大蒜中三种主要蒜氨酸类化学成分的合成及鉴定

大蒜中三种主要蒜氨酸类化学成分的合成及鉴定

大蒜是单带白豆科的一种植物大蒜(。1材料和方法1.1gma公司的纺粘设备S-甲基-L半胱氨酸:购自Sigma公司。无水乙醇、氢氧化钠、L-半胱氨酸盐酸盐、乙酸、2-烯丙基溴、1-溴代正丙烷、30%H1.2plc和ms搅拌器:85-2型恒温磁力搅拌器上海司乐仪器有限公司;HPLC:LC-20AT日本岛津公司;MS:WatersQuattroMicroAPI美国Waters公司;核磁共振仪:Dpx-300MHzNMR德国Bruker公司。1.31.3.1s-烯丙基-l-半胱氨酸的合成L-半胱氨酸盐酸盐7.9g溶于150mL无水乙醇中,不断搅拌下逐滴加入20M的NaOH溶液11.25mL。然后滴加8.7mL2-烯丙基溴,搅拌2min后将溶液转移至一个干净的烧瓶,用乙酸调节pH到5.2。放置于24h。过滤收集白色沉淀组分,所得化合物干燥,得到S-烯丙基-L-半胱氨酸。将2-烯丙基溴用1-溴代正丙烷取代,得到S-丙基-L-半胱氨酸。1.3.2s-烯丙基-l-半胱氨酸亚和s-丙基-l-半胱氨酸亚的合成在0.6M的S-甲基-L-半胱氨酸水溶液23mL中加入1.75mL30%H将S-甲基-L-半胱氨酸分别用合成的S-烯丙基-L-半胱氨酸和S-丙基-L-半胱氨酸取代,得到S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜和S-丙基-L-半胱氨酸亚砜。1.3.3流动相、柱温度和检测波长色谱柱:VenusilMPC18(25cm×4.6mm,5μm);流动相:V(甲醇)∶V(水)为10∶90;流速:0.4mL/min;柱温:30℃;检测波长:205nm;进样量:20μL。1.3.4离子源温度ESI正离子检测模式:毛细管电压:3000V;锥孔电压:25,40,50V;二级锥孔电压:0.3V;六级杆透镜电压:3V;离子能量:0.8;离子源温度:120℃;脱溶剂气温度:350℃;脱溶剂气(N)流量:350L/h;锥孔气(N)流量:50L/h。1.3.5“三自”结构的应用以D2结果与分析2.1化合物纯度测序由图1可知,三种合成化合物的保留时间分别为4.267,4.771,5.267min,各谱图中除了各自的主峰外再没有其它杂峰顶,说明合成的化合物纯度较好。2.2半胱氨酸亚还原酶ms检测S-甲基-L-半胱氨酸亚砜、S-丙基-L-半胱氨酸亚砜和S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜三种合成物的MS谱图分别见图2中的A,B,C。从蒜氨酸的结构特性,可知其在酸性介质中是以阳离子的形式存在的。因此我们采用电喷雾的离子化方式,在正离子的模式下检测。由图2可知,三种合成化合物的[M+1]2.32.3.1浓度为5个月时,其与亚链内同时点背景耦合成3.S-甲基-L-半胱氨酸亚砜的对图3进行解析如下:δ2.77,3个H,单峰,因为与亚砜基团相连,化学位移减小,故应为CHδ3.35,2个H,因耦合成多重峰,推测为-S(O)-CHδ4.18,1个H,与强吸电子基因相连,推测为-S(O)-CH2.3.2裂采用-s-chS-丙基-L-半胱氨酸亚砜的对图4进行解析如下:δ0.99,3个H,因与-CHδ1.72,2个H,因与CHδ2.90,2个H,因与-CHδ3.32,2个H,裂分为多重峰,且化学位移较低,推测为-S-CHδ4.16,1个H,就为-CH-,裂分为四重峰,推测为-S-CH2.3.3裂采用远程耦合法和苏-ch-s的耦合关系S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜的对图5进行解析如下:δ3.35,2个H,化学位移较高,可能与供电子基团相连,又因为裂分为多重峰,可能存在远程耦合,推测为-CH-CHδ3.70,2个H,因化学位移较低,可能与吸电子基团相连,又因为裂分为两重峰,推测为-S-CHδ4.18,1个H,应为-CH-,裂分为四重峰,推测为-S-CHδ5.48和δ5.86为端烯的特征化学位移,其中,δ5.48,2个H,应为CH3s-脂肪族-l-半胱氨酸亚的合成本实验以L-半胱氨酸盐酸盐为原料,对大蒜中三种主要蒜氨酸-S-甲基-L-半胱氨酸亚砜、S-丙基-L-半胱氨酸亚砜和S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜进行了合成,在合成过程中发现,在S-脂肪族-L-半胱氨酸合成后需要尽快进行氧化实验得到其亚砜产物,若长时间放置后再氧化,得到产物的