微生物试题及分析

一、名词解释（122分 2.假基因 3．反义RNA 4.营养缺陷型 5.噬菌斑6.前噬菌体二、判断题（共10分，每小题1分）紫外诱变时是将菌悬液放在培养皿中，并置于灯管下30cm处的电磁搅拌器上。一般处理时要先打开紫外灯预热20min，然后再开启搅拌器。 （）从土壤中分离菌种时首先要进行采样。采样时是从地表下10-15cm的土壤中用 （）无菌的生理盐水可用于稀释制备好的噬菌体裂解液 （烈性噬菌体是指噬菌体在繁殖过程中会引起宿主细胞的裂解 （噬菌体和λ缺陷噬菌体(dλ)侵染。双重溶源性菌株一般用于低频转导。（）细菌的转座因子可分为4插入序列、转座子、接合型转座子、某些温和性噬菌体(如 （）所有质粒都是独立于染色体外、能进行自我复制的遗传因子 （SD5GA（第一个被测序的原核微生物：大肠杆菌；第一个被测序的真核微生物：毕赤酵母。（能被转录成mRNA。 （）三、填空题（200.5 双重效应。随着紫外线照射时间的增加，杀菌率和突变率随之 但当照射时间延长到某一程度时，继续延长照射时间，其杀菌率 3．经UV诱变后获得的营养缺陷型常包 、核酸三大类 微生物细胞经紫外线照射后，菌液要在黑暗或者黄光下进行操作，主要目的是。紫外线照射细胞后的存活率计算公式 在制备营养缺陷型遗传标记的实验中，为了避免表型延迟要进行，而在二倍氮源 DNA是遗传物质基础的实验是和。证明RNA是遗传物质基础的实验是。以上这三个实验证明了遗传物质是核酸。用酶和DNA大文单词的前三个字母。突变型基因的表示方法是在基因符号的右上角加“”，如亮氨酸缺陷型用来表示。抗药性基因是在基因符号的右上角加“”，加“”表示敏感；(lac,pro)o基因定位；基因组学是研究基因不同序列结构的不同功能、基因表达的调控、基因与环境，基因与蛋白，基因与基因之间的相互作用。11．细菌插入序列的结构特点：两端 （IR； (transposnase,TnP)基因，启动子位于IR中，终止子位于另一IR之前或之内；转座时需要，转座后该序列重复成为DR；IS可独立12．质粒纯化检测方法主要包 法 法和电镜观察法等13．操纵子的结构一般包括4部分： 四、简答题（共34分）1．简述噬菌体和宿主间的溶源性关系。UV的作用和在获得噬菌体裂解液时加入氯仿处理的目的（5分）2．碱变性法提取质粒的主要步骤？（6分）接合型转座子的特点主要包括哪些？（5分转座因子的遗传学效应有哪些？（6分什么是细菌的应急反应？应急反应的调控机理？（6分同源重组与位点特异性重组的主要区别有哪些？（6分） 五、实验设计题（共24分）（15分）2（9分一、名词解释（122分ORF：所谓的编码区，就是开放阅读框架(ORF)DNA链上，从起始密码子开始到RNARNARNA序列，参与调节基因表达，这RNARNA。二、判断题（101分1.30cm处的电磁搅拌器上。20min，然后再开启搅拌器。（√）2.从土壤中分离菌种时先要进行采样。采样时是从地表下10-15cm的土壤中 （）3.无菌的生理盐水可用于稀释制备好的噬菌体裂解液。（）4.烈性噬菌体是指噬菌体繁殖过程中会引起宿主细胞的裂解。(√) 5.携带λ/dλ噬菌体的大肠杆菌，体和λ缺陷噬菌体(dλ)侵染。双重溶源性菌株一般用于低频转导。（64( （√）7．所有质粒都是独立于染色体外、能进行自我复制的遗传因子。（）8．SD序列存在于核糖体结合位点中，一般为5个核苷组成的富含G和A的短小序列。 的原核微生物：大肠杆菌；第一个被测序的真核微生物：毕赤酵母（）10．终止子位于一个基因或一个操纵子的末端，提供转录停止信号的DNA区段终止子不能被转录成mRNA。 （）三、填空题（200.5分外线具有杀菌和诱变双重效应。随着紫外线照射时间的增加，杀菌率和突变率随提高。但当照射时间延长到某一程度时，继续延长照射时间，其杀菌率增加，突变率。的特性，设计实验筛选高产酶活的菌株。(H)和菌落直径(C)之比值(H/C)3UV诱变后获得的营养缺陷型常定。紫外线照射细胞后的存活率计算公式为诱变后活菌数*100/诱变前活菌数。DNA。证RNA遗传物质基础的实验是烟草花叶病毒的拆开和重建实验。以上这三个实验证明了遗RNA酶和胰蛋白酶进行部分处理可消除掉拟核骨架大分子有所展开，但仍维持比自由DNA分子紧凑的结构。利用这个方法可证明拟核骨英文单词的前三个字母。突变型基因的表示方法是在基因符号的右上角加“—”，如亮氨酸缺陷型用leu-来表示。抗药性基因是在基因符号的右上角加“r （IR(transposnase,TnP)IR中,终止子位于另一IR（targetsequenceDR；IS可独立存在，也常常作为其它转座子的一部分-EB密度梯度离法和电镜观察4部分：启动子、操纵基因、结构基因和终止子（2分）③DNA重排(缺失、扩增和倒位)：当一个转座因子插入后由于不准确的（2分）什么是细菌的应急反应？应急反应的调控机理？（6分细胞中鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)RNA合成速度调控机理：①(p)ppGppRNAPol结合，改变酶的构型以识别不同的启动子，改变基因转录的效率，或关闭、减弱或增加（aa的基因（2分）②(p)ppGpp与启动RNAPol（1分）6．同源重组与位点特异性重组的主要区别有哪些？（6分）答：1）；（1DNA之间有较高的同源性和较大范围的联会。而位点特异性DNA（1分）DNA片段的长度是不固定的，而位点特异性重组的插入部分或交换部分基（1分）RecA蛋白质；位点特异性重组依赖Int（整合酶）等。（1分）转化，紫外线损伤修复。位点特异性重组则不同，如：λDNAE.coliDNA的两侧（2分）得分四、实验设计题（24分1（15分16~18h（1分）对数培养取1ml培养液转接于另一只装有完全培养基的三角瓶中，30℃振荡培养6~8h（1分）诱变处理制备细胞悬浮液，于培养皿中（带磁棒（1分1mlUV处理过的菌液于装有完全培养基的三角瓶中，30（1分）（5）10ml无氮基本培养基中，306~8h（1分10ml二倍氮源基本培养基中，301~2h，加入青霉素继续培5~6h（1分）10ml（1分）（6）营养缺陷型菌株的检出0.1ml菌悬液，涂布于限制培养基平板上（3皿或更多，3048h，野生型形成（1分）4（30个格为好分（2分）（7）营养缺陷型菌株的鉴定5ml（1分）（1分）维生素混合液、核酸水