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文档简介

第1页分子生物学技术(二)临床博士上海医学院分子生物学试验室第2页讲义:《医学分子生物学技术》和《分子生物学试验》主编:潘銮凤,13号楼9楼913室吴老师,25元参考书:1.冯作化主编:《医学分子生物学》2.谷志远主编:《当代医学分子生物学》3.曼尼阿帝斯主编:《分子克隆试验指南》4.高天祥主编:《医学分子生物学》5.陈丙莺主编:《基础与临床分子生物学》第3页上课时间:周二早晨8:00-9:40和周四9:55-11:35地点:周二新201,周四新301,9月2日-10月16日试验:周二早晨9:00-17:00和周四早晨9:50-17:00地点13-9楼,10月21日-11月13日答疑:11月18日,周二早晨9:30-17:00,地点:13-920考试:11.25周二,时间和地点待定第4页考试:闭卷考,理论和试验相结合综合性考试 50%试验汇报 35%试验过程、结果和学习态度15%培养目标:科研能力为主,了解能力、分析问题、处理问题能力。技术关键理论,试验设计,技术应用。基础理论自学为主,欢迎试验课内提问和讨论第5页分子生物学基本原理概述1第6页生物大分子核酸蛋白质糖类脂类小分子第7页

核糖

碱基核酸

核苷酸磷酸 核苷嘌呤 嘧啶AG T(U)C

第8页核苷酸链第9页核苷酸磷酸2’-脱氧核糖碱基第10页第11页H脱氧第12页第13页(C)(U)(G)(A)(T)碱基(base)Purine第14页DNA一级结构:核苷酸排列次序C:线条式B:简化结构式A:化学结构式…pApCpTpG.……..ACTG….P5’……….3’OH长度:核苷酸nucleotide,nt第15页DNA二级结构模式图(双螺旋结构)A-DNA B-DNA Z-DNA

第16页B-DNA第17页长度:碱基对(basepair,bp)第18页DNA三级结构(超螺旋结构)第19页RNA第20页RNA:由四种核苷酸(G、A、C、U)组成戊糖为核糖第21页RNA类型:

信使RNA(messengerRNA,mRNA) 转运RNA(transferRNA,tRNA)

核糖体RNA(ribosomalRNA,rRNA) 核酶(ribozyme) 核内不均一RNA(hnRNA) 小分子核内RNA(snRNA) 反义RNA(antisenseRNA) 小干扰RNA(smallinterferenceRNA,siRNA小/微RNA(microRNA,miRNA)第22页AUGAUGAUG蛋白1蛋白2蛋白3非翻译区翻译区mRNA结构原核(多顺反子)真核(单顺反子)第23页RNA结构第24页第25页第26页蛋白质(protein)第27页蛋白质一级结构:蛋白质多肽链中氨基酸排列次序20种氨基酸肽键第28页丙氨酸精氨酸天冬酰胺天冬氨酸半胱氨酸谷氨酰胺谷氨酸甘氨酸组氨酸异亮氨酸亮氨酸赖氨酸甲硫氨酸苯丙氨酸辅氨酸丝氨酸苏氨酸色氨酸酪氨酸缬氨酸第29页蛋白质二级结构a-螺旋b-片层第30页超二级结构、三级结构、四级结构第31页蛋白质组学(proteomics)

生命现象发生往往是多原因相互作用,包括多个蛋白质

,同时蛋白质在执行生理功效时表现是多样、动态

细胞内全部蛋白质存在及其活动方式

已知基因蛋白质表示谱比较蛋白质组学研究蛋白质组学支撑技术平台和生物信息学研究第32页基因(gene):是核酸分子中贮存遗传信息遗传单位,是指贮存有功效蛋白质多肽链或RNA序列信息及表示这些信息所必需全部核苷酸序列

基因组(genome):细胞或生物体中,一套完整单倍体遗传物质总和。人体23条染色体(核基因组)和线粒体上遗传物质(线粒体基因组)第33页顺式调控元件(顺式作用元件)真核基因结构第34页顺式调控元件(cis-actingelements):指那些与结构基因表示调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合DNA序列反式作用因子(trans-actingelements):可经过结合顺式作用元件而调整基因转录活性蛋白质因子第35页开启子(promotor):RNA聚合酶特异性识别和结合DNA序列增强子(enhancer):为一段DNA序列,其中含有多个能被反式作用因子识别与结合顺式作用元件顺式调控元件:负增强子:缄默子(silencer)增强子 调变子(modulator)第36页反应元件(responseelement):与信息分子结合特异DNA序列,介导基因对细胞外某种信号产生反应。终止子(terminator):基因编码区下游一段DNA序列,提供RNA聚合酶停顿工作信号。第37页1990年正式开启由6个国家20个机构完成年2月15日发表草图204月14日宣告完成人类基因组:31.6亿个核苷酸3万-3.5万个基因,占2%人类基因组计划humangenomeproject(HGP)第38页第39页第40页第41页

基因和基因相关次序(20%~30%)

非编码(>90%)

内含子,开启子5’前次序,3’后次序假基因基因片断编码次序(<10%)

基因以外非编码次序(70%~80%)中度/高度重复次序(20%~30%)分散重复次序(40%)成簇重复次序(60%)单一/低度重复次序(70%~80%)人类基因组人类基因组序列组成第42页部分生物基因组中正常染色体数及基因数生物碱基数目(bp)染色体数基因数人3.2×109233万~4万小鼠3.2×109203万~4万果蝇8×107

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