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文档简介
转基因抗虫棉转基因抗虫棉基因工程培育转基因抗虫棉的过程苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因普通棉花(无抗虫特性)棉花细胞(含抗虫基因)与载体DNA拼接,导入棉花植株(有抗虫特性)表达上述培育过程包括哪些关键步骤?解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具?基因工程培育转基因抗虫棉的过程苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因普通
常用工具分子手术刀——限制酶分子缝合针——DNA连接酶分子运输车——运载体1.1DNA重组技术的基本工具常用工具分子手术刀——限制酶分子缝合针——DNA连接酶分一、限制性核酸内切酶(限制酶)
—“分子手术刀”123来源?种类?命名?特点?结果?活动1阅读课本4-5页相关内容,回答下列问题一、限制性核酸内切酶(限制酶)
—“分子手术刀”123来源来源:主要在原核生物中种类:约4000种命名:如EcoRⅠ1、限制酶的来源来源:主要在原核生物中1、限制酶的来源在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例?这类原核生物之所以长期进化而不绝灭,有何保护机制?1、限制酶的来源资料分析:1、限制酶的来源资料分析:观察表格、尝试归纳限制性内切酶的特点2、限制酶的特点识别双链DNA分子中特定核苷酸序列专一性切割特定序列中的特定位点观察表格、尝试归纳限制性内切酶的特点2、限制酶的特点识别双链ATGCATGC限制酶作用的化学键氢键磷酸二酯键√ATGCATGC限制酶作用的化学键氢键磷酸√作用过程点击播放EcoRⅠ识别GAATTC序列,并在G和A之间切开:作用过程点击播放EcoRⅠ识别GAATTC序列,并在G和A限制酶什么叫黏性末端?
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。限制酶什么叫黏性末端?被限制酶切开的DNA两条单链的什么叫平末端?
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。什么叫平末端?当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时3、限制酶作用的结果结果3、限制酶作用的结果结果1、如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶(如EcoRⅠ)来切割,会怎样呢?
会产生相同的黏性末端2、上述来源不同的DNA片段能否形成重组DNA分子?拓展思维1、如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶(如EcoRGAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGG
CTTAA
AATTC
G用同种限制酶切割(EcoRⅠ)拓展思维GAATTCCTTAA
缺口怎么办?G
CTTAA
AATTCGG
CTTAA
AATTC
G缺口怎么办?GCTTAAAADNA连接酶作用的化学键是什么?DNA连接酶有哪些种类?其来源和特点分别是什么?活动2二、DNA连接酶—“分子缝合针”阅读课本5-6页相关内容,回答下列问题DNA连接酶作用的化学键是什么?DNA连接酶有哪些种类?活动DNA连接酶作用的化学键汇报缝合的是磷酸二酯键DNA连接酶作用的化学键汇报缝合的是磷酸二酯键
21DNA连接酶种类汇报E·coli连接酶T4连接酶只能连接黏性末端既可“缝合”黏性末端,又可“缝合”平末端21DNA连接酶种类汇报E·coli连接酶T4连接酶只能活动3重组DNA分子的模拟制作目的:模拟重组DNA分子的操作过程,说出其基本原理材料用具:
剪刀透明胶条ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATACTATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATGTCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATACAGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG(限制酶EcoRⅠ:GAATTC)(DNA连接酶)活动3重组DNA分子的模拟制作目的:模拟重组DNA分子的操作1、关于限制酶的说法中,正确的是A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序列B、EcoRⅠ切割的是G-A之间的氢键C、限制酶一般不切割自身的DNA分子、只切割外源DNAD、限制酶只存在于原核生物中C及时反馈1、关于限制酶的说法中,正确的是C及时反馈2、DNA连接酶催化的反应是()A、DNA复制时母链与子链之间形成氢键B、黏性末端碱基之间形成氢键C、两个DNA片断黏性末端之间的缝隙的连接D、A、B、C都不正确D及时反馈2、DNA连接酶催化的反应是()D及时反馈三、“分子运输车”—载体作用?特点?分子运输车种类?探究3三、“分子运输车”—载体作用?特点?分子种类?探究3载体的种类质粒动植物病毒λ噬菌体衍生物其他质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌染色体之外的双链环状DNA分子汇报化学本质?载体的种类质粒动植物病毒λ噬菌体衍生物其他质粒是一种裸露的、1234能够在宿主细胞中稳定的保存,并能够复制,以便提供大量的目的基因具有一个或多个限制酶切点,便于与外源基因结合具有标记基因,便于检测和筛选对受体细胞无害载体的条件汇报1234能够在宿主细胞中稳定的保存,并能够复制,以便提供大量携带目的基因进入受体细胞扩增目的基因载体的作用介绍携带目的基因进入受体细胞载体的作用介绍3、作为基因的运输工具——载体,必须具备的条件及理由是()A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制,以便提供大量的目的基因B.具有多个限制酶切点,以便于目的基因的表达C.具有某些标记基因,以便为目的基因的表达提供条件D.能够在宿主细胞中复制并稳定保存,以便于进行筛选A及时反馈3、作为基因的
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