多规则质控办法能提高误差检出，并含有低的假失控概率。其要点为：出现一次2s范畴的变化时，系统处在告警状态，应予注意，与否能够继续检测需要进一步观察。出现下列状况时，应暂停检测查找因素：（1）出现一次超出3s范畴的变化；（2）持续两次出现同一方向超出2s范畴的变化；（3）持续四次出现同一方向的超出1s范畴的变化；（4）持续10次成果都在1s范畴内，但落在均值线的同一侧。10.2.2.5实验室应建立质控图分析及失控状况解决程序。当质控已有计划并恰本地执行时，规定可靠的均值和原则差用于计算质控限，将假失控概率降到最低。当出现失控时，对原有外部质控品重复测定或更换新的外部质控品进行测定不是最有效的办法，必须找出问题发生的因素，找出解除问题的办法，并消除因素，避免将来出现同样的问题。绘制和分析质控图的要点:（1）分析数据时，超出2s或3s的数据不应删除。（2）由专人负责建立质控图，每月定时召开质控分析会，讨论本月的质量控制状况。（3）建议长久和稳定地使用一种质量好的试剂，更换不同厂家的试剂后，须重新绘制质控图。改用新批号试剂如外部质控品测定出现较大变化也应重新制作质控图。使用新批号或不同厂家的试剂,必须在质控图上注明使用日期。（4）发现质控成果失控，应填写报告单，上交质量负责人，分析因素并决定与否发出检测报告。（5）使用新批次的外部质控品时，如测定值出现较大变化，须重新绘制质控图。变异系数（cv）不大于20％，表达外部质控品处在稳定状态。10.“即刻法”质控办法是在对同一批外部质控血清持续测定3次后，即可对第3次检查成果进行质控。具体计算办法以下：10.10.210.2.3.3计算SISI上限=X最大值-sSI下限=-X最小值s10.2.3.4将SI表1SI值表Nn3sn2sNn3sn2s31.161.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56（1）当SI上限和SI下限<n2s时表达处在控制范畴内，能够继续测定。继续重复以上各项计算。（2）当SI上限和SI下限有一值处在n2s～n3s值之间时阐明该值在2s～3s范畴，处在“告警”状态。（3）当SI上限和SI下限有一值>n3s值时阐明该值已在3s范畴之外，属“失控”。“即刻法”只能在前20次内使用，超出即可采用L-J质控图办法。10.3血清学检测室间质控开展梅毒血清学检测的实验室应参加各级性病防治机构或CDC组织的实验室能力验证，能力验证明验应涉及梅毒螺旋体实验以及非梅毒螺旋体实验的定性和定量两种检测办法。

第四章梅毒病原学检测1范畴本章规定了病原学检测的办法和用途。合用于对人皮损部位组织液、淋巴穿刺液的梅毒螺旋体检测。2规范性引用文献《梅毒诊疗原则》中华人民共和国卫生行业原则WS273-，《性传输疾病实验室诊疗指南》中国疾病防止控制中心性病控制中心，《SexuallyTransmittedDiseasesTreatmentGuidelines》美国疾病防止控制中心，《Theuseofrapidsyphilistests》WHO/TDR,3实验室基本规定实验室建筑与设施应符合《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（中华人民共和国卫生行业原则，WS233-）中Ⅱ二级生物安全防护实验室的规定，实验室人员应定时接受专业培训，配备对应的设备（如暗视野显微镜等），以满足梅毒病原学检测的需要。实验室的质量确保和实验室安全防护按本规范有关章节规定执行。4检测目的对早期梅毒的硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液涂片、淋巴穿刺液涂片等，可在显微镜下观察梅毒螺旋体的特殊形态和运动方式，判断与否存在梅毒螺旋体，用于梅毒感染的诊疗。5检测办法5.1暗视野显微镜检查5.1.1皮损部位组织液：无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀轻刮、挤压皮损表层，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检，在暗视野显微镜下观察，寻找含有特性形态和运动方式的梅毒螺旋体。5.1.2淋巴穿刺液：无菌操作下穿刺淋巴结，注入生理盐水并重复抽吸2～3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片镜检，在暗视野显微镜下观察，寻找含有特性形态和运动方式的梅毒螺旋体。5.2镀银染色检查基于梅毒螺旋体含有亲银性，可被银溶液染色，从而能够在镜下观察到银染的梅毒螺旋体。将标本涂于干净载玻片作一薄片，于空气中自然干燥。用固定液将涂片固定2～3min。用无水酒精洗涤玻片上的油污。加媒染剂于涂片上，微加热产生蒸汽，染30sec。水洗，加银染液于涂片上，微加热产生蒸汽，染30sec。水洗、待干，用油镜检查。5.3成果报告5.35.3.1.1暗视野显微镜检查：梅毒螺旋体为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物，长5～20m，直径不大于0.25.3.1.2镀银染色检查:显微镜下观察到染成棕褐色的梅毒螺旋体则报告5.3.2阴性未见到梅毒螺旋体，报告阴性成果。6质量控制检查人员应接受过梅毒螺旋体病原学检测的技术培训，方便对的地使用显微镜和识别梅毒螺旋体。

第五章梅毒核酸检测1范畴本章规定了梅毒螺旋体核酸定性检测的意义、实验室规定、检测办法、质量控制及成果鉴定等，合用于梅毒螺旋体核酸的测定。2规范性引用文献《生殖道感染检测的实验室办法》WHO，1999年《临床基因扩增诊疗实验室工作规范》卫生部,《临床基因扩增检查实验室管理暂行方法》卫医发[]10号，《全国艾滋病检测技术规范》中国疾病防止控制中心，核酸检测的意义对血浆、血清、皮损部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊液等标本的梅毒螺旋体核酸检测,在早期梅毒、神经梅毒和先天梅毒等诊疗，以及螺旋体现症感染和既往感染鉴别诊疗中含有一定的价值。另外，核酸扩增技术也可应用于梅毒螺旋体的耐药性监测、菌株流行病学分型。实验室规定4.1参考卫生部颁发的《临床基因扩增诊疗实验室工作规范》开展核酸检测工作4.2实验室设立应参考卫生部颁发的《临床基因扩增检查实验室管理暂行方法》中制订的临床基因扩增检查实验室基本设立原则。实验室应设立两个独立的工作区域：核酸扩增前区和核酸扩增后区，前区涉及试剂准备区和样品解决区，后区涉及扩增区和扩增产物分析区，均应设在不同的房间或区域。4.3建立与实验和实验室管理有关的原则操作指导书和制订严格的管理制度，工作人员必须充足理解各项规定并严格遵照执行。4.4进行核酸检测的人员须含有核酸检测实验室的上岗资格。5检测办法及程序5.1常规PCR核酸检测5.1.1办法检测办法为商品化试剂盒和实验室自建办法，商品化试剂应严格按阐明书操作。下面介绍的办法是实验室自建办法,用于梅毒螺旋体常规检测、耐药基因检测或基因分型研究。5.1.2试剂（1）PCR引物：梅毒螺旋体常规检测：普通使用扩增bmp、tpp47、polA等基因序列的引物。梅毒螺旋体耐药基因检测：现在已知阿奇霉素耐药基因采用23SribosomalRNA(rRNA)gene等基因序列的引物。梅毒螺旋体基因分型研究：惯用arp、tpr等基因序列的引物。（2）重要试剂：涉及核酸提取纯化、PCR所需的试剂。5.1.35.1.3.1核酸提取：可使用硅胶柱离心、磁性硅胶颗粒分离办法以及自动化仪器等商品化试剂或设备并按阐明书操作。DNA应置于-20℃保存，需长久保存的DNA应置于-805.1.3.2PCR扩增反映：PCR扩增反映体系涉及四种脱氧核苷酸（dNTPs）、PCR缓冲液、TaqDNA聚合酶、目的检测扩增引物（套式PCR涉及内引物和外引物），根据不同检测目的使用对应的程序进行扩增5.1.3.3扩增产物分析：扩增产物惯用分析办法是琼脂糖凝胶电泳法，与分子量原则比较，判断扩增片段与否在预期的分子量范畴内。根据检测目的还可采用限制性内切酶酶切分析、特异性探针杂交分析以及DNA序列分析等进行扩增产物分析。5.1.3.2成果鉴定和报告每一次检测需同时做阳性对照、阴性对照，只有阳性对照扩增出预期的片段、阴性对照没有扩增出任何片段、双份平行样品成果一致的状况下视为实验成立，可作出核酸检测阳性或阴性成果的鉴定。（1）核酸检测阳性：核酸扩增出现目的条带。（2）核酸检测阴性：核酸扩增未出现目的条带。6质量控制核酸扩增检测的质量控制应按照卫生部《临床基因扩增检查实验室管理暂行方法》进行，质量控制要考虑从样品接受到发出报告整个过程每个环节的管理过程，涉及：（1）人员；（2）实验室分区和环境；（3）仪器；（4）试剂；（5）操作过程；（6）外部质控品使用等。6.1实验室环境检测实验室应严格规定不同工作区的空气流向：从试剂准备区到样品解决区，然后到扩增产物分析区，不能逆向流动。6.2仪器设备加样器、温湿度计须经计量部门校准，每年一次；PCR仪、离心机能够委托公司校准，每年一次。冰箱、水浴箱用校准合格的温度计测量温度，并做好统计。6.3检测过程严格执行仪器和试剂的原则操作程序（SOP），不得私自修改。每次实验需同时使用试剂盒内的外部质控品；每次实验按照试剂盒阐明书的规定使用试剂盒提供的外部质控品，并满足外部质控品的规定。

第六章实验室生物安全1范畴本章规定了梅毒检测实验室安全防护。合用于全国各级各类梅毒实验室的安全防护。2规范性引用文献《实验室生物安全通用规定》GB19489-，《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则（WS233-）》中华人民共和国卫生行业原则，《消毒技术规范（）》中华人民共和国卫生部，《全国艾滋病检测技术规范）》中国疾病防止控制中心，3梅毒的生物危害梅毒螺旋体属第三类病原微生物，普通状况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传输风险有限，实验室感染后极少引发严重疾病，为含有有效治疗和防止方法的微生物。4梅毒有关检测的生物安全级别为了确保安全，对临床和现场的未知样本的检测梅毒血清学检测应在符合Ⅱ级生物安全实验室（BSL-2）规定的实验室中进行。如有艾滋病检测实验室，能够在艾滋病抗体检测实验室中进行。5生物安全确保方法5.1建立安全制度实验室主任是实验室安全的第一负责人，对实验室工作和环境的安全负责，负责制订全方面的实验室安全管理制度并监督贯彻。全部工作人员都应无条件恪守实验室安全管理制度，保护自己和别人的安全。梅毒血清学检测实验室应建立实验室的安全工作制度或安全原则操作程序（S-SOP），每年都应对安全制度或安全原则操作程序及其贯彻状况进行检查和修订，并有统计。5.2培训和管理5.2.1实验室应进行全员安全培训，全部的血液、未固定的组织和组织液样品，均应视为有潜在的传染性，都应以安全的方式进行操作。全部管理和检测人员都应接受省级以上梅毒、艾滋病检测实验室主持的安全培训，涉及上岗前培训和复训，并接受管理人员的监督。5.2.2必须对新上岗人员进行安全教育和培训，使他们清晰实验室工作的潜在危险，通过考核等方式确认他们含有安全操作的能力后方可单独工作。5.2.3必须对新调入人员、外来合作、进修和学习的人员进行生物安全培训，经实验室主任同意后，方可进入实验室。5.2.4生物安全培训和监督应有客观详实的统计。5.3个人保健和防护5.3.1遇有手部皮肤有开放性伤口及其它不适于工作的状况，应暂停工作。5.3.2应为每一名在梅毒5.3.35.3.4工作人员上岗前必须进行梅毒、HIV抗体和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒标志物检测，应接种乙肝疫苗。应每年对工作人员采血检测梅毒、5.3.55.3.65.3.7操作过程中，如发现防护服被污染应立刻更换，如手套破损，应立刻丢弃、洗手并换上新手套。5.3.85.4安全操作5.4.1试剂及样品的管理应严格按规定妥善保存血清及其它体液样品，应按有关规定设立专门储存阳性血清、质控品的血清库，应上锁并指定专人管理。5.4.2实验室的清洁和消毒工作完毕应对工作台面消毒，推荐用0.1～0.2%的次氯酸溶液消毒；用消毒液清洗后要干燥20min以上；操作过程中如有样品、检测试剂外溅，应及时消毒。5.4.3样品的采集和解决抽取静脉血液（或以其它方式收集血液样品）时要注意安全，应使用一次性注射器，戴手套，谨慎操作，避免血液污染双手。应小心避免被针头和其它利器刺伤。离心样品时要使用密闭的罐和密封头，避免离心时液体溢出或在超/高速离心时形成气溶胶。5.4.4样品的带入、带出和操作5.4.4.1不得将非实验室物品带入实验室。5.4.4.2打开样品容器时要小心，避免内容物泼溅。要核对样品与送检单，检查样品管有无破损和溢漏。如发现溢漏应立刻将尚存留的样品移出，对样品管和盛器进行消毒，同时要按照程序报告有关负责人。5.4.4.3要检查样品的状况，统计有无严重溶血、微生物污染、血脂过多以及黄疸等状况。如污染过重或者认为不能接受，则应将样品用安全方式废弃，同时将状况告知送样人。5.4.4.4将样品转送到其它实验室时，应避免对工作人员、患者或环境造成污染。护送样品的人应清晰接受地点和接受人，实验室负责人或其指定的人员应及时确认样品已送达指定的实验室，被转入安全位置并得到妥善解决。5.4.4.5被污染或可能污染的材料在带出实验室前应进行消毒。用后的包裹应进行消毒。5.5使用利器注意事项5.5.1应尽量避免在实验室使用针头、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺伤。如果必须使用，在解决或清洗时应采用方法避免刺伤或划伤，并应对用过的物品进行消毒。5.5.2应使用安全针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，以减少直接接触血液和刺伤的危险性。5.5.3应将用过的锐器直接放入耐穿、防渗漏的利器盒，用过的针头应直接放入结实的容器内，消毒后废弃5.5.4严禁将使用后的一次性针头重新套上针头套。严禁用手直接接触使用过的针头、刀片等利器。6污染物解决6.1应按照《实验室生物安全通用规定》（GB19489-）和《消毒技术规范（）》处置实验室废弃物。6.2梅毒血清学检测实验室产生的全部废弃物，涉及不再需要的样品和其它物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行解决或废弃。6.3梅毒检测实验室惯用的消毒办法6.3.1物理消毒办法6.3.1.1高压蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;6.3.2化学消毒办法6.3.2.1含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯～5000mg/L）6.3.2.275%乙醇6.3.3梅毒检测实验室物品惯用的消毒办法6.3.3.1废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠。6.3.3.2生物安全柜工作台面和仪器表面：75%乙醇。6.3.3.3溢出物：5000mg/L次氯酸钠。6.3.3.4污染的台面和器具：mg/L次氯酸钠,也能够用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。

第七章梅毒血清学检测实验室质量管理1范畴本章规定了梅毒血清学检测实验室质量管理有关内容，涉及质量确保、质量控制和质量评价，合用于各级实验室梅毒检测的质量管理。2规范性引用文献《性传输疾病实验室诊疗指南》中国疾病防止控制中心性病控制中心，《医疗机构临床实验室管理方法》卫生部，卫医发〔〕73号，《病原微生物实验室生物安全环境管理方法》国家环保总局，《全国艾滋病检测技术规范》中国疾病防止控制中心，3质量确保3.1行政支持应将梅毒检测实验室的建设、完善和质量管理纳入地方卫生行政规划，确保明验室负责人和重要技术人员队伍的稳定，确保明验室空间和设备需要，并进行经常性监督检查。梅毒检测实验室能够与HIV抗体检测实验室有效地结合。人员培训检测技术人员需通过上岗培训和在岗持续培训。上岗培训内容最少应涉及：梅毒检测有关基础知识、梅毒有关检测技术及管理规定、实验操作、临床意义、质量确保与质量控制和生物安全等。规定掌握有关专业知识和技能，能独立纯熟地操作并经考核合格，持证上岗。在岗持续培训指在工作中要根据需要接受复培训，实验室技术人员最少每3年1次。实验室在使用新办法前，须对技术人员进行培训并进行考核，获得资格后方可开展对应工作。环境条件血清学检测实验室梅毒血清学检测需要满足实验室管理规定和确保生物安全的条件。在含有HIV血清学检测实验室的状况下，可与HIV检测共享空间和设备，其规定参考《全国艾滋病检测工作管理方法》的规定。3.3.2病原学检测实验室参见《医疗机构临床实验室管理方法》，可与其它开展性病显微镜检测的实验室共享空间，但需要有相对避光的区域。3.3.3核酸检测的实验室参见《临床基因扩增检查实验室管理暂行方法》，可与开展其它微生物核酸检测的实验室共享空间和设备。样品采集、运输和解决严格按照本规范第一章规定执行。3.5检测办法和试剂的选择用于临床诊疗的检测办法应使用经国家食品药品监督管理局注册同意的试剂，应选择敏感性高、特异性好的试剂。性病参比实验室和省级性病中心实验室应定时组织开展梅毒诊疗试剂的临床质量评价和新办法与技术的评定。试剂质量评价办法参见本章5.2.6。各实验室更换试剂批号时，应进行平行实验，即新批号试剂在测定质控品（已知成果）时能够获得与原试剂相似成果的状况。全部试剂盒须严格按规定妥善保存。试剂盒拆封时，要统计拆封时间，全部试剂严格控制在使用期内使用。用内部质控品来控制不同批号之间的试剂差别。3.6设备维护与校准3.6.1设备校准实验室应设立惯用仪器的维护及校准制度，以确保检测工作正常运转。必须经国家法定部门定时（每年最少1次）校准的仪器最少涉及：酶标仪/洗板机，加样器，温度计，高压灭菌器。加样器、温湿度计须经计量部门校准。其它精密仪器及出具实验成果的仪器，如生物安全柜，旋转仪、离心机等也须定时校准。3.6.2设备维护及使用纪录3.6.2.1酶标读数仪、洗板机每个工作日核对滤光片波长，检查洗板机管道与否畅通，与否有漏液现象。定时清洁仪器表面，保护光学零件不沾灰尘。定时（每月最少1次）检查洗板机洗涤时各孔与否与对应的冲洗头对位良好；负压与否符合规定规定。定时（每年最少1次）检查、清洗滤光片，如果出现破裂或霉点须更换；根据仪器内含有的校准程序或使用校准板，对滤光片的精密度进行校准并保存统计。实验过程中发现异常状况，应随时进行解决，可根据使用状况更换必要的部件。3.6.2.2RPR/TRUST用水平旋转仪每次使用前应对水平旋转仪的旋转速度和幅度进行校准，旋转速度范畴：100±2r/min，旋转幅度采用画圈法，旋转时圈直径应在2±0.2cm.3.6.2.3移液器定时（每年最少1次）校准，发现异常状况应随时进行校准。标定办法涉及有色溶液光谱分析法、称量校准法、同位素计数法以及使用配套校准盒等。校准多道移液器时，必须确保每一种加样头都能持续、精确加样。移液器的精密度应在厂家阐明书规定的范畴内。范例用蒸馏水称量法标定移液器：在室温22℃无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置一种小三角烧瓶，用待校准的移液器吸取寄存过夜的蒸馏水加入烧瓶底部，称重并计算蒸馏水重量，持续称重10次。加蒸馏水的量根据待校准移液器的规格而不同（表5），10次校准称量均在规定的重量范畴内为合格，贴上合格标签，注明校准日期，不合格移液器要请生产厂家进行校准。填写和保存校准统计。表5称重法校准移液器方案移液器规格蒸馏水量规定重量范畴0.5～521.75～2.25mg1～10109.8～10.2mg40～2007069.4～70.6mg200～1000300298.0～302.0mg1～5mL20001990.0～.0mg2～10mL35003485.0～3515.0mg3.6.2.4冰箱每天检查和统计冰箱温度，并做好统计。使用通过计量部门校准合格的温度计测量冰箱的实际温度。3.6.2.5离心机，生物安全柜，高压灭菌器等，每次使用前检查仪器与否处在正常运转状态，并做好统计。3.7实验耗材 实验室需选购质量优良的耗材，以确保检测工作安全和成果的可靠性，并定时（每批次）或在更换产品时对耗材进行质量评价。3.8文献和文献管理3.8.1原则操作程序（SOP）3.8.1.1建立SOP文献各级梅毒实验室应建立覆盖全部有关的SOP文献。梅毒检测实验室的SOP文献最少应涉及：（1）样品的接受、登记、解决、保存和运输；（2）检测办法和环节；（3）试剂使用和保存；（4）仪器的使用维护和校准；（5）质量控制规定及程序；（6）成果报告；（7）实验室数据、有关文献统计与保存；（8）实验室安全防护及实验室的清理和消毒。省级中心实验室的SOP文献最少应涉及：满足上述梅毒检测实验室的SOP文献外，还应并涉及：阳性样品库管理；省级实验室网络质量确保及质量控制实施程序；省级试剂质量评价方案；实验室现场督导、检查和考核办法。3.8.1.2SOP最少应涉及下列内容（1）标题和编号；（2）编写和修订日期；（3）编写和修订人员姓名；（4）办法、目的和应用范畴；（5）检测设备；（6）试剂及使用期；（7）安全防护有关环节；（8）成果的解释和报告；（9）附录，涉及有关的附加文献如原则表格、设备和试剂盒阐明书等。3.8.1.3SOP编写及修订SOP文献由岗位工作人员起草，实验室主任审定。SOP应做到定时修订，修订应当在实验室主管人员（技术负责人）的领导下进行。全部工作人员要在所从事工作的SOP文献上签名表达已经阅读并掌握了有关内容。3.8.1.4实验过程中应严格执行原则操作程序（SOP），不得私自修改。3.8.2实验原始统计表应按实验规定，设计实验操作原始统计表，便于指导实验人员加样。要注明试剂盒厂家、测定办法、批号、效期、操作人员和复核人员姓名及检测日期。3.8.3成果报告检测成果的报告应在满足试剂盒及外部质控品成果规定的前提下进行。试剂盒及外部质控品不合格，样品需要重新检测；复核人对检测成果进行认真复核并对成果提出结论、签发人对实验结论进行审核、分析、总结、签字。3.8.4样品登记和保存收到样品后，建立唯一编码，及时登记有关信息，涉及受检者姓名或代号、试管编号、送检单位、人群类别、检查成果、送检日期、报告日期、备注（必要时统计通信地址）等。样品的保存统计应涉及样品的类型、贮存量、贮存起始时间、贮存地点（或/和位置）以及样品保管人姓名。3.8.5文献存档实验原始统计表、打印数据、免疫印迹实验的膜反映条带或其照片、检测统计表、样品登记、样品保存统计以及仪器设备维修和校准统计、人员培训统计等都应当妥善存档保存5年以上。最佳同时使用计算机保存多种文献和统计。4质量控制 见各有关章节。5质量评价涉及内部质量评价和外部质量评价。5.1内部质量评价内部质量评价指由本实验室组织的质量评价，实验室应定时组织内部质量评价，应涉及样品接受、检测、保存至发出检测报告的各个环节。省级中心实验室应通过资格认证，建议通过实验室认证承认，并按照认证承认的有关规定建立质量评价机制。5.2外部质量评价外部质量评价由本实验室之外的机构或单位组织，涉及对质量确保和质量控制工作的评价，职能工作考核重要是评价实验室质量确保工作，能力验证（PT）或室间质量评价重要是评价实验室质量控制工作，是检查实验室对未知样品获得对的成果的能力。全部梅毒检测实验室必须参加外部质量评价，省级中心实验室应参加国家级职能工作考核和PT，其它实验室应参加省级职能工作考核和PT。5.2.1职能工作考核5.2.1.1组织者：中国疾病防止控制中心性病控制中心参比实验室和性病艾滋病防止疾控中心参比实验室共同负责省级中心实验室职能工作考核的组织，省级中心实验室负责辖区内梅毒实验室的职能工作考核的组织工作。5.2.2.2频度：每年对实验室进行一次职能工作考核。5.2.2.3方式：职能工作考核采用问卷调查和现场评价相结合的方式进行。全部实验室必须接受问卷调查，可对部分实验室（5～10%）进行现场抽查。（1）问卷调查1）省级考核最少应涉及下列内容：人员培训及能力，环境条件，仪器设备使用及校准，管理性文献及实验纪录，检测报告，试剂使用状况，样品接受及保存状况，质量确保和质量控制。国家级考核除上述内容外，应涉及：全省实验室网络建设、检测、培训、试剂考核、省级职能工作考核、PT、现场督导等状况。根据需要问卷内容可进行合理调节。2）考核程序：由组织者发放问卷，各参评实验室应严格按照规定，根据当年实际状况逐项如实填写实验室问卷调查表，并在规定时间内反馈。3）考核成果鉴定：组织者接到调查问卷后，根据评分原则对各实验室的问卷进行汇总、统计、分析和评定。必要时可调用有关实验的原始统计进行分析核查。分析各实验室考核成果，并进行评分和评定：90分以上为优秀，80－90分为良好，60－80分为合格，60分下列为不合格。（2）现场评价1）评价内容现场评价最少应涉及：实验室人员构成及其职责分工；实验室分区、布局、恒温设施；仪器设备及其使用、校准统计；质量确保文献、实验室SOP文献及原始统计；实验室的安全防护方法，安全用品及安全规程；消毒与污物解决办法及设施；检测资料数据库的建设、存档、备份、安全和保密；样品保存和安全；开展的梅毒检测项目和检测试剂。省级中心实验室现场评价最少应涉及：除上述内容外，涉及阳性样品库的管理，全省实验室网络建设、培训、实验室管理、质量确保等状况。2）工作程序有关梅毒检测的实验室人员全部到场，报告人员构成及其职责分工、正常状况下实验室收样、检测、直至发出报告的全过程。全方面听取上级主管部门和实验室人员介绍历年检测工作状况报告、存在问题、对专家组的工作建议和此后工作的构想。实验室应提供对应的文字资料和数据。对实验室人员业务素质、仪器设备、场地布