平胃散加减方中黄芩、连翘、陈皮的薄层色谱鉴别研究

平胃散加减方中黄芩、连翘、陈皮的薄层色谱鉴别研究

0平胃散的临床应用《平胃散》收录在《医学方剂集》第十卷中，这是一个简单的食谱。它由白术、厚朴、陈皮和甘草组成。功能是干燥。主治湿困脾胃,脘腹胀满,不思饮食,口淡无味,呕吐恶心,嗳气吞酸,常多泄泻,肢体沉重、怠惰嗜卧,舌苔白腻而厚,脉缓。由于其疗效显著,平胃散有诸多加减方应用于临床,并且经现代研究证明,平胃散还具有改善免疫,调控肠黏膜机械屏障,修复肠黏膜离子泵等作用。本文中平胃散加减方,由苍术、厚朴、陈皮、白术、砂仁、黄芩、连翘、甘草组成。本文着重探讨采用薄层色谱法对方中黄芩、连翘、陈皮进行定性鉴别。1合成关注酯、苯、甲醛、三氯甲烷、甲醇酯等为分析纯的高效液相水解液的质量评定黄芩、连翘、陈皮药材由康美药业股份有限公司提供,经广东省药学院中药教研室鉴定为药典正品。甲苯、醋酸乙酯、甲醇、甲酸、三氯甲烷、乙醇等均为分析纯。硅胶G薄层板(GF254硅胶,200~300目,青岛海洋化工厂)、聚酰胺柱(聚酰胺,Pharmacia公司)等为自制。2方法和结果2.1黄鼠的识别2.1.1供试品上样液的制备称取平胃散加减方粉末约1.0g,置回流提取容器中,加乙酸乙酯-甲醇混合溶液30ml(体积比3∶1),加热至微沸,提取40分钟,待冷却后滤过,滤液置旋转蒸发仪中,挥干溶剂后得残渣,加入甲醇5ml使溶解,取上清液,微孔滤膜过滤后作为供试品上样液。2.1.2标准物质的上游样品2.1.3从阴性样品中采集液体称取平胃散加减方阴性样品粉末(平胃散加减方去除黄芩)约1.0g,按上述方法,制成阴性样品上样液。2.1.4氯化铁显色剂的合成分别吸取供试品溶液8μl,对照药材溶液6μl,阴性样品溶液6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(10∶3∶1∶2)为展开剂,预饱和30分钟,展开,取出,晾干,喷以三氯化铁显色剂,在110℃下加热至斑点显色清晰,见图1。2.2连翘的鉴定2.2.1供试品溶液的制备取平胃散加减方粉末1g,加三氯甲烷30ml,加热回流1小时,滤过,弃去滤液,药渣挥干,加甲醇40ml,加热回流1小时,滤过,滤液蒸干,加水溶解,加于聚酰胺柱(14~30目,3g,内径1~1.2cm,用水50m预洗)上,用水50ml洗脱,弃去水液,再用乙醇100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。2.2.2标准物质的制备2.2.3阴性样品溶液的制备2.2.4硅胶g薄层板的制备吸取供试品溶液4μl,对照药材溶液4μl,阴性样品溶液4μl,分别点于同一以含5%磷酸二氢钠的羟甲基纤维素钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以苯作展开剂,薄层板置展开缸中预饱和30分钟,展开,取出,晾干,喷以香草醛硫酸试液,加热至斑点显色清晰;见图2。2.3陈皮的鉴定2.3.1供试品液的制备取平胃散加减方粉末10g,加甲醇25ml,超声处理15分钟,滤过,滤液蒸干,残渣用水20m溶解,离心,上清液上聚酰胺柱,分别用水40ml,30%乙醇40ml洗脱,30%的洗脱液蒸干,残渣加1ml甲醇溶解,作为供试品液。2.3.2标准物质的制备2.3.3阴性样品溶液的制备2.3.4聚酰胺薄膜的检测吸取上述供试品及阴性供试品8μl,对照药材溶液2μl,点于同一块聚酰胺薄膜上。以丙酮-水(1∶1)为展开剂,喷1%AlCl3乙醇溶液,晾干,在365nm处检视。供试品色谱中,在与对照药材相应位置上显相同颜色的斑点。见图3。3薄层色谱测定成分类似成分的药材目前对中药材的鉴定,还是一个难点。对于中药材饮片,可以凭借经验进行性状鉴别,再辅以其它含量测定手段来断定质量;而对于一些粉末、丸剂及其半成品,则很难通过性状进行鉴别,同时,即使采用药典中含量测定法,也只能说明某种特定成分的含量,而不能确定后是否有其它含类似成分的药材掺入。这种情况下,薄层色谱就显示出它的优越性,它可以比较准确地对某种药材进行鉴定,成本低廉,甚至可以进行简单的定量。在上述3种方法的薄层色谱中,作为定性鉴别的方法,简单、快捷、准确,同时阴性样品溶液无干扰,斑点清晰可见,提示我们可以采用薄层扫描进行定量测定。在后续工作中我们会重点研究使用薄层色谱法同时进行定性鉴别和含量测定。称取黄芩药材粉末约1.0g,按供试品上样液制备方法,制成对照品上样液。取连翘药材粉末1g,按供试品溶液的制备方法,制成对照药材溶液。取平胃散加减方阴性样品粉末1