口腔生物学第三章

影响双螺旋结构稳定性的因素影响双螺旋结构稳定性的因素有氢键、磷酸酯键、钠离子、碱基堆积力、碱基对之间的挤压及抵御等DNA重组技术可以应用于哪些方面？(至少写出3个)答：1.协助确定致病菌及其毒力因子；了解基因的结构、排列、表达及功能；协助疾病的早期诊断；通过基因工程可大规模合成来源有限的药用蛋白质或研制基因工程疫苗；应用基因疗法治疗基因缺陷型疾病。简述人工构建的质粒的构成(1)Ori区，质粒复制的起始点Par区，保证在细胞分裂过程中，质粒被均等地分配至子细胞；MCS区，该区含有多个单一性限制性核酸内切酶酶切点，便于在此区将质粒切开而加入外源性DNA筛选区，耐抗生素基因或B-半乳糖苷酶基因简述釉基质蛋白在釉质发育中的作用。答：(1)启动釉质矿化。作为晶体生长的支持相。调节晶体生长。7、简述肿瘤细胞转移过程？答：肿瘤细胞侵入局部组织基质.肿瘤细胞进入脉管系统，包括血液循环和淋巴系统.肿瘤细胞在远处脉管黏附和形成癌栓。肿瘤细胞出脉管并在继发组织器官定位生长，形成转移病灶。转移病灶继续扩散，形成新的转移病灶。请简述【中心法则】的内容物种的多样化是由DNA决定的。DNA可进行自我复制并将复制的遗传信息传递给子代，使物种维持高度稳定。②以DNA序列为模板，"复制”多套MRNA用于蛋白质合成。③以mRNA序列为氨基酸装配蓝图，合成特定蛋白质，通过后者展示出丰富多彩的生命。简述遗传密码的性质答：①所有密码都由三个连续的核苷酸组成；②64个密码子中有3个终止密码1个起始密码；③密码具有简并性④密码具有通用性釉基质蛋白有哪些。答：1.釉原蛋白，釉质分泌阶段釉基质的主要成分；釉蛋白，成釉细胞最早分泌的釉基质蛋白；成釉蛋白；釉丛蛋白，发育期和成熟期釉基质中的酸性蛋白质；蛋白水解酶。7.说出II型限制性内切酶的几个特征有特定的识别序列，通常为4-6个碱基对。切割点位于识别序列内的固定位置上。DNA被切割后，其5‘端有磷酸基因。3'端有羟基基因。酶切后形成粘性末端或平齐末端。7.简述釉基质蛋白在釉质发育中有何作用。答：(1)启动釉质矿化，釉基质的矿化最先发生于釉牙本质界，釉基质既参与矿化核晶的形成又是釉基质中矿物盐的贮库；5.作为晶核生长的支持相，釉基质蛋白表面疏水基团相互结合形成的隧道样结构，这种结构为晶体在隧道内生长提供了合适的生长空间和支持；调节晶体生长，通过控制釉基质蛋白在晶体表面的数量、部位可调节晶体的大小、形态与生长方向。4.简述蛋白质合成的步骤1、氨基酸的活化2、蛋白质合成的起始3、肽链的延伸4、蛋白质合成的终止遗传密码的性质连续性：所有的密码都是由3个连续的核苷酸组成，相邻的两个密码之间没有间隔的核苷酸存在；64个密码子中有3个终止密码（UAA、UGA、UAG）,其余61个均能编码氨基酸，其中AUG为起始密码；简并性：即一种氨基酸有一个以上的密码（色氨酸和甲硫氨酸除外，它们只有一个密码）；通用性：即不同物种或同一物种的各种蛋白质中，密码都是相同的；方向性：密码子及组成密码子的各碱基排列具有方向性，翻译时的阅读方向只能是5T3'；摆动性：即密码子与反密码子之间的配对并不严格遵守常见的碱基配对规律，这也使得1种tRNA能够识别mRNA的1—3种简并性密码子核酸杂交的应用及临床意义答：1.采用核酸杂交法与传统的牙周病研究所采用的生化法鉴定细菌相比较，可大大加速了牙周病致病菌的研究和监测在临床检查的基础上，应用核酸杂交法探查个体牙周病的致病菌，协助早期诊治及预后判断将所查损害区的致病菌情况作为判断牙周病是否处于进展期的重要指标根据病损区可疑致病菌的抑制或减少情况，检测疗效，便于调整治疗方案简述口腔肿瘤细胞的转移过程。肿瘤细胞侵入局部组织基质；肿瘤细胞进入脉管系统，包括血液循环和淋巴系统；肿瘤细胞在远处脉管黏附和形成癌栓；肿瘤细胞出脉管并在继发组织器官定位生长，形成转移病灶；转移病灶继续扩散，形成新的转移病灶。简述转化、转染、转导的区别答：转化是指受菌体捕获和表达质粒载体DNA分子的生命过程；转染是专指受菌体捕获和表达噬菌体DNA分子的过程；转导是利用噬菌体颗粒为媒介，将外源DNA转移至受体菌并得到表达的生命过程。1、基因点突变分类及其各自特点答：①同义突变，指碱基替换后，一个密码子变成了另一个密码子，但所编码的氨基酸还是同一种，实际上并不发生多肽序列的改变错义突变，指碱基替换后形成了新的密码子，导致所编码氨基酸发生改变，可能影响基因产物的功能无义突变，指一个编码氨基酸的密码子，在发生点突变后变成一个终止密码子，使多肽合成提前终止【DNA结构模型】DNA分子是互相旋转的两条长链，为一种双螺旋形式。每一条链主干由相互排列的糖和磷酸组成，两条链的极性相反，为反向平行。②碱基不是随机配对，A只能与T配对，C只能与G配对。【DNA多聚酶】有三种。其中DNA多聚酶III是DNA合成与复制中的主要合成酶。DNA多聚酶还需在下列因素的参与下方能合成DNA：①DNA的前体材料，四种脱氧核苷酸②镁离子的存在③一小段DNA或RNA引物④一个DNA模板7.遗传疾病的分类有哪些？答：染色体病，单基因病，多基因病，线粒体病，体细胞遗传病。论述题试说明真核细胞与原核细胞在基因转录翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异表现在哪些方面答①在真核细胞中一条成熟的mRNA链只能翻译出一条多肽链很少存在原核生物中常见的多基因操纵子形式。真核细胞DNA与组蛋白和大量非组蛋白相结合只有一小部分DNA是裸露的。高等真核细胞DNA中很大部分是不转录的大部分真核细胞的基因中间还存在不被翻译的内含子。真核生物能够有序地根据生长发育阶段的需要进行DNA片段重排还能在需要时增加细胞内某些基因的拷贝数。在真核生物中基因转录的调节区相对较大它们可能远离启动子达几百个甚至上千个碱基对这些调节区一般通过改变整个所控制基因5'上游区DNA构型来影响RNA聚合酶与它的结合。在原核生物中转录的调节区都很小大都位于启动子上游不远处调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶与它的结合。真核生物的RNA在细胞核中合成只有经转运穿过核膜到达细胞质后才能被翻译成蛋白质原核生物中不存在这样严格的空间间隔。许多真核生物的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程才能顺利地翻译成蛋白质牙釉质形成的分子机制：答：牙釉质的发生与成熟可分为两个阶段：釉质分泌期和釉质成熟期：釉质分泌期：在牙冠特定区域从成釉细胞分泌釉基质开始至釉基质分泌结束。釉质分泌期主要进行釉质的形态发生，成釉细胞以分泌有机成分为主，所形成的釉基质有机成分含量高，矿化不均。先形成的釉基质先矿化，因此深部较浅表釉基质矿化程度高。釉质成熟期：从釉质分泌结束至牙萌出为止。釉质成熟期主要进行釉质的矿化，此期的成釉细胞虽然亦产生和分泌少量蛋白质，但主要以激活和产生蛋白酶、向釉质输送矿物盐以及吸收釉质中水和分解的有机成分为主。经过这一阶段发育成熟的釉质成为高度矿化组织，釉质中仅残留极少量有机物。论述非结构基因的定义及其结构:非结构基因：结构基因两侧的一段不编码的DNA片段(即侧翼序列)，参与基因表达调控。它包含：启动子(Promoter)：RNA聚合酶特异性识别结合和启动转录的DNA序列。有方向性，位于转录起始位点上游。增强子(Enhancer)：与反式作用因子结合，增强转录活性，在基因任意位置都有效，无方向性。沉默子(Silencer):基因表达负调控元件，与反式作用因子结合，抑制转录活性。终止子(Terminator)：是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列。聚合酶链反应（PCR）的原理是什么？答：DNA的合成是以一股DNA单链为模板，在引物存在下，DNA聚合酶沿模板以5'到3'的方向延伸。PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧顺序互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。扩增包括3个步骤;DNA变性，引物与靶DNA退火，引物延伸。变形链球菌的致病性有哪些？变链菌群的胞壁表面物质可以使其黏附在牙齿表面，并能促进其他细菌在牙面上的黏附和定植；变链菌群可以利用食物中的碳水化合物（通常为蔗糖）作为底物合成葡聚糖和多糖，促进菌斑的形成；变链菌群可以产酸（主要为乳酸）造成局部环境的低pH值，使耐酸性有机体在局部富集，造成脱矿。8、论述rRNA特点？答：（1）长度适中，通常为1200—1900个核苷酸，能够提供足够的信息但又不会过长。（2）广泛分布于所有具有细胞结构的生物，而且进化过程现对缓慢。其中保守区可用于构建所有生命的统一进化树，而易变的区域可用来区别属或者种。（3）rRNA基因的水平转移非常难发生，因为它们的功能十分基本且重要，需要翻译机制的精细调控才能够正常实现功能。1.简述成釉器发育到钟状期后，牙体组织进入的形成阶段顺序答：①前成釉细胞的分化；②前成牙本质细胞和成牙本质细胞的分化；③牙本质的形成；④成釉细胞的分化；⑤釉质的形成。1.什么是细胞凋亡。答：细胞凋亡是细胞主动性的程序性死亡，表现为细胞染色体DNA片段化，细胞皱缩分解成凋亡小体，最终为其他细胞吞噬而清除。细胞凋亡是细胞增殖的必要补充机制，以确保所有组织的自我稳定，并在机体发育和组织行使功能中起作用。细胞凋亡的过程收到了严格的调控，细胞凋亡的缺陷可以导致细胞的过度增生。试述聚合酶链反应的基本原理、步骤及其意义。答:PCR是利用DNA合成的原理，合成两个与靶DNA两侧序列互补的引物，在体外进行靶DNA的重复合成。PCR扩增包括3个步骤：ADNA变性：通过加热使靶DNA双链解离成两条单链。b引物与靶DNA退火：降低温度至适当水平，促使两个引物根据碱基互补的原理分别结合至靶DNA两条链的3'末端。c引物延伸：在DNA聚合酶催化下，引物沿着靶DNA3'末端向5'末端延伸。PCR在很多领域都有广泛的应用：分离已知基因；检测微量DNA；遗传性疾病、肿瘤的诊断。简述核酸分子杂交的技术过程1、探针的制备：核酸探针是指能与特定核酸序列发生特异性互补的已知核酸片段，可用于检测待测样品中是否存在与探针相同或相近的DNA序列。核算探针有示踪物。2、待测核酸的处理：在这个过程中，通过虹吸或电泳的作用将待测双股DNA转移、固定到固相基质如硝酸纤维素膜上，经一定温度或碱变性使DNA双股螺旋解开成两股单链DNA，这过程叫变性3、杂交与漂洗：将带有待测DNA单链的膜放入含核酸探针的溶液中，当探针与待测DNA单链具有互补序列时，讲发生杂交，所形成的的杂种分子很难再解链，因此，可以用漂洗法去掉游离的没有杂交上的探针分子4、结果分析：可通过放射自显影的方式或其他化学反应确定是否有杂交发生1.简述葡糖基转移酶共同特点：1.基因长4000-5000个碱基，编码约1500个氨基酸；在GTF的氨基端具有一段30个氨基酸的信号肽，使得GTF在细胞内合成后分泌至细胞外；信号肽之后是一段200-300个的氨基酸段在各菌种的GTF间各不相同，这说明这段氨基酸序列在进化中易变，故称易变段；易变段之后是由1000余个氨基酸组成的一个长段，其中有很多区域的氨基酸序列在各GTF中使相同或相似的，它们在细菌的进化过程中，属于进化不活跃段，又称保守段。在保守段内可以穿插一些易变段。一.试述变形链球菌群产生的胞外酶及其作用。答：（1）葡糖基转移酶GTF：对细菌的粘附和支持细菌的营养起重要作用；（2）果糖基转移酶FTF：综合高分子量水溶性和不溶水果聚糖，有些能综合葡聚糖，能裂解蔗糖并利用其中的果糖基合成果聚糖；（3）蔗糖酶：催化蔗糖的葡糖苷键的水解酶，蔗糖被水分解成等分子比的葡萄糖和果糖；（4）葡聚糖酶：水解水溶性葡聚糖，释放异麦芽糖和葡萄糖。人工合成的质粒的结构特点及用途是什么？答：1,环状DNA分子能够自我复制，或整合到染色体上，随染色体复制。2,有多个限制酶切点（便于切割）。3，有标记基因（便于进行检验）。用途：在分子克隆中，质粒常被用做外源DNA载体，将外源DNA插入质粒后再将该重组质粒转化大肠杆菌。一、论述核糖体RNA的特点以及其对提示亲缘关系的作用。长度适中，通常为1200-1900nt，能够提供足够的信息但又不过长。完全广泛分布于所有具有细胞结构的生物，而且进化过程相对缓慢。其中保守区可用于构建所有生命的统一进化树，而易变的区域可用来区别属或者种。rRNA基因的水平转移非常难发生，因为它们的功能十分基本且重要，需要翻译机制的精细调控才能够正常实现功能。在众多的生物大分子中，最适合于提示各类生物亲缘关系的是rRNA，尤其是16SrRNA被普遍认为是一把好的谱系的“分子尺"这是因为：rRNA参与生物蛋白质的合成过程，其功能是任何生物都必不可少的，而且在生物进化的漫长经历中其可能保持不变。在16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列区域又有中度保守和高度变化的序列区域，因而它适用于进化距离不同的