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文档简介

细菌的简单染色法宋国丽1、学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的简单染色法。2、初步认识细菌的形态特征。3、学习训练显微镜及无菌操作技术。实验目的

简单染色是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。

常用碱性染料进行简单染色，因为在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷，因此碱性染料的染色部分很容易与细菌结合使细菌着色，经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下更易于识别。实验原理

常用作简单染色的染料有：美蓝、结晶紫、碱性复红等。当细菌分解糖类产酸使培养基pH下降时，细菌所带正电荷增加，此时可用伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料染色。实验原理(continued)

细菌细胞微小，透明，不易观察，需染上颜色。利用单一染料对细菌进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色差，从而能更清楚地观察到其形态和结构。染料按其电离后所带电荷的性质可分为以下类型：1.酸性染料：如酸性复红、刚果红、伊红、藻红、苯胺黑等。2.碱性染料：一般有碱性复红、中性红、孔雀绿、番红、结晶紫、美兰、甲基紫等，细菌易被碱性染料染色。3.中性（复合）染料：如伊红、美兰等，Wright染料和Gimsa染料等（常用于细胞核染色）。4.单纯染色：这类染料的化学亲和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶剂中，如苏丹类（Sudanb)的染料。1、菌种枯草芽孢杆菌12～18h培养物金黄色葡萄球菌24h培养物大肠杆菌12-18h培养物2、染色剂草酸铵结晶紫染液实验材料

3、其他物品

显微镜、载玻片、香柏油、擦镜纸、接种环、生理盐水。涂片干燥固定染色水洗干燥镜检无菌操作操作步骤

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