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医学微生物学实验ExperimentofMedicalMicrobiology实验二细菌的人工培养与消毒灭菌Artificialcultureofbacteria,Disinfectionandsterilization【目的要求】1.了解细菌人工培养的方法和过程。2.熟悉常用的消毒灭菌方法、仪器设备、使用注意事项等。3.掌握细菌在各种培养基的生长现象,细菌菌落的概念,熟悉细菌菌落的特点。4.熟悉细菌生化反应的原理和结果。【实验内容】一、录像1．细菌的人工培养（P212）2．消毒灭菌二、细菌培养物观察(示教)（P237）1．液体培养物观察2．固体培养基观察三、细菌的生化反应(示教)（P248）二、细菌培养物观察(示教)1．细菌在液体培养基中的生长现象（1）葡萄球菌——混浊生长（2）枯草杆菌——表面生长（3）乙型链球菌——沉淀生长混浊生长表面生长沉淀生长(右)注意：观察时请不要摇动试管2.细菌在固体培养基上的生长现象(1)在琼脂斜面的生长现象菌苔菌落:单个细菌在琼脂平板上生长繁殖后形成的细菌集群。特点：（1）肉眼可见；（2）遗传背景相同（纯细菌）；（3）不同细菌形成的菌落其形态不同（助于鉴别细菌）。（4）计数活的细菌（菌落形成单位，colonyformingunit,CFU/ml)（2）在琼脂平板的生长现象Nature2008:454;595-599.Science2007:318(5850);652-655进展:生物膜葡萄球菌、枯草杆菌、乙型溶血性链球菌菌落特征观察：注意：不要打开平板菌落观察：菌种大小形态表面边缘透明度颜色溶血环(血平板)凹凸光滑或粗糙干湿葡萄球菌枯草杆菌溶血性链球菌菌落观察结果记录：葡萄球菌、枯草杆菌、乙型溶血性链球菌的菌落特征三、细菌的生化反应(示教)1.单糖发酵试验_+⊕产硷杆菌葡萄球菌大肠杆菌

2.硫化氢试验醋酸铅培养基，接种针穿刺接种结果：变形杆菌+大肠杆菌-3.靛基质试验(吲哚试验)加5~10滴靛基质试剂（柯氏试剂)轻轻摇动后，静置观察。方法:

结果判断：若培养基表面出现玫瑰红色液体为阳性，记录为（+）；如培养基表面呈黄色为阴性，记录为（–）。结果：大肠杆菌+，产气杆菌-【实验报告内容】记录观察结果：1.细菌在液体培养基中

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