小柴胡汤抗乙肝病毒作用机制的研究进展

小柴胡汤抗乙肝病毒作用机制的研究进展

小柴胡汤是“少阳病热”的主要方针，也是八法中和法的代表方。因其临床应用广泛,疗效卓著而深受国内外中医药界的重视。国外尤其是在日本汉方研究中,常以小柴胡汤与半夏厚朴汤合方(称作柴朴汤),加以应用和研究。本文对近五年国外小柴胡汤的研究进展概述如下:1小柴胡汤治疗慢性充精剂的作用机制近年来认为刺激嗜酸细胞可释放白三烯C4、血小板活化因子(PAF)而引起气管痉挛。日本Tohda氏在柴朴汤对IL-3、IL-5、GM-CSF等酸性细胞活化因子刺激嗜酸细胞生存时间延长作用的研究中,发现柴朴汤可缩短嗜酸细胞生存期,因此认为柴朴汤直接作用于与变应性炎症有关的嗜酸细胞而抑制变态反应。英国HommaH氏在实验研究中发现,柴朴汤中的8种酚类化合物是抑制PMLs(人多核白细胞)释放LT、抗变态反应的活性成分。日本松本达始氏研究后发现,小柴胡汤对实验大鼠肥大细胞中组胺游离有明显抑制作用,而肥大细胞在I型变态反应的表达中起重要作用,其释放的组胺可引起炎症。小柴胡汤抑制组胺的作用机制可能与抗原抗体反应相关蛋白质的磷酸化有关。研究还发现柴朴汤抗变态反应作用机制是:①抑制β受体激动药导致的豚鼠气管中受体的减量调节;②引起狗支气管平滑肌β受体的增量调节;③抑制变态反应炎症细胞产生LTB4、C4;④抑制螨抗原阳性哮喘患者培养淋巴细胞中IgE-FecRⅡ的表达;⑤抑制螨抗原阳性哮喘患者嗜酸性粒细胞的LFA-1α.β及CR3、ICAM-l等粘附分子的表达;⑥使螨抗原阳性哮喘患者培养嗜酸性粒细胞的生存时间明显缩短;⑦抑制螨刺激所导致的螨抗原阳性哮喘患者外周血单核细胞中IL-3、IL-4、IL-5、IL-6的产生,并促进IFN-α的产生。日本谷口千津氏观察到柴朴汤中的成分MA(厚朴酚)、BL(黄芩苷元)、二羟苯基羟基丙酮(DG)具有组胺游离抑制作用,而且以上成分也是柴朴汤参与抗变态反应作用的成分。日本爱媛大学医学院以HBV转基因小鼠作乙肝动物模型,给予小柴胡汤和注射疫苗结合方式处理,结果小鼠对治疗有反应且乙肝表面抗原完全转阴,显示了小柴胡汤有抑制乙肝病毒复制的作用。冈博子氏通过动物实验证明了小柴胡汤能够抑制肝硬化向癌变转化。英国Ohtay氏给大鼠口服和腹腔注射(非肠道给药)小柴胡汤提取剂,发现对防止D-半乳糖胺引起的肝损害有等同保护和预防作用,其机制可能是改善了肝脏蛋白的合成以及减少了对肝血浆和微粒体膜的损害。松田宗人氏认为小柴胡汤抑制肝纤维化作用与肝细胞损害抑制作用及伊东细胞生成胶原抑制作用的参与有关。小岛启介氏在探讨小柴胡汤治疗慢肝的分子药理学机制中,检测到了小柴胡汤调控表达的R条带,确定了碱基系列,并用以DIG标记的探针的RNA杂交,确定了其表达水平的变化。日本名古屋大学Kojimak氏的研究表明,小柴胡汤能增加小鼠肝脏基因cDNA片段,该片段是小鼠细胞色素P450.16αcDNA类似的重要系列,从分子水平提示了小柴胡汤对肝损害的预防作用机制。冲田极氏给大鼠投予化学致癌剂后发现,小柴胡汤治疗组大鼠肝细胞未发现癌变,癌前病变增生性结节的形成也受到抑制。Okitak氏等研究表明,黄芩主要成分黄芩苷与黄芩苷元、柴胡主要成分柴胡皂苷-α具有抗肿瘤作用。YanoH氏等发现小柴胡汤抗肿瘤作用比其各种有效成分单独应用的作用更强。小铺昌氏等证实了小柴胡汤对肝硬变患者IL-12(白细胞介素-12)的降低具有抑制作用,通过免疫调节作用来抑制肝癌的发生。名古屋大学中岛泉氏应用基因探入法制作自发性黑素瘤动物模型,探讨小柴胡汤作用机制,结果表明小柴胡汤对肿瘤的增长有明显的抑制作用,还具有抑制黑素瘤转移和延长生存时间的作用;其机制是:①使细胞周期停滞于G0/G1期,抑制细胞的增殖;②促进黑素瘤细胞的凋亡;③对促进黑素瘤浸润、转移的MMP(金属蛋白酶)有抑制作用,对抑制MMP活性的TIMP(金属蛋白酶的抑制因子)有促进作用。间宫敬子氏以SD雄性大鼠为对象进行实验研究,结果小柴胡汤、柴朴汤对应激性胃溃疡的发生有预防作用。日本YuzuriharaM氏等也发现柴朴汤对胃糜烂有预防作用,其抗糜烂作用包括抑制胃酸分泌等攻击因子的作用和增强胃粘液细胞等防御因子的作用两大方面。英国NishimutaN氏研究显示了小柴胡汤对大鼠胃排空功能有抑制作用;胃排空迟缓影响胃肠吸收,导致治疗糖尿病的甲苯磺丁脲口服后血浓度降低。石原健至氏测定患者服柴朴汤后血液和尿液中该汤的各种成分及代谢物,搞清了它们的化学结构。武藤理英氏在服小柴胡汤后人血浆中发现了新的黄芩苷(BG)代谢物——被鉴定为6位有硫酸基的黄芩苷元6-0-硫酸(BS)。OhtakeN氏以小鼠为对象的研究显示,小柴胡汤很多成分都与IL-6诱导活性有关,体外研究表明小柴胡汤对LPS诱导的肺损害的迟发型变态反应有抑制作用,以上结果表明小柴胡汤对局部免疫反应引起的肺炎有调节作用。MaruyamaY氏对柴朴汤具有抗焦虑作用成分进行鉴定,显示其主要成分是厚朴酚(5,5’-二-2-丙烯基-1,1’-二苯-2,2’-二酚)与和厚朴酚(3’,5-二-2-丙烯基-1,1’-二苯-2,4’-二酚),其中尤以和厚朴酚的抗焦虑作用明显。2临床研究2.1小柴胡汤治疗慢性肝炎的疗效日本曾根美好氏将接受干扰素治疗的100例丙型肝炎患者用双盲法分组,一组给予小柴胡汤,另一组给予保肝药。服药5个月后,小柴胡汤组AST值、ALT值明显下降,HCV-RNA明显降低(P<0.05),慢性丙型肝炎是国际公认的疑难病证之一,目前采用的干扰素治疗副作用多且有效率低,临床研究证实,小柴胡汤可有效治疗慢性丙型肝炎,抑制或延缓肝硬变、肝癌的发生,且对肝脏无任何副作用。冈博子氏从五年累积肝癌发生率、累积生存率、血清转氨酶变化、AFP浓度四方面,对小柴胡汤预防肝硬化发展为肝癌所起的作用,进行了长达五年的前瞻性研究,结果表明小柴胡汤可防止肝硬化向肝癌转变,特别是对非乙型肝炎肝硬化的肝癌发生率有明确影响,其疗效确切,副作用小,费用低廉。2.2柴辛汤有重组菌的活性川野昌子治疗16例接受了抗癌药治疗及头颈部放疗的癌症患者,小柴胡汤对抗癌药、放疗所导致的口腔粘膜糜烂疼痛有临床治疗作用,其疗效与抑制活性氧产生作用有关。日本金医科大学山田刚也氏对104例主诉为舌疼痛但无舌器质性病变患者,随机分为柴朴汤组、安定组与复合VitB组治疗三个月,柴朴汤组症状改善率为87.1%。疗效最显著。山际干和氏经临床研究证实,柴朴汤对有抑郁倾向的咽异感症疗效可与抗抑郁作用的西药相匹敌,其疗效特点是见效慢,但疗效持续。清水正彦氏研究显示,小柴胡汤加桔梗、石膏对外阴阴道念珠菌症高危中老年妇女的急性咽扁桃体炎有效。2.3治疗过敏性鼻炎的作用日本对变态反应性鼻炎呈慢性化者,使用具有类固醇作用的柴胡剂治疗有效,如柴朴汤、小柴胡汤等。2.4患者肺功能检查冲本二郎氏用柴朴汤治疗主诉呼吸困难,胸痛患者16例,经胸X线、心电图、肺功能检查无异常。小柴胡汤能有效治疗膈肌异常引起的炎症,二方合用的柴朴汤对胸部不定愁诉有效。3小柴胡汤与间质性肺炎日本报道在1998～1999二年中,有50例肝癌肝硬变患者因服用小柴胡汤引起间质性肺炎,其中体力下降8例患者死亡。1998年第49次日本东洋医学会对小柴胡汤引起间质性肺炎问题进行了探讨。在病例研究方面,左藤笃彦氏认为小柴胡汤进一步促进了IL-8产生,分解细胞外基质,使肺纤维化发展而导致间质性肺炎;在已病情况下仍长期服用小柴胡汤,会导致肺纤维化的细胞因子重新表达调控,使炎症急性恶化,肺组织迅速纤维化而致死亡。因此,早期发现并停用小柴胡汤,同时给予类固醇就能使间质性肺炎得到控制和治愈。在药理学研究方面,介绍了小柴胡汤引起间质性肺炎的三种不同观点:①是小柴胡汤毒性副作用和误治的结果;②是一种变态反应;③小柴胡汤与间质性肺炎无因果关系。田代具一氏认为尽管还没有证据能证明小柴胡汤的副作用或毒性导致间质性肺炎,但高龄者和肝功能障碍者发病较多,提示可能由于患者的药物代谢或解毒功能降低,使药物在体内蓄积而致发病;另外也应考虑到误治、半夏的炮制及黄芩成分代谢问题。在流行病学方面,统计表明服小柴胡汤者引起间质性肺炎发病率为十万分之一,死亡率为百万分之一;证实小柴胡汤的安全性高是西药达不到的,而且还不能完全确定小柴胡汤与特发性肺炎发生的关系。与此相反,在此次会议上,本间行彦氏则报道应用小柴胡汤治疗3例间质性肺炎获效,表明小柴胡汤对间质性肺炎有治疗作用。4小柴胡汤的研究应注意的几个问题第一,小柴胡汤临床应用较为广泛,可用于不同的多系统的器质性和功能性疾病,显示了小柴胡汤和解功效多面的特点及疗效机制丰厚的内涵。特别是在现代医学发达的西方社会,小柴胡汤用来治疗难治性疾病如肝癌、慢性丙型活动性肝炎、肝硬化、变态反应性疾病、免疫性疾病等取得满意的临床疗效,凸显了中医药临床治病的优势。第二,国外对小柴胡汤的研究以实验研究为重点,应用现代医药多种新技术,从分子水平、药理学、免疫学、毒理学、成分分析等多领域对小柴胡汤加以研究。所取得的结果从微观和现代科学的角度阐述了中医药的科学性,这方面值得国内中医药界借鉴和学习。第三,国外尤其是日本对小柴胡汤的研究仍是重药轻医,缺乏中医辨证论治理论的指导,这样的研究从总体上来说是不全面的,也限制了中医药在临床的扩大运用。只有坚持在中医辨证论治理论指导下,从整体上运用现代科学技术去研究中医药,才