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文档简介

实验四细胞组分的分离和鉴定目的:

了解用细胞匀浆和差速离心的方法分级分离细胞组分的原理及过程;

熟悉离心机、匀浆器的使用方法原理:细胞内各种结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,据此,可用不同的转速离心分离,使细胞内各种碎片和细胞器分级分离出来。分为:匀浆、分级分离、分析三个步骤1.匀浆:破坏细胞;根据材料性质不同,放到不同的匀浆溶液中,在匀浆器中研磨,细胞被机械地碾碎成为匀浆。2.分级分离:把细胞匀浆放入在一定液体(介质)环境中,在离心机中使用不同转速离心分离处理。由于离心力的作用,细胞内各种碎片和细胞器被分级分离出来。(1)差速离心法:是指由低速到高速分级分离的一种方法。先低速沉淀较大颗粒如细胞核,再高速沉淀原先悬浮在上清液中的较小颗粒。(2)密度梯度离心法:采用密度具有梯度的介质,使介质分为不同层次,由上到下密度依次增大,细胞匀浆安置在离心管最上层,离心,大小、形态、密度不同的颗粒(细胞器)由于沉降系数不同,以不同的速度向管下移动,集中在不同的区域。3.分析:

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