图为依利特色谱柱评价报告课件

任务6分离条件的选择与优化液相色谱分析法模块之任务6分离条件的选择与优化液相色谱分析法模块之1能归纳分离条件的选择原则与优化方法，能将其运用于实际问题的解决能完成色谱柱的评价。

能力目标能归纳分离条件的选择原则与优化方法，能将其运用于实际问题的解2苯、萘、联苯为芳烃类混合物，如何选择一个最佳的色谱分离条件，既能达到良好的分离度，又能在短时间内完成分析任务？课程引入学生根据所查资料提出解决方案并进行现场讨论以确定每组的实验方案。根据学生已能熟练操作液相色谱仪，并有了系统的液相色谱知识，因此，本项目经分组讨论后，直接进行操作。苯、萘、联苯为芳烃类混合物，如何选择一个最佳的色谱分离条件，3学生操作训练1改变流动相的比例，进行条件实验（建议采用甲醇：水为90:1085:1580:2075:25)记录下样品名对应的文件名，同时打印出经优化的色谱图和分析结果。学生完成苯、萘、联苯最佳分离条件的选择学生操作训练1改变流动相的比例，进行条件实验学生完成苯、萘、4测定过程问题、讨论与总结在操作中，每改变一次流动相比例，仪器均需平衡后方可进样。分离度、理论塔板数和分析时间，作为判断分离条件合适的参考参数。学生根据实验数据，每组得出苯、萘、联苯最佳的分离条件。其它注意事项：本项目的测定使用有毒有害的甲醇、苯溶剂，在操作时要注意安全。测定过程问题、讨论与总结在操作中，每改变一次流动相比例，仪器5学生操作训练2学生完成色谱柱的评价实验在选定的分离条件下，进行色谱柱的评价实验要求每位学生独立完成进样，独立处理数据，合理安排时间。废液的处理必须有专门的容器。学生操作训练2学生完成色谱柱的评价实验6影响分离度的因素1N:总的理论塔板数;柱效k’:容量因子(保留因子),色谱峰的保留作用α：色谱峰的相对分离程度;选择性作用等度洗脱的分离度公式影响分离度的因素1N:总的理论塔板数;柱效等度洗脱的分7影响分离度的因素2影响分离度的各因素影响分离度的因素2影响分离度的各因素8影响分离度的因素3容量因子与分离度的关系影响分离度的因素3容量因子与分离度的关系9影响分离度的因素4选择性与分离度的关系影响分离度的因素4选择性与分离度的关系10柱效与分离度的关系影响分离度的因素5改变流动相组成、极性（pH值、强度或梯度洗脱）是改善柱效的最直接的因素。柱效与分离度的关系影响分离度的因素5改变流动相组成、极性（11作用在分离保留值范围较宽的复杂混合物时，随着保留值的增大，色谱峰变宽，使峰的检测发生困难，如果保留值太大，会发生样品洗脱不下来的情况，采用梯度洗脱可以解决这一类的问题。梯度洗脱可以改进复杂样品的分离，改善峰形，减少拖尾并缩短分析时间。种类线性梯度：在某一段时间内连续而均匀增加流动相强度。阶梯梯度：直接从某一低强度的流动相改变为另一较高强度的流动相。影响分离度的因素6梯度洗脱技术作用影响分离度的因素6梯度洗脱技术12色谱柱性能的评价评价方法需要有高性能的液相色谱仪器系统评价色谱柱的样品可以完全分离并有适当的保留时间评价报告一个合格的色谱柱评价报告应给出色谱柱的基本参数，如柱长内径、填充载体的种类、粒度、柱效等。

图为依利特色谱柱评价报告色谱柱性能的评价评价方法图为依利特色谱柱评价报告13下次课程问题苯甲酸和山梨酸是我国目前最常用的食品防腐剂，广泛应用于各种果汁饮料中，以防止其发霉。但如果防腐剂的含量超过标准限度，或者长期饮用含有防腐剂的饮料，则会对人体健康造成不得影响，因此检测果汁中的苯甲酸