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文档简介
学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精学必求其心得,业必贵于专精专题04动物细胞工程【基础回顾】1.动物细胞培养—-动物细胞工程技术的基础(1)动物细胞的培养过程(2)培养条件①无菌、无毒的环境:对和所有培养用具进行无菌处理,添加,定期更换培养液以清除。②营养:除正常的有机和无机营养外,加入等一些天然成分。③适宜的温度和pH:温度为℃(哺乳动物),pH为。④气体环境:含95%空气加的混合气体,其中后者的作用是.(3)应用:生物制品的生产、检测有毒物质、医学研究。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)动物体细胞核移植技术的过程(2)原理:.(3)结果:.(4)应用:①加速家畜进程,促进优良畜群繁育。②保护.③生产医用蛋白。④作为异种移植的供体.⑤用于组织器官的移植.3。动物细胞融合和单克隆抗体的制备(1)动物细胞融合①原理:。②融合方法:聚乙二醇(PEG)、、电激等。③意义:突破了的局限,使成为可能,也为制造开辟了新途径。(2)单克隆抗体①制备过程②优点:特异性强、,可大量制备.③用途:作为;用于治疗疾病和。【想一想】例1。如图为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。下列判断错误的是
A.B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养
B.接触抑制现象主要发生在AB段和DE段
C.分瓶后的每个培养瓶中的细胞群称为一个克隆
D.E点后的细胞大多数具有异倍体核型,从而可连续传代例2.核苷酸合成有两个途径,物质A可以阻断其中的全合成途径(如图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶,制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶.现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述,正确的是A.免疫的B细胞及其互相融合细胞因全合成途径被A阻断而在HAT培养基上不能增殖B.骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖C.杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖D.HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体例3.下图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述不正确的是
A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法均可诱导细胞融合获得乙
C.用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能增殖,未融合细胞均不能增殖
D.丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁【练一练】1.下列有关动物细胞培养时所提供的物质及其作用的描述不正确的是()选项提供物质作用A抗生素防止培养过程中被病毒感染B血清补充培养基中缺乏的物质C氧气满足细胞代谢的需要D二氧化碳维持培养液的酸碱度2.动物细胞融合中常用到灭活的病毒,如灭活的仙台病毒,病毒被灭活后它的抗原性和感染力是A。失去抗原性,具有感染力B。失去抗原性,失去感染力C.具有抗原性,失去感染力D.具有抗原性,具有感染力3.科研人员将抗癌药物连接在单克隆抗体上制成“生物导弹”,用于癌症治疗。“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是“杀伤性弹头”,分析下列有关描述,其中不正确的是A。“弹头”可能由同位素、化学药物和毒素等物质构成B。“瞄准装置”由识别肿瘤的单克隆抗体组成C。“生物导弹”疗效高,但毒副作用大D。“生物导弹”的制备应用了细胞工程4。如图表示抗人体胃癌的单克隆抗体的制备过程,有关叙述错误的是 A.图中实验小鼠注射的甲是能与抗人体胃癌抗体特异性结合的抗原
B.利用聚乙二醇、灭活的病毒和电激等方法可诱导细胞融合获得乙
C.用特定的选择培养基对乙筛选,融合细胞均能生长,未融合细胞均不能生长
D.丙需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选后可获得大量能分泌所需抗体的丁5。某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行动物细胞培养.下列叙述正确的是
A.制备肝细胞悬液时,可用胃蛋白酶处理肝组织块
B.恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右,以促进细胞呼吸
C.为了保证细胞培养所需的无毒环境,需大量添加各种抗生素
D.本实验应设置对照实验,以检测药物对甲、乙的毒性大小6.据图分析,下列叙述错误的是
A.与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性表现能力较高
B.过程②是诱导干细胞基因选择性表达的结果
C.过程③中细胞的融合具有随机性
D.过程④制备的单克隆抗体能高效治疗多种疾病7.下列关于对某种动物的肝肿瘤细胞进行培养的叙述中,不正确的是A.制备肝肿瘤细胞悬液时,可用胰蛋白酶处理肿瘤组织块B.培养基中通常需加入适量的抗生素、血清或血浆等成分C.体外培养时肿瘤细胞可能失去接触抑制现象而互相堆积D.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸8.下列技术或方法与原理不相符的是A.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养-—细胞增殖B.植物组织培养和制备单克隆抗体——细胞的全能性C.原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性D.纤维素酶、果胶酶处理植物细胞壁-—酶的专一性9。某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性.供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量。(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是.细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是。(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用处理。(4)为了防止基因培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的。(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲组细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检验X基因在A、B两组细胞中的或合成水平的差异,确定Y的药效。10。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有。(2)若要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过等过程制成装片,然后在显微镜下观察.杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是,在HAT培养基上存活的细胞可能包括(填下列序号)。①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞(3)对于抗体检测呈性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液mL,使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。(4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是。(5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路.除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再衙要写出一种制备单克隆抗体的思路。。11。下图所示为动物细胞培养的基本过程示意图.请回答:(1)容器A中放置的一般是幼龄动物的器官或组织,原因是其细胞,易于培养。培养时先要剪碎,然后用分散细胞,制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为。(2)细胞正常培养了一段时间后,发现细胞绝大部分死亡,只有极少数细胞存活,这是因为存活的细胞发生了,可无限增殖。目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为代以内,以保持细胞正常的核型。(3)C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境,需要添加一定量的。培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境,CO2的作用主要是。(4)动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。下图是血清对正常细胞和癌细培养影响的实验结果。据图可知,培养细胞一定需要添加血清。【乐一乐】良鸟择木而栖
俗话说“良鸟择木而栖",最近的两项科学研究表明,鸟类似乎真有挑选住处的本事。法国和瑞典的学者对瑞典哥特兰岛上的一种京燕进行了跟踪研究,结果发现新婚的京燕夫妇在选择筑巢
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