钙离子试剂盒测定说明书

<BioVision>CalciumColorimetricAssayKit钙比色生物试剂盒(Catalog#K380-250;250assays;Storekitat4°C)1.钙相关介绍Calciumisessentialforalllivingorganisms,whereCa2+sequestrationandreleaseintoandoutofthecytoplasmfunctionsasasignalformanycellularprocesses.99%ofcalciumisfoundinbonesandteethwiththeremaining1%foundinthebloodandsofttissue.Serumcalciumlevelsaretightlycontrolled(8.4-11.4mg/dL)andanyvariationoutsidethisrangecanhaveseriouseffects.Calciumplaysaroleinmediatingtheconstrictionandrelaxationofbloodvessels,nerveimpulsetransmission,musclecontraction,andhormonesecretion.Calciumionchannelscontrolthemigrationofcalciumionsacrosscellmembranes,permittingtheactivationandinhibitionofawidevarietyofenzymes.Causesoflowcalciumlevelsincludechronickidneyfailure,vitaminDdeficiency,andlowbloodmagnesiumlevelsthatcanoccurinseverealcoholism.BioVision’sColorimetricCalciumAssayKitutilizesthechromogeniccomplex(入=575nm)formedbetweencalciumionsand0-cresolphthaleintoprovideasimpleassayinthephysiologicallyimportantrangeofcalciumconcentration0.4-100mg/dL(0.1-25mM).2.试剂盒组成组成250规格Cap颜色PartNumber钙测定缓冲液15mlNMK380-250-1显色试剂25mlNMK380-250-2钙标准液(500mM)100ul黄色K380-250-33.试剂制备和储存条件4°C下避光保存，保质期一年。钙测定缓冲液和显色试剂自己配置，保存在4°C的条件下，升温至室温时使用。4.钙含量监测方案标准曲线的准备，稀释到钙标准液至5mM(20mg/dL),方法：将浓度500mM的钙标准液10(微升)"，加到990"的重水(dH2O)中，混合均匀。分别加0,2,4,6,8,10"的标准液到试剂盒各管中使其各管中含有0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0钙离子。每管加入重水到50"体积。样品准备，血清或者尿液样品可以直接应用到这个试剂盒中，将10"样品加入到含有96孔板的管槽中，对于其他液体样品，加入2—50"样到单独/个别的管槽中，加重水至50"体积。样品的测定无需先前的处理。一些MRI造影剂在测试中可能会造成瞬变干扰。附加，分别滴加90"显色试剂到含有钙标准溶液，样品(或者controls变量)的管槽中，混合均匀。分别滴加60"的该测定缓冲液到各个管槽中，混合均匀。

D.在室温避光的条件下使其反应5—10分钟。D.E.控制光照在575nm，发色团不稳定，时间超过了会慢慢淡化，所以要在30分钟内读取标准液和样品所得参数。计算，通过减去所有样品和标准液的读数中零含量的钙控制的派生值来矫正背景(注意：背景读数可能是显著的，而且必须从这些样品读数中减去)，绘制标准曲线Mg/wellvs.O.D.575nm读数，将样品读数应用到标准曲线中以得到管槽中样品的钙含量(Sa)，测试样品中钙离子浓度C=Sa/Sv(ug/ulormg/ml注：Sa为标准曲线中样品的钙含量，单位ug。Sv为加入样品管槽中样品的体积，单位ul。Ca的相对分子质量40.078。样品中钙浓度可以表达为mg/ml,mg/dLormM(mmol/liter)。1mg/ml=100mg/dL;1mM=4mg/dL.y=0.8847x+0.0098coco1.21.51.2CalciumAmount^jg/inrell]Figi.这是标准曲线的绘制96孔板简介96孔细胞培养板、皿系列产品选用进口光学透明纯聚苯乙稀制造。采用特殊工艺而成，使细胞达到最佳吸附状态，所有产品均以伽玛射线灭菌处理。应用细胞培养系列能促进原生代细胞：如神经细胞