紫外分光光度法检测规程

紫外分光光度法检测规程目的：程序：方式，本法在药品查验中要紧用于药品的区分、检查和含量测定。. 或百分吸取系数求算出被测物质的含量，多用于制剂的含量测定。. 对物质定性可用吸取峰波长或吸取度比值作为区分方式；假设化合峰处化合物无吸取，那么可用本法作杂质检查。生的，合物分子构造中如含有共轭体系、芳香环或发色基团，都可在近紫外区〔200-400nm〕或可见光区〔400-850nm〕产生吸取。通常利用的紫外分光光度190—900nm，因此又称紫外—可见分光光度计。紫外吸取的吸取定律，它是紫外分光光度法定量分析的依据，其数学表达式为：A=lg

1 T式中：A为吸取度T为透光率E为吸取系数C为溶液浓度L为光路长度如溶液的浓度〔C〕1〔g/m，光路长度〔〕1cm，相应的吸取系E表示。假设溶液的浓度〔C〕为摩尔浓度〔mol/，１ｃｍ光路长度为1cm时，那么相应吸取系数为摩尔吸取系数，以ε来表示。. 仪器：. 系统和数据处置系统等部份组成。即氘灯和碘钨灯，前者用于紫外区，后者用于可见光区。透镜或反射镜等组成，色散元件有棱镜和光栅二种，棱镜多用自然石英或熔融硅石制成，对200—400nm波长光的色散力量很强，对600nm以上波长的光色散力量较差，用，故常称为衍射光栅，光栅光谱是按波长作线性排列，故为匀排光谱，双光束仪器多用光栅为色散元件。. 检测器有光电管和光电倍增管二种。替切换光路，使光分成样品〔S〕和参比〔R〕两光束，并前后抵达检测器，检见，仍宜用固定波长测量方式。. 紫外分光光度计的检定：. 波长准确度：准确度350nm处±，500nm处±，700nm处±。波长准确度检定方式：.. 用低压汞灯检定，关闭光源，将汞灯〔用笔式汞灯最便利〕直接对准进光狭缝，如为双光束仪器，用单光束能量测定方式，承受波长扫描方式，扫描速〔如15nm/min〔如〕量程0—100%，在3次，由仪器识别记录各峰值〔假设仪器无“峰检测”功能，必要时可对指定波进步行“单峰”扫描。单光束仪器以751G型为例，可将选择开关放在×位置，透光率读数放在100〔或选择开关放在×1，10，关小狭缝，翻开光闸门，缓缓转动波长盘，查找汞灯峰显现的条谱线与仪器波长读数的误差。用于检定紫外—可见分光光度计的汞灯谱线波、、、、〔紫色〔蓝色〔绿色、〔黄色查对，3次。气，按、、、、波优势有锋利的吸取同，应利用经计量部门校验过的。外分光10%氧化钬〔HO23，配成4%溶液即得。高氯酸钬溶液较强的吸取峰波长、、、、后而非真实波长，为了准确测定，建议承受定点检定而不用扫描方式。. 12060mg，1000ml〔L〕1000ml1cm石英池，以硫酸液〔L〕为空白，在235、257、313、350nm别离测定吸取度，然后换算E，测得值应符合下表中规定的允差范围〔1。国际药典规定的允差亦１ｃｍ为±1%。波长〔nm波长〔nm〕吸取度强度允差范围１ｃｍ235最小—257最大—313最小—350最大—和国国家计量检定规程JJG682—90《双光束紫外可见分光光度计检定规程》执行，并符合有关项下的规定。日常常规测定主假设是对以上两项时常检查。. 样品测定操作方式：. 吸取系数测定〔性状项下液，在规定的波优势测吸取度，并计算吸取系数，应符合规定范围。. 区分及检查：按各该品种项下规定的方式，测定供试品溶液在有关波优的比值，均应符合规定。. 含量测定：.1. 品溶液，比照品溶液中所含被测成份的量应为供试品溶液中被测成份标示量的〔100±10〕%之内，用同一溶剂，在规定的波优势测定供试品溶液和比照品溶液的吸取度。.2. 收系数测定法”的规定进展。.3.检定。.留意事项：. 试验中所用的量瓶、移液管均应经检定校正、洗净后利用。. %以下者可配对利用，不然必需加以校正。.取吸取池时，手指拿毛玻璃面的双侧。装盛样品溶液，以池体积的4/5的擦镜纸擦拭，然后再用干擦镜纸拭净。吸取池放入样品室时应留意每次放入方向一样。用硫酸，发烟硝酸〔3：1V/V〕混合液略加浸泡后，洗净备用。如用铬酸钾清洁坏吸取池的光学外表，并应充分用水冲洗，以防铬酸钾吸附于吸取池外表。. 测定前应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长四周是不是符合要规定。以空气为空白测定溶剂在不同波优势的吸取度的规定波长范围〔nm〕 220—240 241—250 251—300 300以上吸取度 < < < <每次测按时应承受同一厂牌批号，混合均匀的一批溶剂。. 称量应按药典规定要求。配制测定溶液时，稀释转移次数应尽可能少；5ml2份，如为比照22%1份。. 供试品测试液的浓度，除各该品种项下已有注明外，供试品溶液的吸取围，配制适合的读数浓度。. 选用仪器的狭缝宽度应小于供试品的吸取带的半宽度，不然测得的吸取度会偏低，狭缝宽度的选择应以减小狭缝宽度时供试品的吸取度再也不增加为2nm缝宽，但对某些品种如青霉素钾及钠的吸取度检查那么用1nm缝宽或更窄，不然其264nm的吸取度会偏低。5.6.8. 2nm度，以1nm试样的同一性、纯度和仪器波长的准确度。结果计算：. 的浓度以正比法算出供试品溶液的浓度，再计算含量。A ：A =C ：C样 对 样 对C =A /A ×C样 样 对 对式中：A为吸取度值；C为测试液浓度〔mg/ml计。. 吸取系数法：中国药典规定的吸取系数，系指１ｃｍ1cm1%〔g/ml〕时的吸取度值，故应先求出被测１ｃｍ

A=———CL式中：A为供试品溶液测得的吸取度值；C100ml中所含溶质的克数；L为吸取池的光路长度〔c；供试品的含量%=

样品〕

×100%样品标准

为药典或标准中规定的百分吸取系数。. 吸取系数测定法：本法要紧用于品种的吸取系数测定。. 测定方式：取精制样品，周密称取必定量，使样品溶液配成吸取度读数1cm吸取池中，在规定波优势按项的规定测出读数，然后再用同批溶剂将其稀释1倍，使吸取度在—之间，再按上述方式测定。样品应同时测定2份，同一台仪器测定的2份间相对误差应不超过±%，不然应重测。测按时先4台不同型号的仪器复测。吸取系数可依照比耳—朗伯定律求算，以下例说明：ε某化合物的分子量为287，用乙醇配成浓度为%的溶液，在波长297nmε处，用1cm石英池，测得吸取度为，求E１％值及克分子吸取系数 值。１ｃｍE％297A/CL= =205１ｃｍε=A/CL= =5873297nm.

1000100 1287.