知母化学成分及药理活性研究进展

知母化学成分及药理活性研究进展

知母是百合科植物知母的根。它具有清热明火、液体润干的功效。常用于外感病原体、高热、易怒、肺热干渴、肺热干渴、口渴、内脏干燥、发烧、肠道干涩和便秘。近年来的研究从化学成分、药理学和制剂学的角度进行了论述。1物理分化1.1呋哌皂苷化合物来源知母主含皂甙,分别是知母皂甙A-Ⅰ、A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ、B-Ⅰ和B-Ⅱ,其中知母皂甙A-Ⅲ是萨尔萨皂甙元与知母双糖结合而成的双糖甙,知母皂甙A-Ⅰ是萨尔萨皂甙元β-D-吡喃半乳糖甙。其皂甙元主要是萨尔萨皂甙元。边氏等从知母根茎乙醇提取物中分离得到20个化合物,采用光谱法和化学方法鉴定其中15个化合物的结构,分别为二十九烷醇(Ⅰ)、二十八烷酸混合物(Ⅱ)、β-谷甾醇(Ⅲ)、胡萝卜甙(Ⅳ)、菝葜皂甙元(Ⅴ)、马尔可皂甙元(Ⅵ)、知母皂甙AⅢ(Ⅶ)、知母皂甙BⅠ(Ⅷ)、知母皂甙BⅢ(Ⅸ)、2,6,4’一三羟基-4-甲氧基苯酰酮(Ⅹ)、宝藿甙Ⅰ(Ⅺ)、淫羊藿甙-Ⅰ(ⅩⅡ)、芒果甙(ⅩⅢ)、7-O-葡萄糖基芒果甙(ⅪⅤ)、知母双糖(ⅩⅤ)。其中化合物ⅤⅢ为新的天然产物,化合物Ⅰ、Ⅺ、ⅩⅡ、ⅩⅣ为首次从知母中分得的已知化合物,体外抗流感甲-Ⅲ型病毒试验表明:化合物Ⅴ、Ⅵ、知母皂甙AⅢ及芒果甙有较强活性。马氏等从知母根茎乙醇提取物中,经硅胶层析和制备型HPLC分得四种呋甾皂甙,化合物Ⅳ为首次从知母中分离得到,命名为知母皂甙E。孟氏等从知母干燥根茎,经温水浸、大孔吸附树脂柱层析、正相硅胶柱层析、HPLC、制备薄层等手段,从中分离出三种新的呋甾皂苷化合物,并初步鉴定其化学结构,分别命名为timosaponin-BⅣ,timosaponin-BⅤ,timosaponin-BⅥ。三种物质经水解,所得到的苷元全是菝葜皂苷元,糖部分检出葡萄糖和半乳糖(4∶1)。洪氏等从西陵采集新鲜的知母根茎中分离得到两种口山酮甙,即芒果甙(Ⅰ)和7-O-β-D-葡萄糖基芒果甙(7-O-β-D-glucopyranosyl-mangiferin,Ⅱ),后者为一新的化合物,命名为新芒果甙(neomangiferin,Ⅱ)。1.2测定药物中皂蚤元、实施成分分析关于知母的质量评价《中国药典》1995年版收载了“薄层色谱法”,按干燥品计菝葜皂甙元(C27H45O3)不得少于1.0%。王氏等用反相高效液相色谱法分别分离并测定了知母中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元,建立了中药中菝葜皂甙元、萨尔萨皂甙元分离、测定的色谱方法。在一些以知母作为君药的组方中,可通过测定知母中的菝葜皂甙元含量来控制质量。苏氏等用树脂吸附-薄层扫描法测定抗病毒口服液中菝葜皂甙元含量以控制抗病毒口服液的内在质量。甄氏采用薄层扫描法测定知柏地黄丸中菝葜皂甙元和盐酸小檗碱的含量以作为该药的质量控制手段。2药理作用2.1对老年大鼠心肌免疫指标的影响人和动物衰老时常出现脑功能障碍,这种障碍和大脑M胆碱系统的功能低下有密切关系,包括M胆碱受体密度降低。知母水提物长期口服同时促进脑M受体的合成和降解,对合成的加快作用更强,其提高衰老时脑M受体密度的机制主要在促进受体分子的生成,从而纠正生成和降低的失平衡。范氏等研究结果表明,知母皂甙元(ZMS)能使培养9～15天的原代培养的大鼠神经细胞的M受体密度上调,但并非ZMS直接作用于M受体结合位点所引起的,而是由于ZMS能促进M受体的生成。用M受体选择性烷化剂BCM将脑内原有受体不可逆地阻断,用3H-QNB测定新生受体的时相曲线,通过数学模型救解生成速率(Pr)和降解速率常数(K)。二批平行实验表明,ZMS通过相对加快受体的合成来调节衰老动物降低的脑M受体数。范氏等用放射免疫分析法测定细胞内cGMP水平,观察知母皂甙元不同作用时间对Carbachol刺激下cGMP生成的影响,结果表明知母皂甙元5min作用于原代培养的神经细胞对Carbachol刺激下cGMP的生成无影响,而48h作用明显提高cGMP生成量。因此,知母皂甙元作用与激动剂和拮抗剂不同,需要较长时间的作用才能发挥作用。徐氏等研究表明,雄性SD大鼠19～20月龄时起在饲料中加一定量从知母中提取的ZMS,到23～24月龄时用三臂等长Y型迷宫作实验,其学习和记忆能力明显高于饲料中不加ZMS的平行对照老年大鼠。知母对老龄大鼠心肌M受体亦有调整作用,竞争抑制实验表明,大鼠心肌M受体85%以上是M2亚型,提示知母能上调M2亚型。知母宁为知母皂甙AⅢ和芒果甙,王氏等观察不同浓度的知母宁温育后的老化红细胞免疫指标和过氧化脂质(LPO)水平的改变,发现知母宁5、15、50、100μg温育后的老化红细胞LPO含量的改变,以知母宁50、100μg浓度时LPO水平明显降低,和对照组相比差异有显著意义(P<0.05)。提示一定剂量知母宁提高红细胞CR1活性,可能与抑制脂质过氧化反应有关。2.2受体激动剂刘氏等以放射免疫分析法和放射配基结合分析法观察了知母对甲亢模型β肾上腺素受体-cAMP系统的调节作用,结果表明甲亢模型β受体-cAMP系统对β受体激动剂异丙肾上腺素的反应性显著增强,肾脏β受体最大结合容量也显著增加,知母能使两者降至正常水平,但对β受体的亲和力无影响。此外,知母尚可降低甲亢模型的耗氧率,但不影响其血清T3和T4的水平。王氏等研究了知母多糖的降血糖活性,结果表明知母多糖可使小鼠的血糖及肝糖元含量明显降低,而血脂含量几乎没有变化。2.3知母宁的药理作用机理李氏等观察知母宁对急性常压低氧肺动脉高压SD大鼠模型平均肺动脉压(mPAP)、血浆丙二醛(MDA)水平及肺组织磷脂酶A2(PLA2)活力的影响,并以加内皮素-1(ET-1)和血小板活化因子(PAF)分别进一步对其作用机理进行探讨。结果表明知母宁确有降低缺氧性肺动脉高压的作用,其机理可能与拮抗ET-1和PAF的作用有关。此外,知母宁有与肾上腺糖皮质激素相似的预防哮喘发作的作用。金氏等初步实验结果表明,知母皂甙D具有保护心肌I/R损伤的作用,这一作用可能与其抗PAF、抗血小板聚集和清除自由基等机理有关。知母宁在5-80μg/ml浓度范围内对HL-60细胞生长和增殖有抑制作用,并呈明显的剂量依赖关系。知母水提物及总多糖能显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀和醋酸致腹腔毛细血管通透性,且知母水提物的抑制作用具有剂量依赖性。此外,知母口服易致呕吐,徐氏研究表明,知母皂甙对粘膜无明显刺激性,其易致呕吐,是其所含的烟酸引起的。3主要制品中皂蚤元含量的变化知母经炮制,可起到杀酶保甙作用,有利于药材的贮存,传统制法以盐炙、酒炙,麸炒和清炒为多,曹氏等采用薄层扫描法测定各炮制品中菝葜皂甙元的含量以初步探讨各炮制方法的合理性。结果表明知母不同炮制品