种子发芽试验-标准发芽试验方法

种子生产与经营专业标准发芽试验2016.7.18发芽试验测定程序【操作程序1】选用发芽床【操作程序2】数取试样【操作程序3】置床贴标签【操作程序4】在规定条件下培养【操作程序5】检查管理【操作程序6】幼苗鉴定【操作程序7】结果报告一、选用发芽床农作物种子检验规程中每一作物种通常列出2～3种发芽床。如水稻、小麦规定了TP、BP和S三种发芽床。一般来说，小、中粒种子可用纸上（TP）发芽床，中粒种子可纸间（BP）发芽床；大粒种子或对水分敏感的小、中粒种子宜用砂床（S）。一、选用发芽床

纸床充分湿润后，把多余的水沥去一、选用发芽床砂床加水为其饱和含水量的60%~80%，即手握能成团，松开后能散开二、数种置床发芽试验样品来源必须是净种子。从经充分混合的净种子中，用数种设备或手工数取400粒净种子，100粒为一重复，重复4次。中、小粒种子以100粒种子为一次重复(100×4)大粒种子或带有病原菌的种子，可为50粒(50×8)特大粒种子（花生、蚕豆）25粒为一副重复(25×16)（一）试样来源和数量二、数种置床置床方法最好采用适合的活动数种板和真空数种器，也可用镊子将种子均匀分布在发芽床上。（二）置床注意：种子之间要留有空隙，多以1～5倍种子间距，以保持足够的生长空间。（三）贴标签在标签注明：样品编号品种名称重复次数置床日期二、数种置床在发芽皿或发芽容器底盘的内侧面贴上标签。三、发芽培养和检查管理按农作物种子的发芽技术规定条件，选择适宜的温度，虽然各种温度均为有效，但一般来说，新收获的有休眠种子和陈种子，以选用其中的变温或较低恒温发芽为好。对于需光型种子发芽时必须给予光照；需暗型种子在发芽试验初期必须在黑暗条件下进行试验。（一）发芽培养三、发芽培养和检查管理提示：对于大多数种子，最好加光培养，有利于抑制霉菌的生长繁殖，并有利于正常幼苗鉴定。三、发芽培养和检查管理种子名发芽床温度/℃初次计数天数/d末次计数天数/d附加说明小麦TP;BP;S2048预先加温（30—35℃）；预先冷冻；GA玉米BP;S20-30；25；3047水稻BP;P;S20-30;30514预先加温（50℃）；在水中或HNO3中浸渍24h大豆BP;S20-30;2058棉花BP;S20-30;30;25412（二）检查管理（二）检查管理发芽床湿润、监测温度、去除霉菌、腐烂死亡种子、注意通风换气，保持水分湿度。三、发芽培养和检查管理1、水分和通气发芽床应始终保持湿润，以保持适宜的发芽水分。根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量。发芽应使种子周围有足够的空气，注意通气。纸卷须相当疏松；用砂床时，覆盖种子的砂不要紧压。三、发芽培养和检查管理2、温度温度应保持在所需温度的±2℃范围内，用变温时，通常应保持先高温8h后低温16h。对非休眠的种子，变温应在3h内完成。如是休眠种子，应在1h或更短时间内完成。三、发芽培养和检查管理（二）发芽期间的检查管理3、霉菌管理如发现霉菌滋生，应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时，应调换发芽床，如发现腐烂死亡种子，则应将其除去并记载。4、光照一般采用光照，可抑制霉菌生长，利于幼苗鉴定。如在变温条件下发芽，光照应在8h高温时进行。（二）发芽期间的检查管理提示：对于大多数种子，最好加光培养，有利于抑制霉菌的生长繁殖，并有利于正常幼苗鉴定。四、观察记录（一）试验持续时间：（试验前或试验间）用于破除休眠处理所需时间不作为发芽试验时间的一部分。如果样品在规定试验时间内只有几粒种子开始发芽，则试验时间可延长7d，或延长规定时间的一半。如果在规定试验时间结束前，样品已达到最高发芽率，则该试验可提前结束。四、观察记载当幼苗在主要构造已发育到一定时期时，按规定的标准对每株幼苗进行鉴定。（二）幼苗鉴定四、观察记载1.初次计数把发育良好的正常幼苗应从发芽床中拣出，可疑的或损伤、畸形或不均衡的幼苗，留到末次计数。严重腐烂的幼苗或发霉的种子应从发芽床中除去，并随时增加计数。（二）幼苗鉴定四、观察记载2.末次计数按正常幼苗、不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子分类计数和记载。复胚种子单位作为单粒种子计数，实验结果用至少产生一个正常幼苗的种子单位的百分率表示。（二）幼苗鉴定五、结果计算和表示当一个试验的4次重复（每个重复以100粒计，相邻的副重复合并成100粒的重复），其正常幼苗百分率都在最大容许差距内，则以其平均数表示发芽百分率。不正常幼苗、新鲜不发芽种子、硬实和死种子的百分率均按4次重复平均数计算。六、破除休眠和重新试验1.破除生理休眠2.破除硬实3.除去抑制物质（一）破除休眠六、破除休眠和重新试验(1)怀疑种子有休眠(即有较多的新鲜不发芽种子)，可采用破除休眠方法重新试验，将得到的最佳结果填报，应注明所用的方法。(2)由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤进行试验。应增加种子之间的距离。(3)当正确鉴定幼苗数有困难时，可采用规定的一种或几种方法在砂床或土壤上进行重新试验。（二）重新试验六、破除休眠和重新试验(4)当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样方法进行重新试验。(5)当100粒种子重复间的差距超过同一发芽试验4个重复间的最大容许差距时，应采用同样的方法进行重新试验。（二）重新试验六、破除休眠和重新试验如果第2次结果与第1次结果相一致，即其差异中所示的容许差距，则填报两次试验的平均值。如果第2次结果与第1次结果不相符合，其差异超过“不超过同一或不同实验室相同或不同送验样品间的发芽试验的容许差距”中容许差距，则采用同样的方法进行第3次试验，填报符合要求的结果平均数。（二）重新试验七、容许差距和结果报告（一）容许差距容许差距是指两值之间所能容许不显著的最大差异。两值可以是两个估测值或一个规定值和一个估测值。估测值是指检测种子样品某一质量特性（如发芽率、纯度、净度等指标）的测定值。规定值是指法律、条例、标准或合同规定的种子质量指标所能容许的最低值。七、发芽试验原始记录表（二）结果报告种子生产与经营专业发芽试验重新试验2016.7.20发芽试验测定程序发芽试验当出现一些情况致使结果不准确的，则需要重新试验。重新试验一、怀疑种子有休眠（即有较多的新鲜不发芽种子）时，采用破除休眠的方法，打破种子休眠后进行重新试验。

当试验出现以下几种情况时，应重新试验：重新试验

二、由于真菌或细菌的蔓延而使试验结果不一定可靠时，可采用砂床或土壤发芽床重新试验。如有必要，应增加种子之间的距离。重新试验三、当正确鉴定幼苗有困难时,可根据彼标准发芽试验规定的一种或几种方法用砂床或土壤发芽床进行重新试验。

重新试验四、当发现试验条件、幼苗鉴定或计数有差错时，应采用同样的方法重新试验。重新试验五、当100粒种子重复间的差距超过表1规定的最大容许差距时，应采用同样的方法重新试验。如果第二次试验结果与第一次试验结果的差异不超过表2所示的容许差距，则填报两次试验结果的平均值。如两者之差超过表2所示的容许差距，则以同样方法进行第三次试验，填报未超过容许差距的两次结果的平均值。表1同一发芽试验4个重复间的最大容许差距（%）最大容许差距50%以上50%以下99298397496595693～947～891～929～1089～9011～1287～8813～1484～8615～17567891011121314平均发芽率表1同一发芽试验4个重复间的最大容许差距（%）最大容许差距50%以上50%以下81～8318～2078～8021～2373～7724～2867～7229～3456～6635～4551～5546～50平均发芽率151617181920表2

同一或不同实验室相同或不同送验样品间的最大容许差距（%）最大容许差距50%以上50%以下98～992～395～974～691～947～1085～9011～1677～8417～2460～7625～41平均发芽率23456751～5942～508种子生产与经营专业破除休眠的方法2016.7.18发芽试验测定程序广义的种子休眠是指种子本身未完全通过生理成熟或存在障碍（这种障碍能逐渐消失或采用人为的方法破除），虽然给予适当的发芽条件而仍不能萌发。发芽试验测定程序种子休眠对植物本身来说虽是有利的特性，但对于农业生产却并不一定有利。种子休眠期的长短因作物而异。种子休眠也给生产上造成一些困难，作物到了播种的季节而种子尚处于休眠状态，若未经适当处理即行播种，则田间出苗参差不齐，出苗率低，这就需要采取措施破除休眠。一、破除生理休眠的方法（一）预先冷冻发芽试验前，将各重复种子放在湿润的发芽床上，在5℃~10℃之间进预冷处理，如麦类在5℃~10℃下处理3d，然后在规定温度下进行发芽。

一、破除生理休眠的方法（二）硝酸处理

水稻休眠种子可用0.1mol/L硝酸溶液浸种16h~24h，然后置床发芽。

一、破除生理休眠的方法（三）硝酸钾处理

禾谷类、茄科等许多休眠种子可用0.2%硝酸钾溶液湿润发芽床。一、破除生理休眠的方法（四）赤霉酸处理

燕麦、大麦、黑麦和小麦种子可用0.05%GA3溶液湿润发芽床，休眠浅的种子用0.02%浓度，休眠深的种子用0.1%浓度。芸薹属可用0.01%或0.02%浓度的溶液。一、破除生理休眠的方法（五）过氧化氢处理

可用于小麦、大麦和水稻休眠种子的处理。用29%浓双氧水处理时，小麦浸种5min，大麦浸种19min~20min，水稻浸种2h，处理后，须马上用吸水纸吸去种子上的双氧水。用淡双氧水处理时，小麦用1%浓度，大麦1.5%用浓度，水稻用3%浓度，均浸种24h。一、破除生理休眠的方法一、破除生理休眠的方法（六）去稃壳处理

水稻用出糙机脱去稃壳；有稃大麦剥去胚部稃壳；菠菜剥去果皮或切破果皮；瓜类磕破种皮。一、破除生理休眠的方法（七）加热干燥作物名称温度（℃）时间（d）大麦、小麦30～353.0～5.0高粱302.0水稻405.0～7.0花生4014.0大豆300.5向日葵307.0棉花401.0烟草30～401.0红萝卜、芹菜303.0～5.0黄瓜、甜瓜、西瓜303.0～5.0二、破除硬实的方法（一）开水烫种