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文档简介

细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体知识回顾温故知新1、列举动、植物物细胞工程惯用技术伎俩。2、简述植物体细胞杂交技术(流程、原理、意义等)。第1页温故知新植物体细胞杂交技术12月30日,一场筹备了之久“细胞太空婚礼”将在“神舟”四号飞船上举行,其中一对“新人”是黄花烟草原生质体和革新一号烟草原生质体,在太空微重力条件下,细胞间配对与融合“亲热举动”顺利完成。思索:1、怎样由烟草细胞制备其原生质体?2、诱导植物原生质体融合方法有哪些?3、将杂种细胞培育成杂种植株依据原理及采取技术伎俩分别是什么?第2页为何灭活病毒能诱导动物细胞融合?丧失感染能力保留抗原活性

“太空婚礼”另一对“新人”是B淋巴细胞和骨髓瘤细胞。52页“生物资料卡”第3页一、动物细胞融合1.概念:动物细胞融合(cellfusion)也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞过程。融合后形成含有原来两个或多个细胞遗传物质单核细胞,称为杂交细胞。2.原理:3.诱导融合方法:4.意义:第4页植物细胞杂交与动物细胞融合比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理融合前处理诱导方法用途生物膜流动性植物细胞全能性生物膜流动性用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇取得杂种植株主要用于制备单克隆抗体电激聚乙二醇灭活病毒第5页我国首个含有全球知识产权单克隆抗体类药品获同意上市

近日,国家食品药品监督管理总局同意康柏西普眼用注射液用于治疗黄斑变性眼疾,一滴无色透明“小水珠”,就能让眼底病致盲者重见光明。据悉,该药是高端生物药,也是我国首个含有全球知识产权单克隆抗体类药品。当前全球销售最好药品中,前六位均为单克隆抗体类药品。第6页抗肿瘤——靶向药品市场提速进入新世纪后,抗肿瘤药品市场发生了重大改变,单克隆抗体靶向药品异军突起,带动了整个生物技术市场迅猛发展。抗体是对其抗原有极强专一性“巡航导弹”据IMS数据显示,当前,单克隆抗体类靶向药品销售额已跨越500亿美元大关,预计将到达680亿美元。“瞄准装置”+杀伤性“弹头”第7页1.抗体由何种细胞产生?有何作用?2.抗体主要分布在哪里?二、单克隆抗体抗体传统生产方法从血清中分离抗体浆细胞动物体内抗体抗原传统方法制备抗体特点产量低、纯度低、特异性差第8页怎样大量制备化学性质单一抗体?提醒1:仅利用细胞培养技术培养浆细胞可行吗?

2:哪种细胞是能够无限增殖?

3:能否使B细胞产生抗体能力和肿瘤细胞无限增殖能力集合在一个细胞上?设计方案:浆细胞(一个)——只分泌一个特异性抗体瘤细胞——能无限增殖杂交细胞克隆化培养大量抗体第9页设计方案:浆细胞——只分泌一个特异性抗体瘤细胞——能无限增殖杂交细胞请写出设计方案实施过程,制备大量化学性质单一抗体材料及用具:某抗原、健康小鼠(若干)、小鼠骨髓瘤细胞注射器、培养及培养器皿等所需一切条件克隆化培养大量抗体第10页科勒米尔斯坦荣获1984年诺贝尔生理学或医学奖第11页1、抗体制备过程1、注射特定抗原蛋白目标是什么?2、诱导融合方法有哪些?3、杂交细胞(只考虑两两融合)有几个类型?怎样筛选出杂交瘤细胞,每一个杂交瘤细胞有何特点?4、为何要进行克隆化培养和专一抗体检测?5、由单一杂交瘤细胞取得单抗方法?请结合图2-24阅读53页-54页内容,回答以下问题既能快速大量繁殖,又能产生专一抗体第12页?第13页专一抗体检测呈阳性多孔细胞培养板第14页?克隆化培养专一抗体检测选择培养基杂交瘤细胞专一抗体检测

杂交瘤细胞第15页2、单克隆抗体概念特异性强、灵敏度高,可大量制备3、单克隆抗体优点用单一杂交瘤细胞(浆细胞与瘤细胞融合产生)进行克隆化培养,得到细胞群产生抗体。第16页4、单克隆抗体应用第17页4、单克隆抗体应用(1)作为诊疗试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速同位素标识单克隆抗体,可诊疗肿瘤、心血管畸形等第18页(2)用于治疗疾病和运载药品生物导弹=单克隆抗体+药品

制成生物导弹,将药品定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞,疗效高、副作用小。第19页甲流(H1N1)在世界各地大面积蔓延,有些国家还出现了死亡病例。科学家已经分离出H1N1病毒(一个RNA病毒)。某制药厂依据下面流程图生产预防和治疗甲流抗体,请据图回答相关问题:(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自感染病毒人体内__________细胞,促进d过程惯用诱导剂是__________________。练一练B淋巴细胞聚乙二醇(灭活病毒)第20页甲流(H1N1)在世界各地大面积蔓延,有些国家还出现了死亡病例。科学家已经分离出H1N1病毒(一个RNA病毒)。某制药厂依据下面流程图生产预防和治疗甲流抗体,请据图回答相关问题:(2)假设仅考虑某两个细胞融合,则可形成____种类型C细胞,所以需用培养基筛选出______________________________(填特点)D细胞用于培养。D细胞名称是______________。练一练3既能快速大量繁殖,又能产生专一抗体杂交瘤细胞第21页甲流(H1N1)在世界各地大面积蔓延,有些国家还出现了死亡病例。科学家已经分离出H1N1病毒(一个RNA病毒)。某制药厂依据下面流程图生产预防和治疗甲流抗体,请据图回答相关问题:

(3)不一样种动物体细胞融合,相比诱变育种和杂交育种方法,含有___________________________________________________等突出优点。(4)请说明单克隆抗体主要作用_________________________

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