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文档简介

2021.03.09 欧阳法创编2021.03.09 欧阳法创编2021.03.092021.03.09 欧阳法创编2021.03.09 欧阳法创编2021.03.091、146种培养基配方时间:2021.03.09创作:欧阳法2、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)■牛肉膏■蛋白胨■氯化钠■琼脂■PH■水3g5g10g15〜20g7.0〜7.21000mL2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)3、20g1g0.5g0.5g0.5g0.01g20g制时配制时,先用少量冷水将淀粉调成;1000mL7.2〜7.42g一,倒入水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,后,补足水分至1000mL121℃灭静0min。查氏(Czape■硝酸钠・磷酸氢二钾■氯化钾■硫酸镁1g0.5g0.5g0.01g30g15~0.01g30g15~20g1000mL自然葡萄糖蛋白胨磷酸二氢钾七水合硫酸镁1/3000孟加拉红(rosebengal,玫瑰红水溶液)琼脂pH蒸馏水112℃灭菌30min。200g20g15—20g自然■硫酸亚铁■蔗糖■琼脂■水■PH121℃灭菌20min。4、马丁氏(乂&4口)琼脂培养基(分离真菌用)10g5g1g0.5g100mL15—20g自然800mL临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30解。5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)■马铃薯■蔗糖(或葡萄糖)■琼脂■PH培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。121℃灭菌30min。6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(4)、将滤液稀释到5—6波美度,pH约6.4,加入2%琼脂即成。121℃灭菌30min。7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)TOC\o"1-5"\h\z甘露醇(或葡萄糖) 10g磷酸二氢钾 0.2g七水合硫酸镁 0.2g氯化钠 0.2g二水合硫酸钙 0.2g碳酸钙 5g蒸馏水 1000mLpH 7.0—7.2113℃灭菌30min。8、半固体肉膏蛋白胨培养基TOC\o"1-5"\h\z肉膏蛋白胨液体培养基 100mL琼脂 0.35—0.4gpH 7.6121℃灭菌20min。9、合成培养基

TOC\o"1-5"\h\z偏磷酸铵 1g氯化钾 0.2g七水合硫酸镁 0.2g豆芽汁 10mL琼脂 20g蒸馏水 1000mLpH 7.0力口12mL0.04%的溴钾酚紫(pH5.2—6.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。121℃灭菌20min。10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽 100g蔗糖(或葡萄糖) 50g水 1000mLpH 自然培养基的配制:称新鲜豆芽100且,放入烧杯中,加入水1000mL,煮沸约30min,用纱布过滤。用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。121℃灭菌20min。11、油脂培养基■蛋白胨■蛋白胨■牛肉膏■氯化钠■香油或花生油■1.6%中性红水溶液■琼脂■蒸馏水■PH121℃灭菌20min5g5g10g1mL15—20g1000mL7.2注:(1)、不能使用变质油

⑵、油和琼脂及水先加热。 (3)、调好pH值后,再加入中性红。 (4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。12、淀粉培养基10g5g5g10g5g5g2g1000mL15—20g■牛肉膏■氯化钠■可溶性淀粉■蒸馏水■琼脂121℃灭菌20min13、明胶培养基TOC\o"1-5"\h\z牛肉膏蛋白胨液 100mL明胶 12—18gpH 7.6在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。溶化后调pH7.2—7.4。 121℃灭菌30min。14、蛋白胨水培养基蛋白胨 10g氯化钠 5g■蒸馏水 1000mL.pH 7.6121℃灭菌20min。15、糖发酵培养基■蛋白胨水培养基 1000mL.1.6%溴钾酚紫乙醇溶液 1—2mLpH 7.6另配制20%糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各10mL。培养基的配制:(1)、将上述含指示剂

的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一•倒置的小玻璃管(Durhamtube),使之充满培养液。(2)、将已分装好的蛋白胨水和20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水121℃灭菌20min;糖溶液112℃灭菌30min。(3)、灭菌后,每管以无菌操作分别加入20%无菌糖溶液0.5mL(按每10mL培养基中加入20%的糖液0.5mL,则成1%的浓度)。配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。16、葡萄糖蛋白胨水培养基5g5g2g5g5g2g1000mL■葡糖糖・磷酸氢二钾■蒸馏水将上述各成分溶于1000mL水中,调pH7.0—7.2,过滤。分装试管,每管10mL,112℃灭菌30min。17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌)TOC\o"1-5"\h\z葡萄糖 1g氯化钾 1.8g酵母浸膏 2.5g醋酸钠 8.2g■琼脂 15—20g■蒸馏水 1000mL113℃灭菌20min。18、柠檬酸盐培养基TOC\o"1-5"\h\z磷酸二氢铵 1g磷酸氢二钾 1g氯化钠 5g硫酸镁 0.2g柠檬酸钠 2g

15—20g1000mL15—20g1000mL10mL■蒸馏水■1%溴麝香草酚蓝乙醇液培养基的配制:将上述各成分加热溶解后,调pH6.8,然后加入指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色,分装试管,121℃灭菌20min后制成斜面,注意配制时控制好pH,不要过碱,以黄绿色为准。pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂■硫代硫酸钠pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂■硫代硫酸钠■10%醋酸铅水溶液培养基的配制:100mL0.25g1mL将牛肉膏蛋白胨琼脂100mL加热溶解,待冷却至60℃时加入硫代硫酸钠0.25g,调至pH7.2,分装于三角瓶中,115℃灭菌15min。取出后待冷却至55—60℃,加入10%醋酸铅水溶液(无菌的)1mL,混匀后倒入灭菌试管或平板中。20、血琼脂培养基100mL10mL■pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂100mL10mL.脱纤维羊血(或兔血)培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化,待冷却至50℃时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)摇匀后倒平板或制成斜面。37℃过夜检查无菌生长即可使用。21、玉米粉蔗糖培养基60g3g100mg60g3g100mg・磷酸二氢钾.维生素B1

10g1.5g1000mL10g1.5g1000mL■七水合硫酸镁■水121℃灭菌30min,维生素B1单独灭菌15:^口后另加。22、酵母膏麦芽汁琼脂3g0.1g1000mL3g0.1g1000mL■酵母浸膏■水121℃灭菌30min。24、棉籽壳培养基培养基的配制:棉籽壳50%,石灰粉1%,过磷酸钙1%,水65%—70%,按比例称好料,充分搅拌均匀后装瓶,较薄地平摊盘上。25、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)10g10g3.5g20—10g10g3.5g20—30g1000mL20mL■乳糖・磷酸氢二钾■琼脂■蒸馏水.5%碱性复红乙醇溶液培养基的配制:先将琼脂加入900mL蒸馏水中,加热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋白胨,使溶解,补足蒸馏水至1000mL,调pH至7.2—7.4。加入乳糖,混匀溶解后,115℃灭菌20min。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸10min后。立刻滴加于20mL5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中,充分混匀,倒平板,放冰箱中备

用,贮存时间不宜超过2周。26、伊红美蓝培养基(EMB培养基)TOC\o"1-5"\h\z蛋白胨水培养基 100 mL20%乳糖溶液 2 mL2%伊红水溶液 2 mL0.5%美蓝水溶液 1 mL培养基的配制:将已灭菌的蛋白胨水培养基(pH7.6)加热熔化,冷却至60℃左右时,再把已灭菌的乳糖溶液,伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后,立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,115℃灭菌20min。27、乳糖蛋白胨培养液(“水的细菌学检查”用)TOC\o"1-5"\h\z蛋白胨 10g牛肉膏 3g乳糖 5g5g15g1mL1.6%溴甲酚紫乙醇溶液■蒸馏

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