中药泻味制剂化学成分、炮制及药理作用研究进展

中药泻味制剂化学成分、炮制及药理作用研究进展

腹泻是泽泻科植物的一个干燥的茎，具有甘寒和肾膀胱经。主要用于排尿不良、水肿腹胀、腹泻、尿少、粘液、头晕、热脉、出血等。临床单味用药的情况较少,多与其它药物配伍作成方制剂使用。本文综述了中药泽泻的化学成分、炮制研究及药理作用,并介绍了近几年来该味药的质量标准研究情况。1化学成分的研究1.1c23-阿布氏三类化合物泽泻醇A(alisolA)及其乙酸酯、泽泻醇B(AlisolB)及其乙酸酯、泽泻醇C单乙酸酯(AlisolC23-acetate)为首次从泽泻中分离得到的三萜类化合物。此后,各国学者又从不同产地、不同加工方法的泽泻饮片中分离得到了30多个三萜类化合物,其结构多为原萜烷型(Protostane)四环三萜,如24-乙酰泽泻醇A极其衍生物、23-乙酰泽泻醇B及其衍生物、乙酰泽泻醇E、泽泻醇F、泽泻醇H、泽泻醇G等。从生物途径归纳,三萜类都是由23-泽泻醇B衍生而来。1.2岩清经方与造林地的土地泽泻主含愈创木烷型倍半萜,最早由Oshima从中分离到的是Alismo1和泽泻二醇(Alismoxide),后又陆续分离出泽泻醇萜A、泽泻醇萜B、泽泻醇萜C、泽泻醇萜E、泽泻醇萜F等。1.3类化合物的绝对原型90年代中期,Nakajima等首次从泽泻鲜品中分离出一个贝壳杉烷型四环二萜类化合物,并最终确定其绝对构型为:(-)-16R-ent-kaurane-2,12-dione。最近,彭国平等又从中分离出两个新的贝壳杉烷型四环二萜类化合物:Oriediterpenol及Ofiediter-penoside。1.4-谷哌醇-5-o泽泻还含有β-谷甾醇(β-sitosterol)、β-谷甾醇-6′-O-硬酸脂、硬脂酸、甘油醇-1-硬酸脂、三十烷、胆碱、植物凝聚素、泽泻多糖PH、PIIIF、生物碱、黄酮大黄素、淀粉、蛋白质、氨基酸等成分。2关于生产研究2.1从工艺上的变化发展南北刘宋时代有酒浸(《雷公》)。宋代有酒浸后炙(《总录》、微炒(《洪氏》)、酒浸后蒸(《传言》)等方法。元代有清蒸(《世医》)法。明代增加了皂角水浸焙(《仁术》)、蒸焙(《启玄》)、米泔水浸后蒸(《大法》)、米泔浸后炒(《醒斋》)等方法。清代又增加了盐水伴(《备要》)、盐水炒焦(《幼幼》)、酒炒(《得配》)、酒伴(《求真》)、酒伴烘(《要旨》)等炮制方法。从炮制方法的变革上看,早期是酒浸后取出,并不要浸出物部分;而后是浸过之后或炒或蒸或焙或烘,是由生制熟的过程,可能是为了提高有效成分含量并去除寒性。2.2草地病肉的制备现代泽泻药用有生泽泻、盐泽泻、麸炙泽泻3个主要品种。生泽泻:除去杂质,稍浸,润透,切厚片,干燥。盐泽泻:取泽泻片,加适量盐水拌匀闷透,置锅内,以文火加热、炒至微黄色时,取出放凉。每100kg泽泻用盐2kg。麸炙泽泻:先将锅烧热,撒入麦麸待冒烟时,投入泽泻片不断翻炒,炒至药物呈黄色时取出,筛去麦麸放凉。每100kg泽泻用麦麸10~15kg。樟帮麸炒泽泻:先将锅内烧热,撒入麸皮,待冒烟时加入泽泻片,不断地翻动,炒至药物表面呈金黄色取出,筛去麸皮,放凉。每泽泻100公斤,用麦麸10公斤。2.3独立盐充液的制备泽泻性味甘、寒,归肾、膀胱经,具有利小便、清湿热的功能,用于小便不利、水肿涨满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛及高血脂等症。泽泻生品以利水渗湿为主,用于小便不利、水肿、泄泻、淋浊、湿热黄疸、湿热带下、痰饮等症。盐炙后能够引药下行,增强滋阴、泻热、利尿的作用,并利尿而不伤阴,用于小便淋涩、遗精淋漓、腰部重痛等症。麸炒后寒性缓和,以渗湿和脾,降浊以生清为主,用于脾湿泄泻、久泻等症。3给药剂研究3.1单味依赖药的药理作用3.1.1小鼠肠道菌尿量的变化24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B灌胃给药,能使大鼠尿液的钠含量增加,钾含量不变;泽泻醇B有增加尿量的倾向。泽泻煎剂2g(生药)/kg及浸膏给家兔口服时利尿效果极弱,但泽泻流浸膏腹腔注射或煎剂剂量大于前者时则呈显著利尿作用,对由硝酸铀皮下注射引起的家兔血中尿素及胆固醇的滞留有减轻作用,并能增加健康人尿量,增加尿素及氯化钠的排泄。3.1.2对慢性血清三、三醇三醇酯的抑制作用泽泻提取物对兔实验性高胆固醇症具有明显的降胆固醇作用,对实验性血清高三酰甘油亦具有一定抑制作用。泽泻降胆固醇的主要活性成分为泽泻醇A及泽泻醇A、B、C的醋酸脂,尤以泽泻醇24-乙酰泽泻醇A降脂作用最强。3.1.3抗胆红素作用泽泻水提物及苯提取物可使血清胆固醇及肝脂肪量降低。3.1.4不同浓度的0.4对兔身主动脉条的影响泽泻乙醇提取物给兔静脉注射可使其血压迅速下降;泽泻经甲醇、苯和丙酮提取的组分可使猫和兔的血压下降。泽泻薁醇对生理盐水溶液中的兔离体胸主动脉条收缩和45Ca2+滞留无影响,也不影响去甲肾上腺素引起的收缩;对高K+生理盐溶液中的收缩和45Ca2+滞留则有显著抑制作用。故认为泽泻薁醇对兔胸主动脉条的影响,主要是抑制钙通道内流。泽泻薁醇可干扰神经末梢在点刺激时对去甲肾上腺素的释放;它还能抑制血管紧张素I所引起的动脉收缩。3.1.5小鼠血清抗体igg含量的影响小鼠灌胃给予泽泻煎剂能抑制小鼠碳粒廓清速率,对免疫器官重量和血清抗体IgG含量无影响;对绵羊红细胞所致小鼠迟发型超敏反应也无影响;能明显抑制由DNCB所致小鼠接触性皮炎。20g/kg能减轻二甲苯引起的小鼠耳廓肿,抑制大鼠棉球肉牙组织增生。3.1.6体重法泽泻水煎剂喂饲对大剂量谷氨酸钠引起的肥胖有减肥作用,能降低肥胖大鼠的Lee指数值、子宫及睾丸周围脂肪指数及血清三酰甘油含量。3.1.7对大鼠尿ca2+分泌量和肾组织ca2+水平的影响泽泻有效成分四环三萜类化合物对大鼠体内草酸钙结晶的抑制作用。比较血清生化指标和对大鼠24h尿Ca2+分泌量以及肾组织Ca2+水平的结果,泽泻组生化指标以及尿Ca2+分泌量和肾组织Ca2+水平均明显低于草酸钙模型组。3.2泽加王药方剂的临床应用3.2.1和临床用利水病与猪苓、茯苓、滑石等同用,可用于治疗水热互结之小便不利、水肿,如猪苓汤(《伤寒论》);若与猪苓、白术、桂枝等同用,可用于治疗外有表证,内有水湿、头痛发热、烦渴欲饮,或小便不利、水湿内停的水肿,如五苓散(《伤寒论》);与茯苓、白术(土炒)、猪苓同用,具有利水除湿的作用,用于水泻、小便不利,如四苓汤(《医宗金鉴》);若与茯苓、苍术、厚朴等同用,可用于治疗夏秋之间脾胃伤冷、水谷不分、泄泻不止,以及水肿、腹涨、小便不利,如胃苓汤(《丹溪心法》);与牡丹皮、桂心、木通等同用,具有利水渗湿、泄热的作用,可用于治疗虚劳、膀胱气滞、腰中重、小便淋漓,如泽泻散(《圣惠方》);与茵陈、滑石、栀子等同用,具有渗湿褪黄的作用,用于湿热黄疸、身目俱黄、湿重于热、小便不利,如茵陈五苓散(《金匮要略》);若与黄芩、白鲜皮、茵陈等同用,可用于治疗酒黄、病人五脏积热、面赤、妄言妄语、昏沉错乱、目中黄色,如泽泻汤(《总录》);与白术同用,具有利水渗湿的作用,用于心下有支饮,其人苦眩晕,如泽泻汤(《金匮要略》);若与白术、白茯苓同用,可用于治疗冒暑霍乱、小便不利、头晕引饮,如三白散(《纲目》)。3.2.2茯苓、杜仲、生姜与熟地、白菊花等同用,具有滋阴明目的作用,用于视物模糊、目色羞明等证,如明目地黄丸(《处方集》);与熟地、杜仲、牛膝等同用,具有补肾气、强腰膝的作用,用于肾虚腰膝酸软、疼痛等证;若与茯苓、杜仲、干姜等同用,可用于经脉不通、腰部重痛,如圣济泽泻汤(《总录》);与茯苓、猪苓、陈皮同用,具有利水通淋的作用,可用于治疗小便不利、淋浊,亦治脚气、水湿肿胀,如四苓散(《瘟疫论》),方中泽泻盐水炒后,能引药下行,增强利水通淋的作用。3.2.3茯苓散配伍法与白术、茯苓神曲等同用,具有渗湿和脾的作用,用于湿阻中焦、脾失健运、大便泄泻如水、小便不利,如伴有寒症,加炮姜、煨木香等,以散寒掉气,如泄泻方(《类证治裁》)。与白术、茯苓、车前子等同用,具有利水除饮、培土制水的作用,用于饮邪停胃、浊阴上范之眩晕、泛恶作呕等证。史久良报道,在大白鼠的利尿实验中,生泽泻、酒泽泻、麸炒泽泻均有一定的利尿作用,而盐泽泻几乎没有利尿作用;但在五苓散配伍中,无论选用生泽泻或者盐泽泻均有利尿作用;盐泽泻在单味药或者其它成方制剂中都没有增强利尿作用的效果。4对净化配方的测定泽泻药材等级的传统划分以块茎个头大小判断,而现代研究泽泻质量的优劣多以药材中泽泻醇24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B的含量作为评价标准。如彭国平等对泽泻中的24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇C等活性成分进行研究,发现泽泻醇23-乙酰泽泻醇B专属性好,检测方法可靠,且在药材中含量基本稳定,其含量可以体现出泽泻药材的品质优劣并可区分泽泻的混淆品。因而,将泽泻醇23-乙酰泽泻醇B定为泽泻药材的对照品。4.1重质谱分析法彭国平等对泽泻中倍半萜成分alismol进行了分离鉴定以制备对照品。将泽泻粉末经硅胶柱预处理,洗脱液再薄层层析,进行光密度扫描测定。显色剂为硅乌酸乙醇溶液,薄层扫描测定波长537nm,狭缝1.2mm×1.2mm,SX=3。郭素华、吴水生等用薄层扫描法对闽产泽泻中泽泻醇B的含量进行了测定。用95%乙醇超声提取样品,硅胶G板点样,以石油醚-乙酸乙脂-乙醇(9∶7∶1)作为展开剂,25%硫酸乙醇在105℃显色10min,置薄层扫描仪上进行单波长锯齿式扫描,检测波长537nm,狭缝1.2mm×1.2mm,线性化参数SX=3。巩丽萍等以萜类化合物为研究对象,采用薄层色谱法对不同地区不同种类的药材和饮片进行了TCL图谱分析。以23-乙酰泽泻醇B为对照品,分别取江西、福建、四川、广西等不同地方的泽泻药材制得供试品。具体实验方法为:药材加甲醇超声提取30min,过滤后用甲醇溶解残渣作为供试品溶液。取供试品和对照液分别点于同一硅胶板上,以环己烷-醋酸乙脂-丙酮(4∶2∶1)为展开剂,香草醛硫酸-乙醇(4∶1)溶液为显色剂。薄层扫描波长560nm,狭缝1.2mm×0.05mm,扫描速度10mm·s-1。用薄层色谱扫描仪检测出8个共有峰,可用于泽泻TCL图谱的鉴定。其中,23-乙酰泽泻醇B所出的峰各批药材饮片都有,且含量变化相对较小,可认为是泽泻的主要成分之一。发现选用薄层显色专属性强,灵敏度高,操作简便,稳定性好。4.2重质醇的hplc-elsd法检测目前,大多研究者采用HPLC法测定泽泻药材或饮片中有效成分含量的方法来评价泽泻的质量标准。文红梅、李伟等对泽泻不同采收期23-乙酰泽泻醇B的含量采用HPLC法进行了考察。流动相为乙腈-水(65∶35),紫外检测波长为208nm,柱温25℃,ATTN:5。4月份23-乙酰泽泻醇B的含量明显增加,故4月份为最佳采收期。周坛树、施大文用HPLC法对不同产地泽泻中23-乙酰泽泻醇B和24-乙酰泽泻醇C进行了测定。23-乙酰泽泻醇B的HPLC流动相为甲醇-水(85∶15),紫外检测波长210nm;24-乙酰泽泻醇C的HPLC流动相为甲醇-水(70∶30),紫外检测波长245nm。检测结果为建泽泻23-乙酰泽泻醇B含量最大,川泽泻24-乙酰泽泻醇C含量最大。文红梅、彭国平等对泽泻中两种主要成分泽泻醇24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B采用HPLC法进行了测定。流动相采用乙腈-水(65∶35),紫外检测波长为208nm,温度25℃,TTN∶5。结果表明,福建、江西泽泻中泽泻醇23-乙酰泽泻醇B含量较高,而四川、广西泽泻中泽泻醇24-乙酰泽泻醇A含量较高。巩丽萍、王少云等用高效液相色谱-蒸发光散射法测定了泽泻中23-乙酰泽泻醇B含量。流动相为醇-水(84∶16),体积流量为0.5ml/min,柱温为室温,漂移管温度为60℃,雾化气体流速为1.4L/min。测定结果表明,不同产地泽泻中23-乙酰泽泻醇B的量差异较大,药材与饮片中23-乙酰泽泻醇B的量差异显著。张莹等采用HPLC-ELSD法鉴别了泽泻药材饮片。柱温为室温,流动相为乙腈-水(4∶1),流速为0.5mL/min,ELSD气体流速为2.25L/min,漂移管温度为70℃。结果表明,在地道的建泽泻饮片中,含有泽泻醇24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B;市售泽泻饮片中,只含有24-乙酰泽泻醇A;而泽泻对照药材中,只含有23-乙酰泽泻醇B。该法可清楚区分地道建泽泻饮片、泽泻对照药材和市售泽泻药材饮片。4.3测定药物样品的色谱检测现代泽泻指纹图谱的研究多用HPLC法对样品进行色谱分析,得到的色谱峰较多。许枬、杨松松等人做了泽泻指纹图谱的初步研究,取24-乙酰泽泻醇A、泽泻醇A、25an-thyl-alisolA各5mg,加甲醇使溶解,并定容于5ml量瓶中,作为对照品溶液。取泽泻药材2g,醋酸乙酯超声提取30min,加5%碳酸氢钠萃取3次,弃去,醋酸乙酯层回收溶媒。残渣加甲醇使溶解,并定容于5ml量瓶中,作为供试品溶液。以210nm作为测定波长,甲醇-乙腈-水(30∶20∶20)为流动相,对10批样品的色谱峰进行比较,每个样品比较11个峰。蒋轶伦等又做了泽泻的液相色谱指纹图谱研究,分别准确称取24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B对照品,用甲醇溶解定容。制成24-乙酰泽泻醇A1.350mg/mL、23-乙酰泽泻醇B1.330mg/mL的对照品溶液。取泽泻药材2.000g,乙酸乙酯超声提取2次,每次30min。离心后上清液加0.005g/mL碳酸氢钠萃取3次,弃去水层,乙酸乙酯回收溶质,残渣加甲醇使溶解,定容于5mL容量瓶中。用0.45μm膜过滤,作为供试品溶液。色谱条件为温度20℃,检测波长208nm,乙腈-水为梯度流动相,色谱图光谱采集范围为200-800nm。通过实