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文档简介
链霉亲和素系列及用途——20130806一、链霉亲和素系列产品链霉亲和素(Streptavidin,SA)是由一种链霉菌分泌的一种小分子非糖基化蛋白质,其天然形式为同源四聚体,分子量约60kD。生物素(Biotin)分子量小,对蛋白质功能的干扰性低,可广泛应用于各种标记(如核酸、蛋白、基因芯片材料、纳米材料、分离填料等)。SA及其衍生物与生物素有极高的亲和力和非凡的特异性,SA-Biotin复合物可以耐受变性剂(如盐酸胍)、去垢剂(如SDS)、蛋白水解酶、极端温度(4〜90°C)和pH环境(pH2〜8)。使得SA-biotin系统在基础和临床影像学、蛋白质纯化、抗原抗体和酶等蛋白质材料的固定、免疫检测、临床诊断试剂、组织免疫化学、生物纳米材料组装、化疗药物靶向投放、肿瘤靶向放射治疗等领域得到广泛应用和尝试。1.链霉亲和素产品产品名称产品性质产品货号备注Streptavidin,SA野生型,四聚体SAT1001北京华美互利生物Streptavidin,SA1高稳定性,四聚体SAT1002北京华美互利生物Streptavidin,SA2低亲和力,四聚体SAT1003北京华美互利生物monomerStreptavidin,mSA野生型,单体SAM1004同上monomerStreptavidin,mSA1高稳定性,单体SAM1005同上monomerStreptavidin,mSA2低亲和力,单体SAM1006同上2.酶标记链霉亲和素辣根过氧化物酶(HorseradishPeroxidase,HRP)是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化ECL类试剂(如ECL、BeyoECL等)产生化学发光,可以在ELISA时催化TMB产生蓝色,也可以在免疫组化、免疫细胞化学或Westernblot检测时催化DAB产生棕色沉淀。辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(HRP-Streptavidin,HRP-SA)由高纯度的SA和超纯的HRP交联而成,确保产生最低的本底和最高的灵敏度,操作简便,可用于生物素化的蛋白、DNA、RNA等样品的检测,作为信号放大器,提高检测的灵敏度。碱性磷酸酶(AlkalinePhosphatase,AP)是一种水解酶,负责从核苷酸,蛋白质和生物碱等分子中去除磷酸基团。AP在Western、EMSA、Southern或Northern等检测时催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。碱性磷酸酶标记链霉亲和素(AP-Streptavidin,AP-SA)
由高纯度的SA和超纯的AP交联而成,确保产生最低的本底和最高的灵敏度,操作简便,可用于生物素化的蛋白、DNA、RNA等样品的检测,作为信号放大器,提高检测的灵敏度。产品名称产品性质产品货号备注HRP-SA辣根过氧化物酶标记野生型,四聚体SASAE1007北京灵宝科技HRP-SA1辣根过氧化物酶标记高稳定,四聚体SA1SAE1008北京灵宝科技HRP-mSA辣根过氧化物酶标记野生型,单体SASAE1009北京灵宝科技HRP-mSA1辣根过氧化物酶标记高稳定,单体SA1SAE1010北京华美互利生物AP-SA碱性磷酸酶标记野生型,四聚体SASAE1011北京灵宝科技AP-SA1碱性磷酸酶标记高稳定,四聚体SA1SAE1012北京华美互利生物AP-mSA碱性磷酸酶标记野生型,单体SASAE1013北京灵宝科技AP-mSA1碱性磷酸酶标记高稳定,单体SA1SAE10143.荧光素标记链霉亲和素SA分子量小(127AA),可以共价偶联的荧光分子(如FITC、Cy5等)相对较少,但其在生物素化的抗体上,占位也少,结合量远多于二抗,检测灵敏度仍然高度放大,尤其在用于临床检测和分析极低浓度的生物样品时,SA的灵敏度高于抗原-抗体。链霉亲和素偶联的化学发光和荧光比二抗偶联产生的信号灵敏度高1个数量级以上,特异性也显著提高(本底信号很低)。产品名称产品性质产品货号备注Dylight405-SADylight405标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=400nm/420nmSAL1051北京灵宝科技AMCA-SAAMCA标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=350nm/450nmSAL1052北京灵宝科技Cy2-SACy2标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=492nm/510nmSAL1053AlexaFluor488-SAAlexaFluor488标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=493nm/519nmSAL1054北京灵宝科技FITC-SAFITC标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=495nm/530nmSAL1055
Cy3-SACy3标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=555nm/570nmSAL1056北京灵宝科技TRITC-SATRITC标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=550nm/570nmSAL1057北京华美互利生物PE-SAPE标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=566nm/574nmSAL1058RhodamineRed-X-SARhodamineRed-X标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=570nm/590nmSAL1059北京华美互利生物Alexa®Fluor594-SAlexa®Fluor594标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=590nm/617nmSAL1060Allophycocyanin-SAAllophycocyanin标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=650nm/660nmSAL1061北京华美互利生物AlexaFluor®647-SAAlexaFluor®647标记野生型、四聚体SA,Ex/Em=650nm/668nmSAL1062北京灵宝科技4.链霉亲和素融合蛋白SA的融合蛋白可显著增加分子表面积,在用于标记检测时,可以提高生物信息的放大倍数,提高检测灵敏度。产品名称产品性质产品货号备注SA-RFP野生型、四聚体SA-RFPSAF1015北京灵宝科技SA-OFP野生型、四聚体SA-Orange2SAF1016SA-YFP野生型、四聚体SA-YFPSAF1017北京灵宝科技SA-GFP野生型、四聚体SA-TurboGFPSAF1018SA-CFP野生型、四聚体SA-CFPSAF1019北京灵宝科技SA-BFP野生型、四聚体SA-BFPSAF1020SA-mcherry野生型、四聚体SA-mcherrySAF1021北京灵宝科技SA-tdtomato野生型、四聚体SA-tdtomatoSAF1022北京灵宝科技SA-lucia野生型、四聚体SA-luciaSAF1023SA1-RFP高稳定、四聚体SA1-RFPSAF1024北京灵宝科技SA1-Orange2高稳定、四聚体SA1-Orange2SAF1025SA1-YFP高稳定、四聚体SA1-YFPSAF1026北京灵宝科技SA1-GFP高稳定、四聚体SA1-TurboGFPSAF1027SA1-CFP高稳定、四聚体SA1-CFPSAF1028北京灵宝科技SA1-BFP高稳定、四聚体SA1-BFPSAF1029SA1-mcherry高稳定、四聚体SA1-mcherrySAF1030北京灵宝科技SA1-tdtomato高稳定、四聚体SA1-tdtomatoSAF1031SA1-lucia高稳定、四聚体SA1-luciaSAF1032北京灵宝科技mSA-RFP野生型、单体SA-RFPSAF1033
mSA-Orange2野生型、单体SA-Orange2SAF1034北京灵宝科技mSA-YFP野生型、单体SA-YFPSAF1035mSA-GFP野生型、单体SA-TurboGFPSAF1036北京灵宝科技mSA-CFP野生型、单体SA-CFPSAF1037mSA-BFP野生型、单体SA-BFPSAF1038北京灵宝科技mSA-mcherry野生型、单体SA-mcherrySAF1039mSA-tdtomato野生型、单体SA-tdtomatoSAF1040北京灵宝科技mSA-lucia野生型、单体SA-luciaSAF1041mSA1-RFP高稳定、单体SA1-RFPSAF1042北京灵宝科技mSA1-Orange2高稳定、单体SA1-Orange2SAF1043mSA1-YFP高稳定、单体SA1-YFPSAF1044北京灵宝科技mSA1-GFP高稳定、单体SA1-TurboGFPSAF1045mSA1-CFP高稳定、单体SA1-CFPSAF1046mSA1-BFP高稳定、单体SA1-BFPSAF1047北京灵宝科技mSA1-mcherry高稳定、单体SA1-mcherrySAF1048mSA1-tdtomato高稳定、单体SA1-tdtomatoSAF1049北京灵宝科技mSA1-lucia高稳定、单体SA1-luciaSAF10505.链霉亲和素层析介质低亲和力的链霉亲和素突变体可用于分离纯化过程的结合-洗脱-再结合-再洗脱,且洗脱条件温和,适用于生物活性物质的分离、提取和纯化。产品名称产品性质产品货号链霉亲和素琼脂糖凝胶四聚体链霉亲和素突变体交联琼脂糖凝胶SAP1195北京灵宝科技链霉亲和素磁珠亲和纯化,四聚体链霉亲和素突变体交联磁珠SAP1196单体链霉亲和素琼脂糖凝胶链霉亲和素突变体单体交联琼脂糖凝胶SAP1197北京灵宝科技单体链霉亲和素磁珠链霉亲和素突变体单体交联磁珠SAP1198二、金属硫蛋白系列产品金属硫蛋白(metallothionein,MT),化学名为金属硫组氨酸三甲基内盐,是一类广泛存在于生物中的低分子质量(2〜7kD)、富含半胱氨酸(20%〜30%)、不含组氨酸和芳香族氨基酸的一类金属结合蛋白质。MT能被金属、细胞因子、荷尔蒙、细胞毒性药物、有机化学药物和应激等诱导。自1957年Margoshoes等首次报道从马肾中分离得到Cd-MT以来,MT成为基础和应用科学的热点之一,也是我国“863”重大攻关课题和“火炬”计划之一,我国在MT的研究和应用方面已经在国际上占有重要一席。MT具有调节生物体内微量元素浓度以及对重金属的解毒作用,此外它对激素、细胞代谢的调节,细胞分化和增殖的控制以及参与紫外(UV)诱导反应和清除自由基都有重要作用。对MT的研究和开发利用涉及农业、医药、保健、生物工程、环境保护等各个领域。到目前为止,已经在瑞士、日本、美国、中国等国家相继召开了5次金属硫蛋白国际会议。MT的主要生理功能重金属的去除解毒功能金属硫蛋白解毒机理尚不明确,可能通过这样3个途径:与重金属螯合成无活性的复合物;螯合重金属,并将其排出体外;减少金属的进入量。目前普遍让人接受的一种观点是还原条件下MT通过巯基与金属离子结合再形成Cys-M或Cys-M-Cys键。自由基的清除功能自由基有很多种,如氧自由基和羟自由基。一般来说,动物体组织内自由基较少,其参与体内的重要有益的反应。但当机体处于病理或应激时,体内自由基产生过多,就使机体许多重要的生物大分子发生不可逆的氧化损伤,从而导致细胞结构和功能的破坏甚至导致细胞的突变。由于MT具有特殊的化学结构,其中的金属具有动力学不稳定性,巯基具有亲核性倾向,使得MT易与某些亲电性物质,特别是与某些自由基相互作用,从而起到清除自由基的功能。抗肿瘤功能深入研究MT与肿瘤的关系可望获得治疗肿瘤的有效药物。可能的两种机制如下:MT可以向各种转录因子提供Zn,包括肿瘤抑制基因产物如P53,体外实验证明硫蛋白可以调节激活SP1的转录;MT能抑制细胞死亡,因此可作为抗肿瘤药物。MT的应用1)MT与衰老人体内有一套抗氧化系统,MT就是其中的一种。MT清楚自由基的能力非常强。当人步入中年行列后,适当补充MT,有助于延缓衰老并预防疾病,提高中老年人生命质量,保持青春和活力。2.)MT与美容MT在美容护肤方面,具有六大特殊功效:.清除造成人体衰老氧自由基和羟基自由基,从而起到延缓皮肤衰老功能,抗辐射功能,去色斑及防止色素沉着:,加速皮肤炎症康复,解除重金属毒害功能,缓解皮肤过敏性反应。MT与儿童锌缺乏症随着生物高科技的不断发展进步,尤其在人体的补锌方面已发展到了分子研究水平。经大量动物实验和临床证实:利用金属硫蛋白(MT)补锌,已可完全代替过去传统补锌的方法。从科学的角度来讲,金属硫蛋白应称为锌金属硫蛋白(Zn-MT),从Zn-MT分子结构来看,每个Zn-MT分子都会结合5-7个锌离子,Zn-MT进入人体后,Zn离子很快被置换出来。同时在体内发生一系列生理反应。Zn离子就会作用到人体细胞与组织中去,完成补锌的过程。MT与肿瘤研究表明,MT作为自由基消除剂,能强力有效清除体内的垃圾--自由基,减少自由基对机体的损害作用,激发机体免疫功能,增强机体防癌和抗癌作用。此外,MT还可减轻肿瘤患者放疗、化疗的副作用,例如,MT所含硫基,易与亲子顺铂结合,减轻了顺铂对机体局部组织器官的毒性,同时MT还可增加肿瘤对顺铂敏感性。MT抗辐射作用还可减轻放疗、化疗引起的毒副作用。因此,MT对肿瘤患者有辅助治疗作用。MT与冠心病经测定,在动脉粥样硬病人体内自身抗氧能力有所降低,才使自由基在体内得不到及时清除,造成体种种病理性变化。MT即金属硫蛋白,是迄今为止清除自由基最强的蛋白质。比超氧物歧酶(SOD)强一万倍以上。补充外源性MT对预防和治疗冠心病有很好疗效。在日本MT已作为心肌梗塞治疗获得专利并应用于临床。MT与糖尿病目前发现,MT是清除体内自由基能力最强非酶蛋白,由于其含有多个金属原子和20个还原性---SH而有效地防治糖尿病及其并发症发生。MT与白内障实验证明,白内障形成过程可以被自由基清除剂阻止,而且自由基清除剂可以降低晶状体混浊度。MT是自由基强有力清除蛋白,可以将体内(包括眼内)过剩自由基清除,保护晶状体免受自由基损害作用,从而防治白内障发生,对于已患白内障老年人,每天补充MT可以防止白内障发展,对治疗也大有好处。MT与辐射实验发现,MT含量丰富细胞或组织,可以抵抗离辐射或紫外线引起组织损伤。实际上,MT可以强有力地清除体内过量自由基,保护体免受损伤,所以经接触辐射人,适当补充MT可以防治辐射病发生。对于癌症患者,补充MT可以提高放疗和疗效果,防止或减轻辐射对身体不良影响。MT与消化道溃疡MT是一种强有效自由基清除剂,其分子量小,易于人体吸收,在消化道内将过量自由基清除,防止过剩自由基粘膜细胞损伤,从而防止溃疡发生。MT与肝病从以往研究中,我们不难发现,自由基是肝脏疾病一个重要因素,清除或对抗过剩自由基,对防止肝细胞变性和肝脏疾病发生是非重要。由于MT分子内含有20个具有还原特性---SH基,所以可以有效地清除体内过量自由基,达到防治肝脏疾病作用。MT与肾病实验发现:MT在肝肾含量丰富,但是,当肾脏受到感染,免疫损伤,或缺血时,自由基就会引起肾脏损害,影响肾脏功能发挥,导致疾病发生,所在适当补充MT可以防治肾病发生和发展。MT与体内解毒科学家们经过多年研究,发现MT(金属硫蛋白)在解除重金属中毒方面有突破性进展,MT是一种能与重金属元素高度亲和多肽或蛋白质。MT对各种不同金属亲和力不同,既能排出对人体有害重金属,又能保留住对人体有益微量元素。此外MT还具有无毒副作用的优点,是目前临床上所应用解除重金属方法所不能代替13) MT与微量元素经过美、日、德、中国等国科学家近四十年努力,发现MT具有极其独特和重要生理功能,在生命活动中起着非重要和广泛作用。MT在人体内参与微量元素储存、代谢,维持人体微量元素平衡,调节人体微量元素代谢,使人体组织细胞发挥正有序生理功能。14) MT与动物应激金属元素、糖皮质激素等多种因素均可诱导合MT,成各种生理病理或心理应激也能诱导MT的合成故,MT被认为是一种急性期蛋白。因此MT必然与应激及应激性疾病有紧密联系。15) MT与环境保护MT可作为重金属污染物、潜在重金属污染暴露和毒性效应早期预警的主要生物标志物,以及作为
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