高效液相色谱法测定化妆品中酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐

高效液相色谱法测定化妆品中酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐

根据中华人民共和国卫生部的统计数据，中国约60%的成年人受到不同程度的癫痫发作，其中15%的人非常严重。各种去屑剂(酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐等)曾被广泛应用于洗发水中,这3种去屑剂虽然去屑效果较好,但长期使用对消费者健康会产生一定影响。我国《化妆品卫生规范》(2007)中规定,酮康唑为禁用物质,氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐为限用物质,最大允许浓度均为5g/L。因此,化妆品中去屑剂含量的测定对于保护人体健康具有重要作用。目前,化妆品中的去屑剂和其他有害物质成分的检测常采用液相色谱法。但关于测定化妆品中酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐的检测方法的报道较少。笔者建立了化妆品中酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐3种去屑剂含量的液相色谱测定法。1材料和方法1.1胺盐、乙腈、米腈、米腈1100型高效液相色谱仪(配自动进样器,二极管阵列检测器检测器,美国Agilent公司),2-16型离心机(德国Sigma公司)。酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐(纯度均大于99%,德国Dr.Ehrenstorfer公司),乙腈(色谱纯,德国Merck公司),MILLI-QGradient纯水(美国Millipore公司)。0.01mol/L磷酸二氢钾-1mmol/L乙二胺四乙酸二钠缓冲溶液的配制:称取1.3609g的磷酸二氢钾(光谱纯,上海试剂一厂)与0.3722g乙二胺四乙酸二钠(工作基准试剂,天津市化学试剂研究所)于1L容量瓶中,用纯水溶解后,定容至刻度,振荡均匀,再用磷酸调节水溶液的pH值至4.0,经抽滤后待用。1.2缓冲溶液配制ZORBAXSB-C18高效液相色谱柱(4.6mm×150mm,5μm,美国Agilent公司),流动相为乙腈∶缓冲盐水溶液(含0.01mol/L磷酸二氢钾和1mmol/L的乙二胺四乙酸二钠溶液,磷酸调节pH值至4.0)体积比为60∶40,进样量为10μl,流量为1.0ml/min,检测波长为210nm,柱温为30℃。1.3腈定容、冷藏称取酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐各0.5g于50ml容量瓶中,用乙腈定容,振荡均匀,置于冰箱冷藏室保存。用乙腈配制酮康唑(1~250mg/L)、氯咪巴唑(1~500mg/L)和吡罗克酮乙醇胺盐(10~500mg/L)标准系列溶液,以峰面积(y)对浓度(x)绘制标准曲线。以3倍信噪比计算检出限。1.4超声离心时间称取化妆品0.500g置于50ml锥形瓶中,准确加入乙腈50ml,超声30min,以12000r/min离心(离心半径为5.5cm)10min,取上清液,经0.45μm滤膜过滤,进样量10μl,根据峰的保留时间及光谱图进行定性,以峰面积进行定量。2结果与讨论2.1峰拖尾现象严重考察了多种流动相条件,选择甲醇-水(体积比为7∶3)作为流动相,酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐的色谱峰拖尾现象比较严重。选择甲醇-缓冲盐水溶液(体积比为7∶3)时,酮康唑与氯咪巴唑分离度差,而体积比改为6∶4时,出峰时间太长,而且吡罗克酮乙醇胺盐的峰有拖尾现象。为了改善分离效果,节约分析时间,选择乙腈-缓冲盐水溶液(体积比为6∶4)作为流动相,结果显示,3种去屑剂都能基线分离,整个分析过程在9min内完成。2.2吸收nm上的化合物吡罗克酮乙醇胺盐在210和300nm处的吸收最强,酮康唑和氯咪巴唑在210nm处的吸收最强。因此,选定210nm波长作为3种去屑剂的检测波长。3种去屑剂的色谱图见图1。2.3系数和检出限3种去屑剂高效液相色谱测定法的线性范围、回归方程、相关系数和检出限见表1。结果显示,该方法测得的酮康唑、氯咪巴唑、吡罗克酮乙醇胺盐的线性较好,检出限分别为0.069、0.12、0.71mg/L,相关系数均>0.999。2.4标准溶液的配制在空白化妆品中分别加入低(50mg/L)、中(100mg/L)、高(200mg/L)浓度的酮康唑、氯咪巴唑和吡罗克酮乙醇胺盐混合标准溶液进行加标回收试验,重复测定6次,结果见表2。表2可见,该方法的平均回收率在91.8%~98.5%之间,RSD在0.38%~0.84%之间。2.5洗发乳中酮康唑与吡罗克酮乙醇胺盐的测定按试验方法对市售5种去屑洗发水和2种洗发乳中的3种去屑剂进行测定,结果显示,5种洗发水中均未检出酮康唑与吡罗克酮乙醇胺盐,2种洗发乳仅检出少量氯咪巴唑,含量分别为231与312mg/L,均符合《化妆品卫生规范》(2007)的限值要求。3去屑剂的选择采